长效重组人超氧化物歧化酶的研制及其辐射防护作用

选用无毒、无免疫原性的高分子化合物聚乙二醇(PEG)为修饰剂,以活性酯法制备出PEG- 重组人超氧化物歧化酶(PEG-rh SOD)共价结合物.修饰酶的生物半衰期为15h,比修饰前延长了90倍,对酸、碱、热的耐受力明显高于修饰前.用照射小鼠的活存率评价了PEG-rhSOD的辐射防护作用.小鼠受8.5Gy γ射线照射前1h腹腔注射30万U/kg PEG-rh SOD,可提高活存率42%,与未修饰的rhSOD相比,活存率提高14%.实验仍在进行中.     

人铜锌超氧化物歧化酶基因在大肠杆菌中的高水平表达

人铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn Superoxide dismutase,SOD)是人体内超氧自由基(O·)的天然清除剂,实验证明,它对防止脂质过氧化、治疗冠心病、再灌流损伤(器育移植等)、关节炎及自家免疫等疾病有明显的疗效,是一个很有前途的活性多肽药物,因此,受到国内外研究者的高度重视。开展SOD的基因工程研究进而生产大量廉价的SOD产品具有重要的实用价值。本工作用化学法全合成了人铜锌SOD的基因,并在大肠杆菌中获得表达。     

肺癌患者血液中超氧化物歧化酶活力的观察

辐射损伤的发生原因,主要是产生自由基及其它活性物质,并由此引起生物大分子结构功能的改变,常常使酶失活,核酸碱基被破坏。我们为了探讨肿瘤病人在治疗过程中,超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase、SOD)的变化规律,选择了14例正在进行放疗和化疗的肺癌患者,以观察其SOD水平与正常人的差异,从而用外源性SOD去减轻由于自由     

冠心病患者血液中超氧化物歧化酶活力的观察

在生理情况下,超氧化物自由基O_2~T浓度很低,是由于超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性维持在一定水平,冠心病主要特征是心肌缺血,缺血而引起缺氧和由此出现一系列病理状态,为了探讨在此种情况下SOD活力的变化,我们对正在住院的冠心病患者血液中SOD活力进行了初步观察。     

抗重组人Cu／Zn SOD单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

抗重组人Ｃｕ／Ｚｎ　ＳＯＤ单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立陈晓穗，赵丽，王晶翼，骆训一，谢邦铁，刘晓琳，李战青，陈宇萍（海军总医院分子生物学研究室，北京１０００３７）超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）是一种有前途的药用酶。美国ＦＤＡ已批准ＳＯＤ在炎症、再灌注性损伤...     

重组人铜锌超氧化物歧化酶脂质体的制备

应用反相蒸发法制备出重组人铜锌超氧化物歧化酶(rh Cu/Zn SOD)脂质体,其包封率为49.1%,在大鼠体内半衰期为3.45 h,体外模拟胃酸、胃蛋白酶、胰酶耐受力分别为90.3%、86.2%.79.8%;在小鼠体内脾、肝、肺脏中分布最高.     

抗人重组Cu－Zn超氧化物歧化酶单克隆抗体的制备及其在纯化抗原中的应用

本研究利用重组质粒ｐＣＺＳ转化大肠杆菌，制备出入重组Ｃｕ－Ｚｎ超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ），进一步建立了３株鼠抗ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。经鉴定，它们分泌的ＭｃＡｂ分别属于ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ亚类，能特异性地识别人ＣｕＺｎＳＯＤ，与ｐＣｚＳ空载菌蛋白无交叉反应。将此ＭｃＡｂ制备了免疫亲和层析柱，从大肠杆菌的粗提液中纯化出ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ，ＳＤＳ－ｐＡＧＥ显示单一条带，纯度＞９８％，回收率５０％，酶化活达１０９７１．３Ｕ／ｍｇ蛋白。ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ－ＭｃＡｂ的制备为ＣｕＺｎＪｉＤ产品的纯化和抗辐射等应用研究提供了有效的工具。     

进口810~(TM)全血血小板分析仪试剂的配制及其应用

贝克仪器公司810~(TM)全血血小板分析仪是有微处理功能的两个参数的半自动血小板分析仪。它可以计数全血或血浆中的血小板数目(PLT)及血小板的平均体积(MPV),并可打印出血小板的分布图。该仪器每小时可计数近60份样品,使用简单、方便,不需对样品做任何予处理,是目前较好的一种血小板计数仪,但对试剂要求较高,且需进行特殊处理。我们实验室自己配制了该仪器大量使用的包被液(Sheath Flud)及采样液,现将配制方法及其试验结果介绍如下。     

首次发现7种疾病患者及60—80岁健康老人血中存在无活性超氧化物歧化酶

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)为清除超氧化物自由基(O_2~-)的重要抗氧酶。关于病人血液中SOD活性变化已有报道,但至今还未见有人对其性质变化进行研究。本文比较观察了412例正常人与443例11种疾病患者血中的SOD总含量,首次发现7种疾病患者及60～80岁健康老人血中存在无活性SOD。     

人铜锌超氧化物歧化酶的基因工程研究 Ⅱ.人铜锌超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的表达

利用pUC 8为载体质粒,将合成的人Cu/Zn SOD基因置于Lac Z启动子的调控下,构建了含有该基因的表达质粒pCZS Ⅰ。首次成功地在大肠杆菌中表达了合成人Cu/Zn SOD的基因。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳薄层扫描分析证明,SOD基因的表达产物占细胞可溶性蛋白质的13％左右,用光扩增法捡测表达产物的酶活性,每毫克蛋白质为48.6 McCord Fridovich单位。