宁波地区2004～2008年麻疹野病毒分离株基因特征分析

目的了解宁波地区流行的麻疹野病毒基因型别和特性。方法对2004～2008年宁波地区分离到的麻疹野病毒,采用逆转录-聚合酶链反应扩增麻疹病毒核蛋白基因碳末端456个核苷酸并进行序列测定,与基因库中麻疹病毒各基因型参考株比较并分析毒株变异情况。结果2004～2008年共分离到麻疹病毒22株,均属H1基因型,与H1型参考株China93-7的核苷酸同源性为97.1%～98.5%,与中国疫苗株沪191的核苷酸/氨基酸差异为8.0%～9.5%/9.8%～14.5%;其中16株与H1a参考株China93-2的核苷酸同源性为98.2%～99.6%,属于H1a亚型;6株与H1b参考株China94-7的核苷酸同源性为98.5%～98.9%,属于H1b亚型。结论宁波地区2004～2008年流行的麻疹病毒均为H1基因型,且以H1a亚型为主,亦存在H1b亚型。     

食品从业人员中检出年度首株Eltor霍乱弧菌

自六十年代Ｅｌｔｏｒ霍乱弧菌（ＥＶＣ）传入我国以来，在长期反复流行中，我市已成为ＥＶＣ的常发地区。为控制该病的流行与发生，近年来我们加强了对食品、环境卫生等行业人员的ＥＶＣ进行监测，为及时发现 ＥＶＣ提供依据。结果于１９９８年 ５月从本市某宾馆的餐饮服务人员中检出年度首株小川型ＥＶＣ，根据流行病学调查为健康携带者。从健康的食品从业人员中检出该菌在本市尚属少见，因此我们对其进行了详细的鉴定，现将结果报告如下。１材料与方法１．１样品来源 本市某宾馆的餐饮服务人员，进行一年一次健康体检的粪便标本。１．２…     

宁波市2004-2013年麻疹野病毒分离株的RT-PCR检测与分析

目的 分析宁波2004-2013年麻疹野病毒的分子生物学特征。方法 采用RT-PCR 对宁波2004-2013年分离的麻疹野毒株核蛋白基因碳末端450个核苷酸进行扩增,序列测定后与基因库中麻疹病毒各基因型参考株作比对分析。结果 宁波2004-2013年分离的31株麻疹病毒均为H基因型,其中6株(包括2004年1株及2005年5株)为H1b亚型,其它均为H1a亚型。基因同源性比对结果显示,31株麻疹病毒与H1a亚型参考株China93-4的同源性为97.1%～100%,与H1b亚型参考株China94-7的同源性为96.7%～100%,与中国疫苗株S191的核苷酸同源性为81.9％～92.4％,氨基酸同源性为87.2％～90.6％。结论 宁波2004-2013年麻疹病例主要由本土病毒株(H1亚型)传播引起,H1a基因亚型为绝对优势基因亚型,H1b亚型处于相对弱势,H1a亚型5个小分支病毒株引起的多个传播链造成麻疹野病毒在宁波广泛流行。     

2009年宁波市甲3亚型流感流行特征 与HA1基因特性的分析

目的 了解2009年宁波市甲3亚型流感病毒的流行特征及血凝素基因HA1区域的变异情况。 方法 全年度每周从流感监测哨点医院收集流感样病例标本进行病毒分离,获得的甲3亚型流感毒株按不同时间、地点进行血凝素基因HA1区核苷酸序列测定并推导出其氨基酸序列,然后进行基因特性分析。 结果 所选取的15株甲3亚型流感病毒HA1区域核苷酸序列长度均为987 bp,编码329个氨基酸;2009年上半年的流行株与2008年秋季的流行株在该区域有7个氨基酸位点存在差异,2009年下半年的流行株与2009上半年又存在10个氨基酸位点的差异。上半年与下半年的流行株在种系发生树上形成两个分支,为不同性状的流行株。 结论 2009年上半年及下半年宁波市甲3亚型流感流行株与2008年相比,在血凝素基因HA1区域都发生了较为明显的改变,且上半年与下半年的2个流行株之间血凝素基因的差异也较大。说明2009年宁波市流行的甲3亚型流感病毒变异较为频繁。     

酶联免疫吸附试验与中和抗体试验检测麻疹抗体比较研究

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)和中和抗体试验(NT)在麻疹抗体检测中的应用价值。方法以NT为"金标准",同时用德国Virion/Serion的定量ELISA试剂盒检测364份麻疹抗体滴度,将两种方法测定的结果进行比较。结果 NT的阳性率为57.69%,几何平均滴度(GMT)为1∶5.48,ELISA的阳性率为42.86%,平均抗体活性值为48.57IU/L。定性结果发现,ELISA特异度为99.35%,其敏感度即阳性符合率为73.81%,且阳性符合率随着滴度增加呈现增高的趋势(z=-5.99,P<0.001)。Fisher精确概率法发现,滴度1∶2组、滴度1∶4组与其他各组阳性符合率差异均有统计学意义(P<0.05),滴度1∶8组与滴度≥1∶64组阳性符合率差异有统计学意义(P<0.05),其余各组间阳性符合率差异均无统计学意义(P>0.05)。定量结果发现,ELISA抗体活性值与NT滴度呈明显正相关,相关系数r=0.884,P<0.001。结论德国Virion/Serion的定量ELISA试剂盒在检测低滴度麻疹抗体时易出现假阴性,检测高滴度麻疹抗体时,两种方法敏感性接近;滴度临界值为1∶8～1∶16。该试剂可推荐用于健康人群麻疹抗体水平监测。     

2004年宁波大学流感爆发病毒株的血凝素基因分析

目的了解宁波地区流行性感冒(流感)病毒株的变异情况。方法采集2004年5月宁波大学流感爆发期间病人的含漱液进行病毒分离、鉴定，并对其中1株病毒的血凝素重链区进行了核苷酸和氨基酸序列分析。结果在9份样品中共分离到流感病毒3株，经血清学试验鉴定为甲3型。与2002年宁波市流感病毒流行株的核苷酸同源性为98．2％-98．3％，氨基酸同源性为96．7％-97．3％；与2003年流行株的核苷酸同源性为98．7％，氨基酸同源性为97．6％；与参考株A／Sydney／05／1997的核苷酸同源性为95．9％，氨基酸同源性为92．7％；与参考株A／Wuhan／359／1995的核苷酸同源性为94．6％，氨基酸同源性为91．2％。结论2004年宁波大学流感爆发的病毒为甲3型。其HA1区序列更接近2003年流行毒株，与A／Sydney／05／1997毒株的同源性要高于A／Wuhan／359／1995。该爆发流行的毒株可能是在宁波以前流行毒株的基础上进化而来的。     

宁波地区所售小海产品甲型肝炎病毒污染调查

目的调查宁波地区所售小海产品甲型肝炎病毒污染情况,以阻断甲型肝炎传播。方法于2005年1月18日到2月28日,从宁波市所辖的11个县市区的市场共采集样品148份,利用逆转录聚合酶链反应来检测甲型肝炎病毒的核酸。结果在148份样品中检测到1份样品被甲型肝炎病毒污染,检出率为0.68%。结论宁波地区所售小海产品甲型肝炎病毒污染情况并不严重,但是仍然要加强对其监测。污染样品为牡蛎,这是国内首次报道从牡蛎中检测到甲型肝炎病毒的核酸。     

快速诊断方法在流感暴发疫情调查中的应用

在流感的暴发疫情中能快速地进行病原检测，对患者及时正确的治疗及流感疫情的早期发现具有重要意义，可为及时控制及快速扑灭疫情赢得宝贵的时间。2003～2004年初，本市部分学校相继出现了几起流感样疫情的暴发，为快速查清疫情，尽快采取合适措施，我们尝试一种快速诊断方法并在几起流行性感冒暴发疫情调查中应用，同时用细胞培养法进行流感病毒分离，进一步对疫情进行确诊及亚型的鉴定，并比较两者的敏感性。结果报告如下。     

2005年宁波地区婴幼儿病毒性腹泻病原初探

目的：了解宁波地区婴幼儿病毒性腹泻的病原组成及其流行情况。方法：2005年9月到10月从宁波市妇女儿童医院采集婴幼儿病毒性腹泻大便样品共64份，采用金标法和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测轮状病毒；采用乳胶凝集法检测腺病毒；采用RT—PCR方法检测肠道病毒。结果：在64份样品中用金标法和PAGE法分别检测到轮状病毒阳性样品14份，阳性率为21．87％，两者检测结果完全一致，PAGE法结果显示均为A组轮状病毒；未检测到腺病毒；检测到肠道病毒阳性样品4份，阳性率为6．25％。结论：宁波市目前病毒性腹泻病原以轮状病毒为主，其次为肠道病毒，未检测到腺病毒；婴幼儿感染轮状病毒以A组为主，未见B组与C组感染，并且以轮状病毒长型占绝对优势；未发现轮状病毒混合感染；没有轮状病毒与肠道病毒混合感染情况。     

摇床吸附法微量细胞板短期培养快速检测流感病毒

目的：为在流感样疫情的调查中能够快速准确地查清流感病原，提高公共卫生突发性应急事件的快速反应能力。方法：摇床吸附微量细胞板短期培养法的荧光抗体染色用于快速检测流感病毒并与常规的病毒分离方法作比较。结果：对83份流感疑似病人含漱液的快速检测结果与常规的细胞培养法病毒分离结果相比较，在病毒分离阳性的45份标本中，快速检测法也有34份阳性，阳性符合率为75％，敏感性测定达到了能够检测出0．01个血凝单位浓度的流感病毒。结论：微量细胞板荧光染色法检测流感病毒的敏感性要优于一般市售的快速诊断试剂盒。检测时间约在24h内，达到了快速准确的目的。