核因子κB受体活化因子配体和肿瘤坏死因子α经炎性牙周膜干细胞外泌体促进破骨细胞分化

目的　慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见，牙周膜干细胞（PDLSCs）的外泌体（Exo）对骨吸收的作用和影响尚不明确，本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法　分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs，通过流式细胞术检测表面标记物；通过差速离心分别提取2种细胞的Exo，即Exo-WT和Exo-CP，并通过Western blot、透射电子显微镜（TEM）、蛋白浓度检测、纳米粒径追踪检测Exo特征；通过蛋白质谱检测2种Exo的蛋白组分；通过酶联免疫吸附（ELISA）验证了差异表达蛋白肿瘤坏死因子α（TNF-α）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、白细胞介素（IL）-1α、转化生长因子β（TGF-β）、骨形态发生蛋白2（BMP-2）表达水平；将10、100、1 000 μg·mL^-1的Exo-CP或Exo-WT加入RAW264.7培养基中并于5 d时通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、Western blot、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨分化相关指标表达情况；采用SPSS 24.0软件对实验数据进行统计学分析。结果　Exo-CP富集的差异表达蛋白主要与破骨细胞分化的TNF信号通路、核转录因子κB（NF-κB）信号通路相关；ELISA实验证实了Exo-CP中高表达TNF-α、RANKL、IL-1α，低表达TGF-β1、BMP-2（P<0.05）；Exo-CP作用于RAW264.7，显著提高了细胞的破骨分化相关基因及蛋白的表达水平，TRAP染色可见分化的破骨细胞，且呈现浓度依赖性，100、1 000 μg·mL^-1浓度Exo-CP对破骨细胞分化的促进作用显著高于10 μg·mL^-1浓度组（P<0.05）。结论　慢性牙周炎的病理性骨吸收可能由炎性PDLSCs所分泌的Exo通过促进破骨细胞分化引起，Exo中主要的作用蛋白可能为RANKL和TNF-α，本研究为慢性牙周炎骨吸收的发病机制提供了新视角。     

紧密型医联体模式下全科医学科建设探索

目的 探讨紧密型医连体模式下全科医学科的定位。 方法 通过对比分析国内全科医学科的发展和深圳市5家区属医院全科医学科的实际运行情况，探索紧密型医联体模式下全科医学科在组织架构、功能定位和学科发展方面的建设。 结果 我国全科医学科的发展主要依赖学科联盟，通过教学师资输出与师资培养在临床基地和实践基地间建立联系。紧密医联体模式下全科医学科发展可借用行政手段强力推进，有利于分级诊疗。2016年深圳市社康机构基本医疗服务人次占全市公立医疗机构门急诊总诊疗量的42.66%。选择在社区首诊的医保参保人数量863万，占全市参保人总数的70%。深圳市区属医院全科医学科在组织架构上多采用双重管理模式，即在业务上归属医务科等职能部门管理，行政上归属社区健康管理中心管理。全科医学科在功能定位上侧重于全科教学，着重于全科医学人才培养，为基层输送合格的全科医生。全科门诊是全科医生的主要带教场所，全科住院部适合收治多病共存、未分化疾病和教学患者，有利于全科医生对典型患者的系统学习。 结论 紧密型医联体模式有利于分级诊疗推进，该模式下全科医学科组织架构可采用双重管理，其功能定位为全科教学，其学科发展方向为多病共存患者照顾。      

白蚁巢胶囊联合常规西药治疗肝肾阴虚型SLE的疗效观察

目的探究白蚁巢胶囊联合常规西药治疗肝肾阴虚型系统性红斑狼疮(SLE)的疗效观察。方法136例肝肾阴虚型SLE患者,根据SLEDAI积分的分型及治疗方法不同分为轻型对照组、轻型观察组、中型对照组、中型观察组,每组34例。轻型对照组患者采用醋酸泼尼松片(商品名:强的松)(PDN)+硫酸羟氯喹(HCQ)治疗,轻型观察组患者采用强的松+硫酸羟氯喹+白蚁巢胶囊治疗,中型对照组患者采用强的松+硫酸羟氯喹+来氟米特片(Lef)治疗,中型观察组患者采用强的松+硫酸羟氯喹+来氟米特片+白蚁巢胶囊治疗。比较四组患者临床疗效;治疗前后中医证候积分、系统性红斑狼疮疾病活动度评分(SLEDAI)评分;不良反应发生情况。结果治疗60 d后,轻型观察组患者的治疗总有效率97.06%高于轻型对照组的82.35%,中型观察组患者的治疗总有效率为97.06%高于中型对照组的76.47%,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,四组患者的中医证候积分和SLEDAI评分均低于本组治疗前,且中型观察组降低程度优于中型对照组、轻型观察组降低程度优于轻型对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。轻型观察组患者的不良反应发生率2.94%低于轻型对照组的20.59%,中型观察组患者的不良反应发生率8.82%低于中型对照组的38.24%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论白蚁巢胶囊联合常规西药治疗肝肾阴虚型SLE具有较好的临床疗效,减少西药的不良反应和毒性,具有临床推广应用价值。     

带阴毛穿支皮瓣的应用解剖

目的　探讨阴阜区穿支血管的解剖学特征，为修复头面部带毛区皮肤软组织缺损提供解剖学基础。 方法　选用体积分数10%甲醛常规防腐固定的成人尸体标本15具（30例，男18例、女12例），采用乳胶灌注、显微解剖、摹拟手术等方法，重点观测：①阴阜区穿支血管的起始、走行、分支与分布；②阴阜区穿支间的吻合情况。 结果　阴阜区皮肤血供主要由阴部外浅动脉供养，该动脉自股动脉发出后行向内上，在大隐静脉末段内、外侧分出上、下两支。上支向内上跨过腹股沟韧带进入阴阜部，并在前正中线附近与对侧同名动脉相吻合，走行过程中发皮支供养阴阜部阴毛覆盖区大部皮肤。下支近水平行向内侧进入耻骨前区，沿途分支营养股内侧部上份、耻骨前区及阴囊（唇）。上、下支起始外径分别为（1.2±0.2）mm和（1.1±0.3）mm。 结论　阴阜区皮肤血供丰富，可以阴部外浅动脉穿支为蒂设计带阴毛阴阜区皮瓣修复头面部带毛区皮肤软组织缺损术式。     

超极化激活环核苷酸门控阳离子通道亚型在大鼠脊髓背角浅层的特异性表达

目的:探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channels,HCN通道)4种亚型在大鼠脊髓背角浅层的表达与分布特点。方法:选取3~5周龄SD大鼠,雌雄不拘,制作L4~L5段脊髓横切片,应用免疫组织化学技术及激光共聚焦成像技术,观察HCN通道的4种亚型在脊髓背角浅层神经元、胶质细胞及神经元亚细胞结构中的分布。结果:HCN通道不同亚型在正常SD大鼠脊髓背角中的表达和分布具有特异性:(1)HCN1主要与神经元标志物[神经元核抗原(neuronal nuclei,NeuN)]和星形胶质细胞标志物[胶质细胞原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)]共存,HCN2和HCN3主要与NeuN共定位;(2)HCN2主要与肽能初级传入神经末梢标志物[降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)]共存,HCN4主要与非肽能初级传入神经末梢标志物[异凝集素B4(isolectin B4,IB4)]共存;(3)HCN1和HCN4主要与神经元树突标志物[微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP2)]共存;(4)HCN4主要与抑制性中间神经元轴突末梢标志物[囊泡γ-氨基丁酸转运体(vesicularγ-aminobutyric acid transporter,VGAT)]共存。结论:HCN1~4主要分布在大鼠脊髓背角浅层,且在神经元、胶质细胞及神经元亚细胞结构中呈特异性分布。     

环子孢子蛋白基因检测法对1例间日疟病例的溯源

对2014年1例初诊为河南省本地感染的间日疟病例进行实验室检测与流行病学溯源调查,以明确其感染来源。收集该病例的流行病学资料,分别采用厚薄血膜吉氏染色法、疟疾快速诊断试纸(RDT)法和巢式PCR法检查患者外周血液,并对其环子孢子蛋白(CSP)基因序列进行分析。流行病学调查显示,该患者曾于2013年5月至缅甸停留约1周,同年6月发病,确诊为间日疟,经青蒿琥酯治疗后,疟原虫转阴,症状消失。CSP基因序列分析显示,该患者前后两次发病时的血样扩增出的CSP序列的中央重复区完全一致,与缅甸分离株(Gen Bank登录号为ABS95455和ABS95456)的序列一致性分别为95.1%和100%,与2个河南分离株HN3和HN7(登录号为KP888996和KP889000)的序列一致性分别为88.8%和67.1%。推测该病例为输入性间日疟复发病例。