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目的:制备抗人结肠癌单抗MC5的具功能活性的可溶性单链可变区片段(ScFv)。方法:从分泌MC5的杂交瘤细胞分离mRNA,RT-PCR分别扩增抗体质量、轻链可变区基因(VH和VLDNA),经linkerDNA连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,转化菌经辅助噬菌体M13KO7感染后,获得重组噬菌体。以高表达MC5结合抗原的人结肠癌细胞系SW480对重组噬菌体进行2轮筛选后,经ELISA筛选呈现抗体ScFv片段的噬菌体单克隆。取2个强阳性克隆的噬菌体感染大肠杆菌HB2151,用于表达可溶性ScFv。经点印迹和Western印迹对可溶性ScFv进行鉴定,经ELISA检测可溶性ScFv的抗原结合活性。结果:所获得的VH、VL和ScFvDNA分别约为340、320和750bp。对重组哓菌体经2轮亲和筛选后,经ELISA从25个克隆中筛检出10个抗原阳性克隆。源于2个强阳性克隆的可溶性ScFv的分子质量为32000u,且浓集于细菌周质腔中,可溶性ScFv具有抗原结合活性,其结合位点与亲本单抗MC5相同。结论:针对MC5的具功能活性的可溶性ScFv的成功制备,为人结肠癌的体外(乃至体内)研究提供了新的靶向载体分子。 相似文献
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目的筛选和鉴定B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的抑制性小肽。方法用重组人BLyS筛选噬菌体构象型7肽库、人工合成小肽鉴定其免疫抑制功能。结果经过筛选,得到两个阳性噬菌体克隆.人工合成的两个小肽在体外能特异性地抑制BLyS刺激细胞增生的活性。结论获得了两个能够抑制BLyS功能的小肽。 相似文献
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目的分析出生缺陷发生原因及干预措施。方法1991~2007年16年间本院出生缺陷儿163例,对产妇年龄、居住地区、文化程度、不良嗜好、不良孕产史5个方面进行统计并分析。结果163例中产妇年龄:20~30岁121例,30~40岁40例,40~50岁2例;农村33例,城市130例;文化程度:小学20例,初中83例,大学以上60例;产妇不良嗜好7例,占4%;不良孕产史31例,占19%。结论通过出生缺陷原因分析,强调加强优生优育宣教和孕期保健、出生缺陷的早期诊断和治疗是降低出生缺陷发生、提高生存质量的重要措施。 相似文献
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β-地中海贫血(β—thalassemia)是一种以β珠蛋白肽链合成缺陷为特征的遗传性溶血性贫血,是世界最常见遗传性单基因疾病之一,绝大多数均为β珠蛋白基因点突变和少数碱基缺失或插入引起。研究表明,反向斑点杂交技术是检测β-地中海贫血突变位点行之有效的方法。 相似文献
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目的探讨孕妇孕中期胎儿唐氏综合征(DS)为主的先天缺陷筛查的临床应用价值。方法应用时间分辨荧光免疫法测定1836例孕中期(15~20^+6周)孕妇血清中甲胎蛋白(AFP)和游离β绒毛膜促性腺激素(free β-hCG)的浓度,应用Multicalc软件计算唐氏综合征风险度,风险切割值为1/270,对高风险孕妇进行羊水细胞染色体核型分析及B超检查进行确诊。结果孕15~20^+6周孕妇血清AFP浓度随孕周的增加而增加,free8~hCG浓度随孕周的增加而减少。1836例孕妇中,共筛出高危孕妇118例,阳性率6.43%,其中唐氏征高危110例,有98例接受羊膜腔穿刺,占筛查DS高危孕妇的89.09%。发现胎儿染色体异常和其他异常共5例,假阳性率为6.15%。其中DS综合征1例,染色体平衡易位1例,经B超检查发现胎儿其他异常3例。结论孕中期产前筛查是预测异常胎儿和不良妊娠结局的重要指标。产前诊断是防止先天缺陷发生的重要手段之一。 相似文献
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LBP在宫颈癌早期筛查中应用价值的研究 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 探讨LBP液基细胞沉降式制片染色检测技术在宫颈癌筛查中的应用价值.方法 应用液基细胞沉降式制片染色检测技术对本院妇产科1170例育龄期妇女进行宫颈脱落细胞检测,诊断标准采用TBS分类系统,并通过阴道镜检查及多点宫颈活检术对宫颈脱落细胞检测结果进行验证.结果 1170例细胞学检查结果阳性94例,其中ASC-US 42例,LSIL45例,HSIL6例,SCC1例;经阴道镜检查及多点宫颈活检术后提示:ASC-US中8例CINI,LSIL中18例CINI~CINⅢ,HSIL中5例CINI~CINⅢ,SCC中1例原位癌以上.结论 LBP液基薄层细胞学能早期发现宫颈癌变,可作为宫颈癌筛查的方法之一. 相似文献
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“让我们的朋友遍天下”,如今已成为不少青年渴望达到的目标。多个朋友多条路,朋友多了路好走。朋友多似乎就意味着浪迹天涯不孤独,就意味着失意的时候会得到关心和支持,成功之时有人分享喜悦和快乐。信息时代,朋友多又几乎成了信息灵通的代名词。 于是翻开报刊杂志,打开广播电视,各种形式的交友热线、征友沙龙铺天盖地迎面而来,阵阵热风撩得青少年们心情激荡,心潮澎湃。征友,成了当今青年们的热门话题之一。 相似文献
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NF-κB参与小鼠β-防御素3基因急性时相表达的转录调节 总被引:2,自引:0,他引:2
目的分析急性时相反应时调节小鼠β-防御素3基因表达的转录因子.方法通过腹腔注射外源性脂多糖(LPS)建立小鼠急性时相反应,经Northern blot方法检测mBD3mRNA在组织中的表达;EMSA和Southwestern blot分析细胞核蛋白中的转录因子.结果内毒素注射后仅在肝脏组织中检测到mBD3mRNA;肝脏细胞核蛋白中有与mBD3基因调节区特异DNA片段结合的转录因子,分子量在(43.0~66.2)×103之间.结论小鼠急性时相反应时NF-κB参与β-防御素3基因在肝脏中表达的转录调节. 相似文献