基于巨噬细胞极化观察白术内酯Ⅱ对胃癌细胞的作用

目的:研究白术内酯Ⅱ对巨噬细胞极化的影响并探讨其发挥抗肿瘤的作用机制。方法:用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度白术内酯Ⅱ作用不同时间,对巨噬细胞生长的影响,筛选出白术内酯Ⅱ的安全给药浓度。不同浓度白术内酯Ⅱ作用24 h,巨噬细胞与胃癌细胞共培养,光镜下观察2种细胞的存活状态,MTT比色法检测胃癌细胞的增殖变化,筛选出白术内酯Ⅱ的有效给药浓度。将细胞分为空白组、模型组、白术内酯Ⅱ(200,100,50 mg·L~(-1))组。划痕实验观察不同浓度白术内酯Ⅱ作用后巨噬细胞对胃癌细胞迁移及形态的影响。流式细胞术(FCM)检测M1,M2型巨噬细胞表面标志CD86,CD206表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测M1,M2型巨噬细胞相关肿瘤坏死因子(TNF)-α,人类白细胞抗原2(HLA-DRA),CD80,转化生长因子-β(TGF-β),白细胞介素(IL)-10和IL-6 mRNA和蛋白表达;Western blot检测巨噬细胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)和磷酸化(p)-PI3K蛋白表达。结果:当白术内酯Ⅱ质量浓度为1,10,50,100,200 mg·L~(-1)时,对巨噬细胞生长无抑制作用;与模型组比较,50,100,200 mg·L~(-1)白术内酯Ⅱ作用的巨噬细胞可显著抑制胃癌细胞增殖(P0.01);与模型组比较,白术内酯Ⅱ(200,100 mg·L~(-1))组胃癌细胞迁移率降低(P0.05);白术内酯Ⅱ(200,100,50 mg·L~(-1))组M1型巨噬细胞表面标志CD86表达增高(P0.05,P0.01),白术内酯Ⅱ(200 mg·L~(-1))组M2型巨噬细胞表面标志CD206表达下降(P0.05);白术内酯Ⅱ(200,100 mg·L~(-1))组M1型巨噬细胞相关细胞因子TNF-α,HLA-DRA,CD80 mRNA表达增高(P0.05,P0.01),白术内酯Ⅱ(200 mg·L~(-1))组TNF-α蛋白表达增高(P0.05);白术内酯Ⅱ(50 mg·L~(-1))组M2型巨噬细胞相关细胞因子TGF-βmRNA表达显著降低(P0.01),白术内酯Ⅱ(200 mg·L~(-1))组IL~(-1)0,IL-6蛋白表达降低(P0.05,P0.01);白术内酯Ⅱ(200,100 mg·L~(-1))组p-PI3K蛋白表达降低(P0.05,P0.01)。结论:白术内酯Ⅱ通过减少巨噬细胞内p-PI3K的表达,诱导巨噬细胞向M1型极化,进而抑制胃癌增殖和迁移。     

HPLC-DAD法同时测定消积化虫散中6种成分

目的建立高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)法同时测定消积化虫散(白术、茯苓、使君子仁等)中白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸的含有量。方法分析采用依利特C18色谱柱;流动相为乙腈-甲醇(1∶1)(A)-0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脱;体积流量1.1 m L/min;柱温25℃;检测波长210 nm(去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸)、220 nm(白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ)、276 nm(白术内酯Ⅱ)。结果 6个成分均呈良好的线性关系,平均加样回收率(n=6)为96.8%~99.4%,RSD值为0.66%~1.48%。结论该方法简便、准确、快速,可用于消积化虫散的质量控制。     

HPLC法同时测定补益资生丸中白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、去氢土莫酸、猪苓酸C和茯苓酸

目的建立高效液相同时测定补益资生丸中白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、去氢土莫酸、猪苓酸C和茯苓酸成分的分析方法。方法补益资生丸甲醇提取,分析采用Hypersil C18色谱柱;以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;体积流量1.2 m L/min;白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ的检测波长为220 nm,去氢土莫酸、猪苓酸C检测波长为241 nm,茯苓酸为210 nm。结果白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、去氢土莫酸、猪苓酸C和茯苓酸质量浓度分别在4.12~82.40μg/m L(r=0.999 8)、6.55~131.00μg/m L(r=0.999 4)、4.30~86.00μg/m L(r=0.999 9)、5.35~107.00μg/m L(r=0.999 2)、4.40~88.00μg/m L(r=0.999 7)时与其峰面积线性关系良好;平均加样回收率(n=6)分别为99.0%、97.6%、99.1%、97.0%、97.9%,RSD分别为1.2%、1.6%、1.2%、0.91%、1.5%。结论暂定本品标准为每丸中含白术内酯Ⅲ不得低于0.26 mg,白术内酯Ⅰ不得低于0.15 mg,去氢土莫酸不得低于0.40 mg,猪苓酸C不得低于0.14 mg,茯苓酸不得低于0.20 mg。     

白术内酯Ⅱ促进大肠癌Lovo细胞凋亡及对PARP1和Caspase-3表达的影响

目的:探讨白术内酯Ⅱ对人大肠癌Lovo细胞的抑制作用及其机制。方法:体外培养人大肠癌Lovo细胞,采用不同浓度的白术内酯Ⅱ分别作用于细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测其对细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测白术内酯Ⅱ对Lovo细胞凋亡的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测白术内酯Ⅱ对大肠癌细胞聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1(poly ADPribose polymerase1,PARP1),含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)蛋白表达水平的影响。结果:与空白组比较,白术内酯Ⅱ质量浓度达到150 mg·L~(-1)时可明显抑制Lovo细胞增殖(P0.05),随着白术内酯Ⅱ浓度的增高,细胞存活率逐渐下降,当质量浓度超过300 mg·L~(-1)时,细胞存活率降到半数以下;白术内酯Ⅱ(300 mg·L~(-1))可明显促进Lovo细胞的凋亡(P0.01);白术内酯Ⅱ100 mg·L~(-1)可使PARP1和Caspase-3开始发生剪切,随着药物质量浓度的增加,其剪切作用明显增强。白术内酯Ⅱ可抑制大肠癌Lovo细胞的生长和増殖,并能调节PARP1,Caspase-3蛋白表达,促进细胞凋亡。结论:白术内酯Ⅱ能显著抑制Lovo细胞的增殖并诱导其发生凋亡,其分子机制与促进PARP1的剪切,激活Caspase-3的表达相关。     

HPLC-PDA同时测定白术-白芍单味药、药对、复方中5种有效成分的含量

目的建立白术、白芍、白术-白芍、痛泻要方中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,芍药苷、芍药内酯苷的HPLC-PDA色谱分析方法,同时测定5种成分在单味药、药对、复方中的含量,为探究配伍对化学成分的影响提供科学依据。方法采用Thermo Fisher C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱;运行时间:32 min;柱温:30℃;流速:1 ml·min-1;检测波长:白术内酯Ⅰ及白术内酯Ⅲ为222 nm,白术内酯Ⅱ为278 nm,芍药苷、芍药内酯苷为232 nm;进样量:10μl。结果对检测结果进行线性考察,以峰面积(Y)与浓度(X)进行线性回归,白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,芍药苷、芍药内酯苷的线性范围分别为0.008 0~0.320 0μg(r_1=0.999 9)、0.004 1~0.160 0μg(r_2=0.999 8)、0.210 0~0.840 0μg(r_3=0.999 7)、1.750 0~70.000 0μg(r_4=0.999 8)、1.000 0~40.000 0μg(r5=0.999 6);加样回收试验、精密度试验、重复性试验良好,稳定性试验证明在24 h内稳定,结果准确可靠。在单味药、药对与复方中,5种有效成分含量的高低顺序依次是芍药苷芍药内酯苷白术内酯Ⅲ白术内酯Ⅰ白术内酯Ⅱ。比较白术与白芍配伍前后的含量发现,白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量较配伍前均有所升高,而芍药苷和芍药内酯苷的含量较配伍之前的含量均降低;比较药对与复方中5种成分的含量发现,白术内酯Ⅰ的含量药对较复方明显升高,白术内酯Ⅱ、Ⅲ,芍药苷、芍药内酯苷的含量明显降低。结论该法可同时对单味药、药对以及复方的质量控制进行评价;通过比较单味药、药对、复方中有效成分含量的变化,表明配伍可以对药物的有效成分产生影响。     

香砂代赭汤治疗脾虚气滞型功能性消化不良30例

目的:观察香砂六君子汤、旋覆代赭汤治疗脾虚气滞型功能性消化不良的临床疗效。方法:2017年11月—2018年8月共收集我院脾虚气滞型功能性消化不良患者120例,随机分为对照组、香砂六君子汤组、旋覆代赭汤组和香砂代赭汤组。四组均予以西医基础治疗,在此基础上,香砂六君子汤组口服香砂六君子汤,旋覆代赭汤组口服旋覆代赭汤,香砂代赭汤组口服香砂六君子汤和旋覆代赭汤,日1剂,共治疗20天后,观察四组临床疗效、症状积分、中医主要症状总积分、治疗后症状改善时间及3月内复发率。结果:香砂代赭汤组总有效率为93.3%,香砂六君子汤组为86.6%,旋覆代赭汤组为83.3%,对照组为76.6%,香砂代赭汤组优于其他三组(P0.05)。治疗前,四组患者症状积分、中医主要症状总积分差异无统计学意义(P0.05);治疗后,四组症状积分、中医主要症状总积分均明显降低(P0.05),且香砂代赭汤组明显低于其他三组(P0.05)。香砂代赭汤组症状改善时间明显短于其他三组(P0.05),3月内复发率也明显低于其他三组(P0.05)。结论:香砂代赭汤可以明显提高脾虚气滞型功能性消化不良患者临床疗效,较快改善症状,且复发率低,疗效优于单纯使用西药、香砂六君子汤及旋覆代赭汤。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的浓度及苍术-香附提取物在大鼠体内的药动学研究

目的 建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测大鼠血浆中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ浓度,研究苍术-香附提取物灌胃后大鼠体内3种活性成分的药动学特征。方法 以苯海拉明为内标,血浆样品采用乙酸乙酯液-液萃取法处理,采用ACQUITY UPLC BEH-C₁₈色谱柱(2.1 mm×50 mm, 1.7μm),流动相为乙腈-体积分数0.05%甲酸水,通过电喷雾离子源进行正离子扫描,多反应监测技术(multiple reaction monitoring, MRM)检测模式。检测离子：m/z 231.2→185.1(白术内酯Ⅰ)、m/z 233.2→187.1(白术内酯Ⅱ)、m/z 249.2→231.1(白术内酯Ⅲ)、m/z 256.2→167.1(苯海拉明)。利用DAS 3.2.2软件计算药动学参数。结果 白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ的线性范围分别为0.315 0～20.00、0.315 0～20.00、3.150～200.0 ng·mL^-1,方法学的各项指标均符合要求。苍术-香附提取物灌胃给药后的3种活性成分的药-时曲线呈双...     

旋覆代赭汤含药血清对胃窦平滑肌细胞IP_3受体及钙离子浓度影响的实验研究

目的:观察旋覆代赭汤含药血清对大鼠胃窦平滑肌细胞(SMC)IP3受体(IP3R)及钙离子(Ca2+)浓度的影响。方法:分离大鼠胃窦SMC,加入IP3受体拮抗剂肝素后,镜下观察含药血清对胃窦SMC收缩作用;检测细胞Ca2+总浓度。结果:IP3受体拮抗剂肝素可抑制旋覆代赭汤含药血清对胃窦SMC的收缩作用;各剂量组与无钙缓冲液组的细胞内钙离子总浓度相比较无明显差异。结论:旋覆代赭汤含药血清可使胃窦SMC收缩,其机制可能是通过IP3通路作用于细胞,引起细胞内质网释放Ca2+使胃窦SMCCa2+升高。     

HPLC法同时测定宝儿康散中9种成分

目的建立HPLC法同时测定宝儿康散(太子参、白术、茯苓等)中太子参环肽B、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、去氢土莫酸、土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、β-细辛醚、α-细辛醚的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.05%磷酸,梯度洗脱;检测波长203、210、220、257 nm;体积流量0.9 mL/min;柱温35℃。结果 9种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 1),平均加样回收率96.94%～100.05%,RSD 0.59%～1.34%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于宝儿康散的质量控制。     

中医治疗脾虚气滞型功能性消化不良的临床观察

目的:观察香砂六君子汤、旋覆代赭汤治疗脾虚气滞型功能性消化不良的临床疗效。方法:2017年11月—2018年8月间,共收集本院收诊的脾虚气滞型功能性消化不良患者120例,随机分为对照组、香砂六君子汤组、旋覆代赭汤组和香砂代赭汤组。四组均予以西医基础治疗,在此基础上,香砂六君子汤组口服香砂六君子汤,旋覆代赭汤组口服旋覆代赭汤,香砂代赭汤组口服香砂六君子汤和旋覆代赭汤,每日1剂,治疗20d后,观察四组临床疗效、症状积分、中医主要症状总积分、治疗后症状改善时间及3月内复发率。结果:香砂代赭汤组总有效率为93.3%,香砂六君子汤组为86.6%,旋覆代赭汤组为83.3%,对照组为76.6%,香砂代赭汤组优于其他三组(P0.05)。治疗前,四组患者症状积分、中医主要症状总积分差异无统计学意义(P0.05),治疗后,四组症状积分、中医主要症状总积分均明显降低(P0.05),且香砂代赭汤组明显低于其他三组(P0.05)。香砂代赭汤组症状改善时间明显短于其他三组(P0.05),3月内复发率也明显低于其他三组(P0.05)。结论:香砂六君子汤和旋覆代赭汤合用可以明显提高脾虚气滞型功能性消化不良患者临床疗效,较快改善症状,且复发率低,疗效优于单纯使用西药、香砂六君子汤及旋覆代赭汤。     

糖痹康对高糖培养雪旺细胞自噬相关蛋白的影响

目的:研究发现细胞自噬是糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的重要发病机制之一,本研究探讨治疗DPN的中药复方糖痹康(Tangbikang,TBK)对高糖环境下大鼠雪旺细胞(rat Schwann cells,RSC)自噬相关蛋白的影响。方法:利用SD大鼠制备TBK含药血清,并采用50 mmol·L~(-1)的葡糖糖(Glu)RSC细胞培养基制备高糖RSC细胞模型。实验总共分为6组:正常组(Con,20%正常大鼠血清),高糖组(Glu,50 mmol·L~(-1)Glu+20%正常大鼠血清);弥可保组(MKB,50 mmol·L~(-1)Glu+20%弥可保含药血清);TBK高剂量组(TBKH,50 mmol·L~(-1)Glu+20%TBK含药血清);TBK中剂量组(TBKM,50 mmol·L~(-1)Glu+10%TBK含药血清+10%正常大鼠血清);TBK低剂量组(TBKL,50 mmol·L~(-1)Glu+2.5%TBK含药血清+17.5%正常大鼠血清)。干预48 h后,采用细胞增殖实验细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测RSC细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬蛋白(Beclin 1)和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)的表达水平。结果:与Con组比较,高糖因素使得Glu组RSC增殖活性显著降低(P0.01),细胞凋亡率显著增加(P0.01),且自噬相关标志蛋白Beclin 1和LC3Ⅱ显著下降(P0.01);与Glu组比较,MKB组与TBKH组RSC细胞增殖显著减弱(P0.01),MKB组,TBKH和TBKM组RSC细胞凋亡率显著减小(P0.01),MKB组和TBKH组RSC细胞自噬标志蛋白Beclin 1和LC3Ⅱ的表达水平显著升高(P0.01)。结论:TBK能够促进高糖环境下RSC细胞自噬,减少凋亡,具有一定的神经保护作用,该研究为DPN新药研发奠定基础。     

HPLC法测定苓桂术甘汤中五种成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定苓桂术甘汤中肉桂酸、桂皮醛、甘草酸、白术内酯Ⅲ、茯苓酸的量。方法:采用XBridge TM(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,体积流量为0.8 m L/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃。结果:肉桂酸、桂皮醛、甘草酸、白术内酯Ⅲ、茯苓酸5种成分在100 min内被完全分离;峰面积与其浓度成良好的线性关系;加样回收率(n=6)为99.39%~100.06%(RSD=0.22%~2.19%)。结论:采用高效液相色谱法同时测定复方中的5种成分,此方法简单可靠,精密度好,可较好地用于苓桂术甘汤的质量控制。     

HPLC同时测定黄芪白术药对提取物毛蕊异黄酮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ含量

目的:建立黄芪白术药对提取物中毛蕊异黄酮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ 3种成分HPLC同步测定新方法.方法:选用Kromasil 100-5C18(4.6 mm×250 mm)色谱柱;以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1 mL·min-1;检测波长220 nm.结果:毛蕊异黄酮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ分别在进样量范围内与峰面积线性关系良好,r ＞0.9995,仪器精密度和稳定性RSD均小于2％,3种成分的回收率在97％～103％(n=3).测定了6批白术黄芪药对中的毛蕊异黄酮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ含量.结论:该方法快速、准确、重复性好,可同时定量白术黄芪药对的3种成分.     

旋覆代赭汤对RE模型大鼠NLRP3/Caspase-1的影响

目的:通过观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠炎症小体组成成分及相关炎症因子表达的影响,探究NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1信号通路与食管炎症的相关性,阐明旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。方法:将60只健康雄性Wistar大鼠,随机分为4组,分别为正常组,模型组,旋覆代赭汤组(9. 89 g·kg~(-1)),阳性药组(奥美拉唑镁肠溶片+枸橼酸莫沙必利片,2. 58 mg·kg~(-1)),每组15只。除正常组外,其余各组大鼠行"4. 2 mm幽门夹+2/3胃底结扎术"方法造模。从术后第8天开始,给予相应的药物进行灌胃干预,每日2次,共14 d,第15天处死取动脉血及食管组织。肉眼及光镜下观察食管组织病理学形态,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中Caspase-1,白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌情况,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测食管组织中NLRP3,Caspase-1,IL-1β的蛋白表达情况。结果:食管黏膜肉眼及镜下观察,与正常组比较,模型组损伤最为严重,积分最高。与正常组比较,模型组大鼠血清中Caspase-1,IL-1β的含量和食管组织中NLRP3,Caspase-1,IL-1β的蛋白表达明显升高(P 0. 05,P 0. 01);与模型组比较,旋覆代赭汤可明显降低大鼠血清中Caspase-1,IL-1β的含量,下调食管组织中NLRP3,Caspase-1,IL-1β的蛋白表达水平(P 0. 05,P 0. 01)。结论:旋覆代赭汤可以下调炎症小体蛋白组分NLRP3,Caspase-1的表达,降低炎症因子IL-1β的含量,表明此方可能通过抑制NLRP3/Caspase-1信号通路的激活,拮抗食管炎症反应,减少食管炎症损伤,治疗RE。     

中西医结合治疗对肿瘤化疗患者生活质量临床观察

目的:观察香砂六君子汤合旋覆代赭汤联合甲地孕酮改善肿瘤化疗患者生活质量的作用。方法:64例接受化疗的晚期肿瘤患者,随机分成2组,对照组口服甲地孕酮片;治疗组在对照组的基础上加用香砂六君子汤合旋覆代赭汤治疗。2个周期化疗后观察2组患者胃肠道反应、食欲、体重、卡氏评分(KPS)评分方面情况。结果:经2个周期化疗后,治疗组在胃肠道反应、食欲、体重、KPS评分方面均有明显改善。与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);胃肠道反应率治疗组0级、Ⅲ-Ⅳ级低于对照组,2组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:香砂六君子汤合旋覆代赭汤联合甲地孕酮可明显降低晚期肿瘤患者化疗后胃肠道反应、提高食欲,改善患者化疗期间及化疗后的生活质量。     

白术内酯Ⅲ对大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的抑制作用

目的探讨中药单体白术内酯Ⅲ对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)成脂分化的影响。方法通过细胞增殖/毒性检验法(CCK8)和油红O半定量实验筛选白术内酯Ⅲ的有效浓度;采用过氧化氢(H2O2)作为诱导BMSC成脂分化的模型,将实验细胞分为对照组、模型组、药物组。对照组细胞不予处理,模型组予以浓度为100μmol·L~(-1)的H2O2成脂分化诱导液诱导1 h,药物组在模型组基础上予以20μmol·L~(-1)的白术内酯Ⅲ含药培养液。油红O染色拍片法观察不同实验组脂滴含量,并采用q RT-PCR和Western Blot检测过氧化酶活化增殖受体(PPARγ)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(AP2)、葡萄糖转运蛋白(Glut4)的基因和蛋白表达变化。结果油红O结果显示,与对照组比较,模型组红色脂滴含量高于对照组(P0.05);与模型组比较,药物组红色脂滴含量低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)。q RT-PCR及Westem Blot结果表明,与对照组比较,模型组PPARγ、AP2、Glut4基因和蛋白的表达高于对照组(P0.05);与模型组比较,药物组PPARγ、AP2、Glut4基因和蛋白的表达均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论白术内酯Ⅲ能抑制H2O2诱导的BMSC成脂分化过程。     

HPLC法同时测定健儿膏中8种成分

目的建立HPLC法同时测定健儿膏(党参、山药、甘草等)中白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、党参炔苷、紫丁香苷、去氢土莫酸、土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Diamonsil Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.05%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长210、220、266 nm。结果 8种成分在各组范围内线性关系良好(r≥0.999 1),平均加样回收率96.99%~100.01%,RSD 0.83%~1.47%。结论该方法准确可靠,重复性好,可用于健儿膏的质量控制。     

HPLC法同时测定附子理中丸中甘草苷、甘草酸铵白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量

目的:建立同时测定附子理中丸中甘草苷、甘草酸铵、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Chanin HPU-C18 (4.6 mm×250 mm,5μm),以流动相A(乙腈)和流动相B(0.05%磷酸溶液)进行梯度洗脱,柱温35℃,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为237nm。结果:甘草苷、甘草酸铵、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ检测浓度分别在0.46~46 mg·L^-1(r=0.9999)、1.35~135 mg·L^-1(r=0.9999)、0.33~3.3 mg·L^-1(r=0.9996)、0.42~4.2 mg·L^-1(r=0.9998)范围内线性关系良好;平均加样回收率在(n=9)分别为100.9%、100.1%、98.3%和99.1,RSD分别为0.8%、1.0%、1.6%、1.4%。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于同时测定附子理中丸中甘草苷、甘草酸、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量。     

HPLC法测定白术不同炮制品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ

目的建立测定白术不同炮制品中白术内酯的测定方法。方法采用外标法。DikmaKromasilC_(18)(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱;体积流量为1.0mL/min;柱温为25℃;检测波长为220nm(白术内醣Ⅰ、Ⅲ)、276nm(白术内酯Ⅱ);进样量10μL。结果白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别在1.14-114、0.776-77.6、3.21-321μg/mL与峰面积呈良好的线性关系。白术生片、炒白术、麸炒白术、土炒白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的总量分别是1.3261、1.5910、1.5348、1.7380mg/g。结论不同炮制方法、辅料对白术各炮制品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ有一定影响。     

龙脉宁方中葛根素在心肌缺血大鼠体内药动学-药效学相关性研究

研究龙脉宁方中葛根素在正常及心肌缺血模型大鼠体内的药动学过程及其与龙脉宁方抗心肌缺血作用的相关性。该文建立了大鼠皮下注射盐酸异丙肾上腺素(ISO)复制心肌缺血模型,灌胃给予FFLMN提取物溶液后不同时间点眼眶采血,HPLC-UV检测大鼠血浆中葛根素浓度,比较灌胃相同剂量FFLMN龙脉宁正常组和模型组大鼠体内药动学差异。同时,采用酶标仪测定各时间点血浆中IL-6及SOD活性,绘制药-效曲线。结果表明,正常组心肌缺血模型组大鼠血浆中葛根素浓度药动学均符合二室模型,比较2组主要药动学参数,葛根素在正常AUC0-∞=(11.451±3.228)mg·h·L~(-1),AUC0-t=(14.047±3.765)mg·h·L~(-1),Cmax=(5.623±1.40)mg·L~(-1)。治疗组AUC0-∞=(68.849±50.396 9)mg·h·L~(-1),AUC0-t=(58.312±45.802)mg·h·L~(-1),Cmax=(18.456±7.517)mg·L~(-1)。血浆中SOD水平显著升高,IL-6浓度显著下降。表明与正常组相比,复方龙脉宁中葛根素在心肌缺血大鼠血浆中血药浓度高,消除速度慢,生物利用度高,血浆中葛根素浓度与龙脉宁方抗心肌缺血作用有关,能够升高SOD水平,抑制IL-6的释放。