中国北方人PAH基因外显子6，12的突变研究

目的：检测北方人中苯丙酮尿症（ＰＫＵ）Ｋ本丙氨酸羟化酶（ＰＡＨ）基因外显子６,１２中的突变。方法：应用聚合酶链反应－变性梯度凝胶电泳及直接测序方法,检测突变。结果Ｌ：中国北方人３４例ＰＫＵ患者外周血ＤＮＡ中鉴定ＰＡＨ基因外显子６,１２中的３种突变,Ｙ２０４Ｃ,Ｑ２３２Ｑ和Ｒ４１３Ｐ,其频率分别为５．９％,４．４％,５．９％。结论：本实验提示Ｑ２３２Ｑ可能为中国北方人中较常见的一种新突变,并可能为协     

胆道内支架引流术治疗梗阻性黄疸（附12例报告）

笔者对１２例胆道梗阻病人进行了非手术治疗。其中，采用自制“Ｚ”型自张式金属支架（ＥＭＳ）成功地实施经皮经肝或经“Ｔ”型管胆道内支架引流术（ＥＭＢＥ）治疗者８例。８例中，胆道良性梗阻，“Ｔ”型管引流术后２例，胆道恶性梗阻６例。ＥＭＢＥ后，行“Ｔ”型管引流者当日即停止外引流；梗阻性黄疸病人症状迅速消失，黄疸逐日消退。术后随访观察１～１６个月。胆道发生再闭塞２例（１例经再置入一组ＥＭＳ及局部放疗后获得再通）。术后３个月无黄疸死亡１例，其余病例均无黄疸生存。其中１例已１６个月无复发。本组未出现严重的并发症及副作用。笔者认为ＥＭＢＥ操作简便，副作用少，疗效显著，是一种治疗梗阻性黄疸的比较理想的非手术方法。     

人P^15基因真核表达重组体的构建和鉴定

将含人p15 cDNA质粒pBS-SK-pl5以EcoRI和XhoI进行双酶切，再与真核表达载体pCRTM3经相同酶切点连接，转化感受态细菌，筛选，鉴定得到可在真棱细胞中表达人p15基因的重组质粒pCR-hpl5。     

北方汉族人群PAH基因STR多态性分析及PKU产前基因诊断研究

苯丙酮尿症（ＰＫＵ）是由肝脏苯丙氨酸羟化酶（ＰＡＨ）缺陷引起的常染色体隐性遗传病。临床主要表现为智力低下。研究表明，ＰＫＵ的分子基础主要是ＰＡＨ基因的点突变。到１９９６年，汇集２８个国家研究成果的ＰＡＨ基因突变数据库已登记３２０余种ＰＡＨ突变［１］。...     

国人布-加综合征与FⅤ Leiden突变的相关研究

目的：探讨国人布-加综合征（BCS）与凝血第Ⅴ因子Leiden(FⅤL)突变的相关性。方法：收集29例国人BCS（其中25例为散发BCS、4例为家族性BCS）和29名健康对照者，并对其血样进行PCR-RFLP的FⅤL突变分析。结果：29例BCS中，共有3例FⅤL突变阳性，均为家族性BCS病例。其中家系A姐妹均有FⅤL突变,家系B妹妹突变阳性,均为杂合性突变。散发病例无1例阳性。对照组无1例阳性。29例国人BCS中，FⅤL突变频率为0.0517，而4例家族性BCS的FⅤL突变频率则为0.3750。29例BCS病例组与29例对照组间FⅤL突变频率无统计学差别，但家族性BCS病例组与对照组间FⅤL突变频率有显著统计学差别。结论：国人家族性BCS与FⅤL突变相关，国人散发性BCS与FⅤL突变无关。     

PCR产物真核TA克隆法构建基因表达重组体

ＰＣＲ产物真核ＴＡ克隆法构建基因表达重组体金春元张学王筠孙开来用ＰＣＲ方法扩增目的基因并与载体ＤＮＡ连接是目前常用的ＤＮＡ克隆技术之一。一般多用限制性内切酶将ＰＣＲ产物与载体ＤＮＡ分子特异切割，重新连接，组装成一个重组体。此项技术要求对ＰＣＲ产物进行...     

GFP-pl6融合基因表达载体的构建

本文报道了以ＧＦＰ（绿色荧光蛋白）基因为报告基因，ｐｌ６基因为目的基因，将ｐｌ６基因分别插入ＧＦＰ基因的上游和下游，构建成ＧＦＰ－ｐｌ６融合基因表达载体ｐＣｐｌ６Ｇ和ｐＣＧｐ１６，并通过酶切、电泳技术对重组体进行了鉴定。该表达载体的构建成功为开展ｐｌ６转基因动物模型的建立及其特性研究奠定了基础     

人p27和p15基因表达重组体的构建

周期素依赖性激酶抑制蛋白（ｃｙｃｌｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｐｒｏ－ｔｅｉｎ，ＣＫＩ），如ｐ２７和ｐ１５基因是抑癌基因的候选基因。作者通过ＰＣＲ方法获得含人ｐ２７全部编码区域的ｐ２７ｃＤＮＡ片段，并用ＰＣＲ产物ＴＡ克隆法，将其构建在真核表达载体ｐＣＲＴＭ３中；用常规酶学方法，通过ＥｃｏＲＩ和ＸｈｏＩ双酶切位点，将人ｐ１５ｃＤＮＡ片段克隆入ｐＣＲＴＭ３载体。重组体的鉴定通过限制酶图谱分析进行。人ｐ２７和ｐ１５基因真核表达重组体的构建为进一步研究其功能打下基础。     

检测苯丙氨酸羟化酶基因内短串联重复顺序进行苯丙酮尿症产前诊断

目的：应用聚合酶链反应检测苯丙氨酸羟化酶（ＰＡＨ）基因内高度多态的短串联重复顺序（ＳＴＲ），以兹建立简便易行的苯丙酮尿症（ＰＫＵ）产前诊断方法，杜绝苯丙酮尿症（ＰＫＵ）患儿的出生，提高人口质量。方法：通过ＰＣＲ技术，对８个经典型ＰＫＵ家系２５个成员的ＳＴＲ等位片段进行了分析，完成８例ＰＫＵ高危胎儿的产前基因诊断。结果：１例胎儿患ＰＫＵ，２例胎儿正常，４例胎儿为突变ＰＡＨ等位基因携带者。结论：提出了易于推广的开展ＰＫＵ产前基因诊断的方案