黄花蒿Dof基因家族鉴定及在GA-UV处理下对青蒿素生物合成的影响＊

目的 Dof（DNA binding with one finger）家族是高等植物中特有的一类转录因子家族，参与植物中光、激素、非生物胁迫等多种胁迫响应调控。本研究基于全基因组数据对黄花蒿Dof（AaDof）转录因子家族进行鉴定及表达模式分析，探究Dof家族基因在青蒿素合成调控中的作用。方法 经PFAM数据库鉴定获得AaDof序列，通过生物信息学软件分析其理化性质、亚细胞定位、基因结构、蛋白保守结构以及启动子序列结合元件等，并基于赤霉素（Gibberellic acid， GA）、紫外线B（UV-B）及二者协同胁迫下黄花蒿转录组数据对其表达模式进行分析。结果 本研究从全基因组水平共鉴定出51个AaDof基因，均含有保守的C₂-C₂单锌指结构，依据系统发育分析分为8个亚族，同一亚族内基因结构与蛋白保守结构域相对保守。亚细胞定位预测显示12个AaDof蛋白定位在细胞外，其余均定位在细胞核。启动子元件分析发现AaDof家族基因启动子区富含光、激素等多种响应元件。对AaDof在GA、UV-B和GA+UV-B处理下的表达模式分析发现，AaDof基因对GA胁迫处理响应较弱，仅有少量基因敏感，其表达主要受到UV-B胁迫影响。C1及C2.1亚族大部分基因在UV-B胁迫下上调表达，而A亚族大部分基因在UV-B胁迫下下调表达。qRT-PCR验证表明AaDof1、AaDof17和AaDof44在GA和UV-B处理下表达量显著上调，推测其可能通过参与GA和UV-B调控网络，正向调控青蒿素生物合成。结论 本研究系统鉴定了黄花蒿AaDof家族基因并筛选了3个可能正向调控青蒿素生物合成的候选AaDof基因，为黄花蒿Dof家族基因功能研究及其在青蒿素生物合成中的调控机制解析奠定基础。     

基于苗药五藤膏外敷对CIA大鼠炎性骨破坏的影响探讨苗医外治就近驱邪的作用＊

目的 通过研究明确苗药五藤膏外敷缓解胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠关节局部炎症和骨破坏的机制，证实苗医外治就近驱邪的作用。方法 将70只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、苗药五藤膏高、中、低剂量组、扶他林组及IL-17阻断组，每组10只。除空白组外，其余6组均构建CIA模型，并给予相应的外敷治疗。观察大鼠一般情况，HE染色进行病理学分析，TRAP染色检测OC生成，ELISA检测各炎症因子的含量，RT-PCR和WB分别检测RANKL的基因及蛋白表达。结果 苗药五藤膏能改善CIA大鼠破骨细胞浸润及关节病理性结构，并降低RANKL蛋白、基因表达以及TNF-α、IL-1、IL-6、IL-17含量。结论 苗药五藤膏外敷剂对CIA大鼠的治疗机制可能与降低致炎因子的分泌，抑制RANKL及OC的表达相关。     

倪宣化运用石膏经验

倪宣化行医60余年,临床经验丰富,使用石膏得心应手。本文从药性、使用原则、产后用药、疑难杂症的治疗总结倪宣化对石膏的独特见解,结合案例加以说明,以期为石膏的临床运用提供参考。     

诸方受诊治原发性骨质疏松症腰背痛经验

骨质疏松症分为原发性与继发性,且以原发性较多见,而腰背痛是原发性骨质疏松症最常见症状。诸方受教授对原发性骨质疏松症之腰背痛的诊治,重视明辨标本,察清虚实,灵活用药,以温补肾阳、宣痹通络为法,补虚泻实,二者兼顾,用自创之温肾宣痹汤加减,取得显著疗效。     

个性化护理干预对脑卒中合并高血压患者生活质量影响分析

目的分析个性化护理干预对脑卒中合并高血压患者生活质量的影响。方法纳入研究对象来自本院自2009年2月至2011年2月收治的脑卒中合并高血压患者90例,将"随机数字表法"作为分组原则,分对照组(予以常规护理干预,45例)、研究组(予以个性化护理干预,45例),比较血压变化情况、SDS评分、SAS评分、并发症、生活质量评分。结果研究组护理后舒张压、收缩压、SDS评分、SAS评分、并发症发生率显著比对照组低,研究组护理后生活质量评分显著比对照组高,P0.05。结论个性化护理可有效降低脑卒中合并高血压患者血压,减轻抑郁、焦虑等消极情绪,改善生活质量,值得借鉴。     

旋覆代赭合六君子汤及其含药血清有效成分研究

目的基于液质联用技术(LC-MS)建立同时测定中药复方旋覆代赭汤合六君子汤中白术内酯Ⅲ、槲皮素、茯苓酸三种活性成分的方法,并探究其大鼠含药血清中三种成分含量。方法 Agilent-C_(18)柱(2.1mm×150mm,5μm)色谱柱分离,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)(5∶95),进行梯度洗脱,流速为0.3 ml/min,柱温为35℃。结果复方试剂供试液中各有效成分的平均浓度:白术内酯Ⅲ4109.12mg·L~(-1);槲皮素50.70mg·L~(-1);茯苓酸0.666mg·L~(-1);含药血清中白术内酯Ⅲ的平均浓度为55.75mg·L~(-1)。结论该方法可以用以同时检测旋覆代赭汤合六君子汤中药复方及其大鼠含药血清中上述三种有效物质的含量。     

大梯度强磁场抗磁物质悬浮的生物学效应及其应用

梯度强磁场是一种特殊的人工稳恒强磁场,抗磁性物质在这种磁场中的特殊位置上可模拟失重效应,即抗磁悬浮。与目前建立的多种模拟失重环境或失重生物学效应的装置与技术相比,抗磁悬浮技术在力学本质上更接近于空间失重环境,且模拟失重的作用时间持久,具有良好的稳定性,更适用于长时间失重环境要求的生物学实验。目前大梯度强磁场下的抗磁悬浮技术在生物学研究中的应用还处于现象揭示及基础研究阶段,有许多科学问题和应用方向值得探索。综述了大梯度强磁场下抗磁物质悬浮对动物、植物、微生物、细胞和生物大分子等影响的研究进展,并对其应用前景进行了展望。     

去泛素化酶3在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞生物学特性的影响

目的探讨去泛素化酶3在人不同前列腺癌细胞株中与前列腺癌组织中的表达,以及去泛素化酶3对前列腺癌细胞增殖、迁移和上皮间质化的影响。方法采用Western Blot法和实时荧光定量PCR法,分别检测去泛素化酶3在前列腺癌细胞株和正常前列腺上皮细胞株中的蛋白和mRNA水平。以前列腺癌细胞株PC-3为研究对象,通过瞬时转染siRNA抑制去泛素化酶3的表达,然后采用MTS法和Transwell法分别检测PC-3细胞增殖和迁移能力的变化,最后通过Western Blot法明确去泛素化酶3在前列腺癌细胞中对上皮间质化关键因子Snail1的调控作用。结果 Western Blot法和实时荧光定量PCR均显示去泛素化酶3在前列腺癌细胞中的蛋白和mRNA水平高于正常前列腺细胞株(P0.05);通过siRNA抑制去泛素化酶3的表达后,PC-3细胞的增殖能力和迁移能力均明显减弱(P0.05),而且Snail1的表达也同时下降。结论去泛素化酶3在前列腺癌中高表达,具有促进前列腺癌细胞增殖和迁移的作用,并且通过对Snail1去泛素化,可能具有增强前列腺癌细胞上皮间质化的能力,有望成为前列腺癌治疗的新靶点。     

基于“脾肾相关”论治疗骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症常见于中老年人群，是由多种原因导致骨组织显微结构受损、易发脆性骨折的一种全身性骨代谢障碍疾病。中医学认为肾虚是骨质疏松症发病的重要病机，因此以补肾壮骨为主要治法已达成普遍共识。笔者通过大量文献搜索发现，脾虚在骨质疏松症的致病过程中亦起着关键作用。肾、脾两脏为先后天之本，是维持人体正常生理活动的根本所在。因此本文着眼于“脾肾相关”理论，从中医基础理论、实验研究及临床观察等角度综述其防治疗骨质疏松症的科学内涵，并试探讨中医“脾肾相关”理论防治骨质疏松症的作用机制，找寻中医基础理论在防治骨质疏松症中的理论渊源，优化中医药防治骨质疏松症的诊疗方案，为更好得将祖国医学运用于临床提供新的思路与方法。     

不同药用辅料流化床制粒的物性质量分析研究

目的研究5种药用辅料制粒后颗粒的物性指标,分析探讨颗粒物性指标的相关性及颗粒物性质量。方法采用Pearson相关性分析法分析颗粒的7项评价指标相关性,采用主成分分析法对颗粒物性指标进行主成分分析和综合评价。结果粒径分布宽度与松密度及振实密度呈极显著正相关,松密度与振实密度呈极显著正相关,振实密度与压缩度呈显著正相关。对第一主成分产生正向影响较大的物性指标是粒径分布宽度和振实密度。乳糖+水制成的颗粒及甘露醇+水制成的颗粒综合评价得分较高,可溶性淀粉+HPMC制成的颗粒综合评价得分最低。结论不同药用辅料制成的颗粒物性质量存在差异,乳糖和甘露醇分别以水为粘合剂制成的颗粒物性质量较好,可溶性淀粉以HPMC为粘合剂制成的颗粒物性质量较差。