酶联免疫吸附法测定三种CTB与其受体GM1的亲和性

霍乱毒素(cholera toxin,CT)是霍乱弧菌产生的相对分子质量为84 kD的肠毒素,由1个A亚单位(CTA)和5个B亚单位(CTB)形成的五聚体共价连接而成。CTA(大约28 kD)为毒性亚单位,CTB(大约12 kD)为无毒的受体结合亚单位,可以和所有有核细胞膜上的单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)结合。CTA则通过CTB与GM1的结合作用得以进入细胞发挥其毒性级联反应[1,2]。目前,CTB已作为载体蛋白广泛用于基础研究。本文采用ELISA法测定了两种国产CTB与其受体GM1之间的亲和性,并与国际标准品CTB进行了比较。材料与方法1材料GM1为Sigma公司产品。羊…     

空间生物技术在干细胞和组织工程学研究中的应用

随着空间技术的发展，国内外近年来有关研究表明、太空微重力、射线和重金属离子辐射对哺乳动物细胞生物学和发育生物学具有一定影响，提示太空环境的特性及特殊优势可以为干细胞生物学和组织工程学研究提供新的实验模型。     

人类羊膜细胞表达神经干细胞特异性蛋白研究

目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在.方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vimentin)和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达.结果人羊膜组织中存在nestin/GFAP双阳性细胞,此外,还表达musashi-1、vimentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白;培养羊膜细胞中存在vimentin和PSA-NCAM阳性细胞,以及nestin/GFAP双阳性细胞.结论羊膜组织和培养羊膜细胞中有神经干细胞特异性标记蛋白的表达.     

植物雌激素与突触素表达及空间认知水平的相关性研究

目的观察两种雌激素—α-玉米赤霉醇(α-ZAL)和苯甲酸雌二醇(EB)对β淀粉蛋白毒性片段Aβ25-35所致神经损伤小鼠学习记忆的保护作用。方法选用雌性Balb/C小鼠,经侧脑室注射Aβ25-35造成拟老年性痴呆模型,用Morris水迷宫测其空间学习记忆能力,用RT-PCR,Westernblot等方法观察脑突触素的表达。结果模型组小鼠寻找平台的潜伏期明显延长,经两种雌激素治疗后有明显改善。模型组小鼠海马突触素mRNA表达水平较对照组明显降低,经两种雌激素治疗后其表达明显增强。结论模型小鼠学习记忆能力下降的原因之一与突触素表达下降密切相关。植物雌激素α-ZAL和EB一样能对抗Aβ25-35的毒性作用,促进突触素的表达,从而改善小鼠的学习记忆能力。     

参乌胶囊对拟杭廷顿病模型大鼠学习记忆能力的干预作用

背景参乌胶囊是由首都医科大学宣武医院药理研究室自行研制用于治疗老年痴呆的纯中药制剂,对多种拟痴呆模型动物的学习记忆能力有很好的改善作用. 目的观察拟杭廷顿病( Huntington disease,HD)模型大鼠学习记忆能力改变及参乌胶囊对其的干预作用,探讨其可能的作用机制. 设计随机对照的实验研究. 地点和材料实验地点 首都医科大学宣武医院药物研究中心.雄性 SD大鼠 60只,随机分为正常对照组 ,3-硝基丙酸( 3-nitropropionic acid , 3-NPA)模型组 ,参乌胶囊小剂量、中剂量和大剂量组,氟哌啶醇组.每组 10只.在实验进行中,正常对照组死亡 1只, 3-NPA模型组和参乌胶囊小剂量组各死亡 2只,氟哌啶醇组死亡 3只,考虑死亡原因为吸入性窒息. 干预 3-NPA模型组用 3-NPA 20 mg/kg对 SD大鼠隔日腹腔注射 1次,共 20 d,建立拟 HD大鼠模型.造模的同时,参乌胶囊小剂量 (0.45 g/kg)组,中剂量 (0.9 g/kg)和大剂量 (1.8 g/kg)组大鼠给予参乌胶囊连续灌胃 25 d.氟哌啶醇组自造模当日起给予氟哌啶醇,起始剂量为 100 μ g/( kg· d),隔日递增 ,直至 1 000 μ g/( kg· d). 主要观察指标大鼠在 Morris水迷宫中的游出时间和距离;在避暗实验中的潜伏期和错误次数;海马处胆碱乙酰基转移酶活性;大鼠海马 CA4区胶质细胞源性神经生长因子的细胞数量及细胞面积. 结果 Morris水迷宫实验中, HD模型大鼠游出时间和距离明显延长,参乌胶囊小和中剂量组较 3-NPA模型组游出时间分别缩短 24.01%和 32.64%,游出距离显著缩短.避暗实验中, 3-NPA模型大鼠较正常对照组动物进入暗箱的潜伏期显著缩短,参乌胶囊中、大剂量组较 3-NPA模型组动物进入暗箱的潜伏期明显延长.海马处, 3-NPA模型组大鼠较正常对照组 ChAT活性明显降低,参乌胶囊大剂量组和氟哌啶醇组较 3-NPA模型组动物 ChAT活性显著性增高( P< 0.01〉.海马 CA4区, 3-NPA模型组动物 GDNF阳性细胞的表达减少,阳性细胞总面积减少.而参乌胶囊中剂量组对于此区 GDNF阳性细胞的表达明显具增强作用. 结论拟杭廷顿病模型大鼠存在明显的学习记忆障碍,参乌胶囊可明显改善模型动物的学习记忆能力.     

久强脑立清对昆明种小鼠行为的影响

目的评价久强脑立清 (JNQ)对昆明种小鼠行为的作用。方法采用自发运动、Morris水迷宫、转杆实验、对咖啡因引起的兴奋作用、戊巴比妥钠睡眠时间、戊巴比妥钠阈下催眠剂量实验以及对戊四唑引起的惊厥作用等方法对小鼠的行为进行评价。结果和对照组相比 ,JNQ低剂量组可增加小鼠自发运动 ,中、高剂量组可以延长小鼠在转杆上的运动时间 ;脑立清各剂量组可以延长戊巴比妥钠睡眠时间 ,增加戊巴比妥钠阈下催眠剂量时的睡眠百分数 ,并拮抗咖啡因的兴奋作用。结论JNQ对昆明种小鼠具有镇静、安眠作用 ,并能增强其在运动中的平衡协调能力     

谷红对抵抗大鼠脑缺血能力影响的研究

目的研究谷红对脑组织抵抗脑缺血能力的影响。方法2006年1月至5月取中国医学科学院北京协和医院制作的SD大鼠左侧大脑中动脉线拴模型,比较经谷红腹腔注射和无此干预的氯化-235三苯基四氮唑(TTC)染色所示的梗死体积差异。利用免疫组化的方法观察凋亡蛋白casepase3在不同动物组中梗死侧皮层区域的表达状况。结果谷红腹腔注射可以显著减少大鼠脑组织的梗死体积(P<0.05),casepase3在谷红组的表达与模型组相比明显下降。结论谷红可以增强大鼠抵抗急性脑缺血的能力,抗凋亡作用有可能是潜在的机制之一。     

基于体素的形态测量学在阿尔茨海默病和轻度认知障碍中的应用价值

目的：应用基于体素的形态测量学（VBM）方法比较阿尔茨海默病（AD）和轻度认知障碍（MCI）患者和健康老年人灰质体积的不同,探讨VBM方法在AD、MCI诊断中的应用价值。方法：本研究包括10例AD患者（AD组）、9例MCI患者（MCI组）、10例老年健康志愿者（健康对照组）,检查系列包括头常规轴面T2WI、T1WI、轴面FLAIR、矢状面T1WI,全脑3D-SPGR。应用VBM方法处理数据,把脑组织分割成灰质、白质和脑脊液,最后应用两样本t检验两两比较灰质体积改变。结果：AD组与正常对照组脑灰质体积比较：AD组大脑皮层灰质体积弥漫减少,激活区域几乎分布整个大脑半球,以两侧内侧颞叶（海马、梨状皮层、内嗅皮层）为著。右侧海马减少的体素总数为2358个,左侧海马减少的体素总数为2967个,前后扣带回体素明显减少;MCI组与正常对照组比较：MCI组灰质减少的区域依然较多,但与AD和对照组相比,激活区域明显减少。其中最明显的是内侧颞叶内嗅皮层、海马旁回区域,右侧体素减少总数为1368,左侧1135;MCI组和AD组的比较：MCI组较AD组灰质减少的区域更多,内侧颞叶和海马区域基本没有激活区域,较明显的激活区域位于双侧额顶颞叶、扣带回。双侧尾状核头部和左侧丘脑亦有较明显激活,而豆状核没有明显激活。结论：内侧颞叶和海马体积减小是评价AD和MCI最敏感的区域,VBM可以有效评价灰质体积的改变。     

应用基因芯片技术探讨乌灵菌粉的抗抑郁机制

目的采用基因芯片技术探讨乌灵菌粉的抗抑郁作用机制。方法以慢性轻度应激(CMS)致抑郁模型小鼠为观察对象,提取对照组、CMS组、乌灵菌粉组、氟西汀治疗组大脑皮层的总RNA,应用Clontech公司的小鼠1-2表达谱芯片进行各组间1176个基因的比较。结果基因芯片比较发现,CMS组小鼠与对照组相比皮层有130个基因发生改变,其中上调116个,下调14个;与CMS组比较,乌灵菌粉组有85个基因发生改变,其中上调34个,下调51个;氟西汀组133个基因发生改变,上调35个,下调98个。这些基因涉及受体活性、蛋白激酶、炎性因子、转铁蛋白、神经发生等各个方面。结论CMS致抑郁模型小鼠脑内多种功能基因的表达出现亢奋或低下,而通过乌灵菌粉和氟西汀干预后可使多个基因表达趋向正常水平。     

α-玉米赤霉醇改善Aβ诱导痴呆模型小鼠认知行为的实验研究

目的观察α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对阿尔茨海默病(AD)小鼠模型认知行为的改善作用及其机制。方法将40只成年雌 性小鼠随机分为对照组、模型组、苯甲酸雌二醇(EB)组和α-ZAL组,每组10 只。除对照组外,其他组于实验开始后第7 天于脑室 内注射β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)3 nmol 造成拟AD痴呆模型。对照组和模型组肌肉注射橄榄油0.05 ml/d,共14 d;EB组肌肉注射EB0.1 nmol/d,共14 d;α-ZAL组肌肉注射α-ZAL 0.1nmol/d,共14 d。Morris 水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力。分光光度法和同位素法测脑内氧化应激指标和一氧化氮(NO)系统改变。结果模型组Morris 水迷宫末次寻台潜伏期明显延长(P<0.01),EB 组和α-ZAL组较模型组缩短(P<0.05)。模型组脑内过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)下降(P<0.05),丙二醛(MDA)、原生型一氧化氮合酶(cNOS)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和NO上升(P<0.05);除α-ZAL组海马SOD和cNOS外(P>0.05),EB组和α-ZAL组各指标均优于模型组(P<0.01)。EB组和α-ZAL组之间无显著性差异(P>0.05)。结论α-ZAL和EB一样能通过提高脑内抗氧化和降低脂质过氧化能力,拮抗Aβ和NO的神经毒性,明显改善AD模型小鼠的认知行为。