中孕期胎儿染色体异常高危孕妇羊水细胞胎儿染色体核型及介入性产前诊断指征的大样本分析

目的探讨中孕期胎儿染色体异常(FCA)高危孕妇羊水细胞胎儿染色体核型(FK)及其介入性产前诊断(IPD)指征。方法选择2014—2018年,在四川大学华西第二医院产前诊断中心进行羊膜腔穿刺术羊水细胞FK检测的63581例FCA高危孕妇(孕龄为19~27+6孕周)为研究对象。回顾性分析孕妇不同IPD指征及其胎儿染色体核型异常(FKA)检测结果。本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院伦理委员会所制定的伦理学标准,并通过该伦理委员会批准[审批文号:医学科研2019伦审批第(077)号]。结果①本组63581例中孕期孕妇的FKA检出率为3.13%(1989/63581)。这63581例孕妇的IPD指征分别为高龄(预产期年龄≥35岁)(25648例)、血清学筛查高风险(29009例)、无创产前筛查(NIPT)高风险(333例)、夫妇一方为染色体异常携带者(603例)、超声筛查发现胎儿结构异常及超声软指标异常(2647例)、异常儿生育史(1546例)、于外院进行羊水细胞FK分析结果异常者(7例)、孕妇智力低下及合并智力低下家族史(149例)、孕妇早孕期有害物质接触史(1400例)、其他(2239例),FKA检出率分别为3.26%(836/25648)、2.04%(593/29009)、65.17%(217/333)、34.33%(207/603)、3.51%(93/2647)、1.68%(26/1546)、85.71%(6/7)、4.03%(6/149)、0.14%(2/1400)、0.13%(3/2239)。②351例孕妇的IPD指征为超声筛查发现胎儿结构异常中,IPD指征为胎儿淋巴水囊瘤、皮肤水肿的FKA检出率最高,为26.09%(6/23)。2296例孕妇的IPD指征为胎儿超声软指标异常中,IPD指征为胎儿颈项透明层(NT)值≥2.5 mm的FKA检出率最高,为7.74%(66/853)。结论孕妇高龄、血清学筛查高风险、NIPT高风险、夫妇一方为染色体异常携带者、超声筛查发现胎儿结构异常及超声软指标异常等,均为中孕期孕妇FCA的IPD指征,孕妇IPD指征类型不同,FCA风险不同。羊膜腔穿刺术羊水细胞FK检测,可预测有IPD指征孕妇的妊娠结局,为降低FKA出生率提供参考。     

三磷酸腺苷生物荧光液闪测定法检测活细胞计数

为建立一种检测活细胞数的方法,作者采用三磷酸腺苷(ATP)生物荧光液闪测定法检测小鼠纤维瘤细胞株L929.ATP标准曲线工作范围为10 -9～10-5mol/ml,相关系数r=0.9963(P＜0.001);当活细胞数在3×1 02～106个/ml时与发光计数值有良好的线性关系,r=0.9922(P＜0.001),变异系数 CV = 1%～3%.用ATP生物荧光液闪测定法检测活细胞数灵敏、简便、准确、重复性好,用液闪计数仪即可完成测定,有较大的实用价值.     

外阴恶性肿瘤63例临床病理及与HPV感染相关性研究

外阴癌居女性生殖系恶性肿瘤第四位,多见于绝经后老年妇女,因位居体表,易于早期发现。但近年临床观察却发现不少年轻和大块癌灶的晚期患者,给治疗带来了一定的困难。为了解近年外阴恶性肿瘤发生发展特点及治疗方法对手术后患者恢复的影响,本研究回顾分析了１９８９年１０月至１９９７年１０月经我院手术治疗的外阴恶性肿瘤６３例,对其临床和病理资料及与ＨＰＶ感染的相关性进行了研究。１　资料及方法１．１　资料来源１９８９年１０月至１９９７年１０月在我科住院手术并经病理检查确诊的外阴恶性肿瘤６３例。临床分期参照ＦＩＧＯ和…     

CD与bcl-Xs基因联合转染卵巢癌细胞株对5-氟胞嘧啶作用的影响

目的　了解自杀基因胞嘧啶脱氨酶基因 (cytosinedeaminase ,CD)及其前药 5 氟胞嘧啶 (5 fluorucytosine,5 FC)和bcl Xs基因转移联合作用对卵巢癌细胞株生长的影响。方法　以复制缺陷型腺病毒为载体将CD基因和bcl Xs基因体外转染大鼠卵巢癌细胞株NUTU 19细胞 ,加入含 5 FC的培养基。MTT法检测培养细胞吸光度值 ,计算细胞存活率。结果　单一bcl Xs基因转移及单一CD /5 FC系统作用对NUTU 19细胞的生长抑制作用均随病毒滴度的增加而增大 ;将两者联合作用于NU TU 19细胞 ,其生长抑制率比两者单独使用时的生长抑制率之和更高 ,表现为协同效应 (P <0 .0 0 0 1)。结论　CD /5 FC系统与bcl Xs基因转移联合使用对NUTU 19细胞的生长抑制具有协同作用。     

实时荧光定量PCR和RT-PCR检测宫颈癌细胞株HPV-16 E6和E7基因的实验研究

目的 探讨实时荧光定量PCR和RT-PCR检测HPV-16 E6和E7基因的实验方法.方法 将制备的含HPV-16 E6和E7基因的质粒作为标准品,建立实时荧光定量PCR和RT-PCR方法,分别对3种宫颈癌细胞株进行HPV-16 E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数的定量检测.结果 建立的实时荧光定量PCR标准曲线相关系数大于0.99,PCR效率在90%以上.HPV-16 E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数在宫颈癌细胞株 CaSki、SiHa和HeLa中从高到低依次是CaSki＞SiHa＞HeLa.结论 用实时荧光定量PCR和RT-PCR方法研究HPV-16 E6和E7基因的DNA和RNA含量结果可靠,为进一步研究两个基因与宫颈病变的关系奠定了基础.     

FHIT基因杂合性丢失及微卫星不稳定性与宫颈癌发生发展的关系

目的探讨FHIT基因杂合性丢失(LOH)及微卫星不稳定性(MI)在宫颈癌发生发展中的作用。方法选择FHIT基因的两个微卫星多态标记对60例浸润性宫颈癌及35例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织进行LOH和MI检测。结果在D3S1234和D3S1300座位上,浸润性宫颈癌的LOH发生率分别为45.0%(27/60)、38.3%(23/60),MI频率分别为18.3%(11/60)、11.7%(7/60)。CIN的LOH频率分别为42.9%(15/35)、37.1%(13/35)。MI频率分别为11.4%(4/35)、8.6%(3/35)。宫颈癌及CIN在两个位点的LOH和MI无统计学差异(P>0.05);两位点的LOH阳性率在宫颈癌组织高中分化与低分化之间有统计学差异(P<0.05);双座位的LOH及MI在宫颈癌有无淋巴结转移间有统计学差异(P<0.05);高级别CIN(CIN及原位癌)患者的LOH和MI的发生率高于低级别CIN(CIN、)。结论FHIT基因的改变是CIN发生过程中的较晚期事件;FHIT基因的LOH对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值。     

ATP法在卵巢癌化疗药物敏感性实验中的临床应用

选择针对个体有效的药物进行化疗是治疗卵巢癌的重要手段之一,它可以提高药物疗效,减少其毒副作用;体外药物敏感实验是实现这种个体化化疗的重要方法.三磷酸腺苷生物发光法( ATP- bioluminesence assay, ATP法)自 1987年建立以来受到了各国学者的关注并进行了大量的研究,被认为是一种敏感而稳定的检测方法 [1～ 3],然而此方法在我国临床上很少使用.为探讨 ATP法在卵巢癌化疗药物敏感性实验中的临床应用价值,本文用 ATP法对 26例新鲜卵巢癌组织进行药物敏感实验,采用 VICTOR2多功能仪进行检测,并对患者进行随访,对其临床实用性进行探讨.     

原发性输卵管癌25例临床分析

目的:探讨原发性输卵管癌的临床及病理特征、治疗.方法:回顾性分析我院收治的25例原发性输卵管癌病例.结果:患者平均年龄55岁.18例(72%)为绝经后妇女.最常见的临床表现依次为盆腔肿块23例(92%),异常阴道流血10例(40%),阴道排液9例(36%)和腹痛9例(36%).组织学类型:浆液性腺癌20例(80%),混合性腺癌3例(12%),子宫内膜样腺癌2例(8%).细胞分化:低分化17例(68%),中-低分化5例(20%),中分化3例(12%).FIFO分期:Ⅰ期1例,Ⅱ期3例,Ⅲ期17例,Ⅳ期4例.结论:原发性输卵管癌临床表现多样且缺乏特异性,很少能在术前明确诊断.该病恶性程度高,临床多为晚期病例.手术及化疗是主要治疗手段.     

FISH技术诊断自然流产胚胎染色体数目异常的实验研究

目的 探讨荧光原位杂交（FISH）技术在诊断自然流产胚胎染色体数目异常的应用价值.方法 用FISH技术对770例自然流产胚胎绒毛组织13、16、18、21、22、X及Y染色体数目进行检测.结果 770例标本FISH检测全部成功,胚胎染色体数目异常342例（44.42％）.异常标本中非整倍体259例（75.73％）,三倍体67例（19.59％）,四倍体12例（3.51％）,嵌合体4例（1.17％）.检出最多的染色体数目异常类型为16三体（29.54％）,其次为X单体（15.51％）,其他比例较高异常类型为22三体（14.05％）、69,XXY（9.94％）、69,XXX（9.65％）、21三体（7.32％）及13三体（4.39％）.孕妇既往自然流产次数、孕妇年龄与染色体数目异常无明显关系（P＞0.05）.结论 染色体数目异常是导致自然流产的重要因素之一,FISH技术是检测染色体数目异常的有效方法,对自然流产病因诊断、再次妊娠指导具有重要意义.     

子宫内膜异位症及子宫腺肌症患者雌、孕激素受体研究

用葡聚糖—活性炭分离法(DCC)在18例卵巢宫内膜异位症患者的异位内膜组织及13例子宫腺肌症患者的局部腺肌组织中测得雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR),但其阳性结果平均值低于正常宫内膜。18例卵巢宫内膜异位症中,PR阴性6例(33.4％),这可能与部分患者孕激素治疗效果不满意有关;13例子宫腺肌症中PR阳性10例(76.9％),提示对40岁以下患者保留子宫,采用激素治疗的可能性。雌、孕激素受体水平与这两种疾病患者的治疗及预后的关系,值得进一步探讨。