肝癌分子分型和转移复发的早期预测

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC;简称肝癌)位居全球恶性肿瘤发病率第5位、死因第3位,在我国则已经成为恶性肿瘤的第2位杀手,肝癌的总5年生存率不足5%,每年新发病564000例,死亡549000例[1]。其预后如此之差的主要原因是肝癌容易侵犯门静脉而导致肝内播散,从而出现高肝内     

肿瘤转移抑制基因HTPAP的Haploview单体型构建分析

目的 通过单核苷酸多态性(SNP)检测对肿瘤转移抑制基因HTPAP进行单体型构建和分析.方法 取100例肝细胞癌(HCC)新鲜标本,应用激光捕获组织显微切割获取纯肝癌细胞、提取DNA,对HTPAP基因上已登录的15个SNP位点进行检测,应用Haploview软件构建单体型.结果 15个SNP位点中,有8个表现为单态、5个呈多态性、2个未能检测出.对100例肝细胞癌的该5个多态位点进行单体型构建后发现11种单体型,其中3种单体型(C-A-T-C-A、C-G-T-C-A和T-A-G-G-G)最常见,占87%,另外8种单体型占13%.4个SNP(rs7007097、rs3830326、rs1149、rs3739252)表现为强连锁不平衡关系,尽管rs11539529出现重组现象,但从整体看还是属于同一个单体型块.结论 肿瘤转移抑制基因HTPAP在肝癌中常见C-A-T-C-A、C-G-T-C-A和T-A-G-G-G三种单体型,针对不同单体型研究分析可能为肝癌转移复发、预后预测提供新的途径和指标.     

肝脏血管平滑肌脂肪瘤的临床病理分析

目的 探讨肝脏血管平滑肌脂肪瘤(HAML)的临床病理特点及诊治方法.方法 对1998年10月至2007年10月复旦大学附属中山医院肝脏外科收治的51例HAML患者的临床表现、病理特点、诊治及预后进行回顾性分析.结果 本组男性10例,女性41例,平均年龄44岁,症状以腹部肿块(33例)和腹部疼痛不适(15例)为主,少数表现为发热(2例).肿瘤由血管、平滑肌和脂肪细胞组成,免疫组织化学染色显示HMB-45(50/51)、SMA(47/49)和S-100(39/42)的阳性率较高.51例HAML均手术切除,平均住院时间13.8 d,术中平均出血263 ml,平均随访时间为55.4个月,无一例出现复发或转移.结论 HAML为肝脏少见良性间质瘤,确诊依赖于病理学及组织化学检查,HBM-45阳性肌细胞是重要的诊断标志.手术切除是最佳治疗手段,预后好.     

原发性肝淋巴瘤的外科治疗

原发性肝淋巴瘤 (primarylymphomaofliver,PLL) ,临床罕见 ,病因不清 ,约占结外淋巴瘤的 0 4 % [1] ,PLL无特异性临床表现 ,单纯根据病史、体检及影像学检查难于确诊 ,我们报道 4例PLL的临床诊治及预后 ,以供临床参考。资料与方法1995年 9月至 2 0 0 3年 9月 ,4例病理证实的PLL在我所手术切除。其中男性 3例 ,女性 1例 ;年龄平均 4 7(32～ 6 4 )岁。其中 3例患者有慢性肝炎史 (8～ 30年 )。1.临床表现和实验室检查 :2例因右上腹胀痛 ,2例患者因肝病随访发现肝内占位性病变 ;1例伴食欲不振、体重减轻、乏力 ,无发热盗汗等 ;1例患者有中…     

MicroRNA生物合成相关基因在肝癌中的表达及其意义

目的通过检测肝癌和癌旁组织中microRNA(miRNA)合成相关基因的mRNA表达,分析其与肝癌恶性行为的关系。方法运用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肝癌组织及其配对癌旁组织中miRNA生物合成相关基因的mRNA表达水平,比较分析其表达水平差异及其与肝癌预后的关系。结果 RT-PCR结果显示,与相应的癌旁组织相比,肝癌组织中细胞核内miRNA生物合成相关基因Drosha、DGCR8、DBR1、ADAR、Exportin 5的mRNA表达水平显著升高(P<0.0001),而细胞质内miRNA生物合成相关基因Dicer、AGO2、GEMIN3、GEMIN4的mRNA表达水平显著下降(P<0.0001)。肝癌组织中DBR1和Exportin 5 mRNA高表达患者的总生存率高于低表达患者(P<0.05),癌旁组织中DGCR8mRNA高表达患者的总生存率高于低表达患者(P<0.05)。结论 Dicer的表达可能在肝癌发生发展过程中起重要作用。DBR1、Exportin 5和DGCR8可以作为肝癌治疗的潜在干预靶点。     

DNA载体介导的RNAi抑制肝癌细胞的骨桥蛋白表达及侵袭性

目的探讨骨桥蛋白(OPN)对高转移潜能人肝癌细胞系HCCLM3侵袭性影响。方法构建两个针对人OPN mRNA干扰质粒pENTR~(TM)/U6-INF(pINF-1、2)及对照质粒pENTR~(TM)/ U6-CTR(pCTR),并将其转染HCCLM3细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定OPN的mR—NA表达量；Western印迹测定OPN蛋白的表达量；噻唑蓝(MTT)比色法实验检测HCCLM3的增殖力；Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭力的改变；结果与仅加转染试剂的空白对照组(2．01±0．13)相比。转染24h后,plNF-1组OPN mRNA用RT-PCR无法检测到,pINF-2组mRNA(1．00±0．12)下降50%,而pCTR组mRNA(2．02±0．13)表达差异无统计学意义(P＞0．05)。转染48h后plNF-1组OPN蛋白表达(0．11±0．02)与空白对照组(1．02±0．11)相比下降90%；转染plNF-1后,HCC-LM3细胞的增殖力下降2%。但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。Matrigel侵袭实验结果显示,与空白对照组(28．4±1．5)相比,转染plNF-1后HCCLM3细胞穿过人工基底膜的数量(10．2±0．8)明显减少,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论pINF-1可以特异性抑制高转移肝癌细胞系HCCLM3中OPN的表达,并显著降低其侵袭力,但对细胞增殖力影响不大,此技术有望成为抑制肝癌侵袭转移的新途径。     

肝癌转移相关的微小RNAs在不同转移潜能肝癌细胞系的定量研究

目的 研究与转移密切相关的微小RNAs(miRNAs)在不同转移潜能肝癌细胞系的表达水平,探讨其在肿瘤转移过程中的生物学功能.方法 提取细胞系MHCC97H、MHCC97L、HepG2、L02的总RNA,通过反转录获得特异miRNA(miR-122a、miR-124a、miR-148a、miR-148b、miR-15a、miR-219、miR-30c、miR-338、miR-34a、Let-7g、miR-9)的cDNA,并应用TaqMan MGB探针法对其进行定量检测.采用AB17500系统软件V1.3.1采集Ct值,并使用miRNA内参基因RNU6B校正,相对定量计算公式RQ=2-△Ct,A Ct=CtmiRNAs-CtRNu6B.数据均经SPSS13.0统计软件包处理,采用t检验或非参数检验. 结果 转移相关的miRNAs(miR-124a除外)在MHCC97H与MHCC97L中表达,差异均有统计学意义.HepG2中miR-30c、miR-338、miR-34a和Let-g的表达水平明显高于L02,分别为miR-30c(8.41±0.40比6.82±0.29),miR-338(3.14±0.29比-2.36±0.32),miR-34a(0.71±0.40比-2.95±0.26),Let-7g(-4.07±0.55比-6.98±0.56),t值依次为2.948,12.656,7.484,3.684,P值均＜0.05,差异有统计学意义.而miR-148b,miR-9的表达则显著低于正常肝细胞,分别为miR-148b(1.96±0.51比3.76±0.28),miR-9(-4.38±0.86比-1.10±0.53),t值依次为-3.073,-3.324,P值均＜0.05,差异有统计学意义.miR-148家族中miR-48b在所测细胞系中的表达(5.46±1.21)均显著强于miR-148a的表达(1.29±0.35),Z=-5.097,P=3×10-7,差异有统计学意义.结论 可以利用肝癌细胞系列细胞平台进一步研究肝癌转移相关miRNAs在肿瘤转移过程中的生物学功能.     

比较机器人外科手术系统与腹腔镜肝切除治疗肝细胞癌的初步结果

目的 通过与腹腔镜肝切除治疗肝细胞癌的结果进行比较,初步总结机器人外科手术系统辅助肝切除手术的技术特点、安全性及初步疗效.方法 2010年1～10月,应用机器人外科手术系统辅助肝切除手术(机器人组)治疗3例肝细胞癌患者,均伴不同程度肝硬化,肿瘤均为单发,分别位于Ⅲ段(2例)、Ⅵ段(1例),并与同期完成的腹腔镜肝切除治疗的15例肿瘤大小、位置相似的肝细胞癌患者(腹腔镜组)进行比较.结果 机器人组的中位肿瘤直径为3 mm(2.0～3.5 cm),腹腔镜组为4 cm(1.7～9.0 cm).机器人组的中位手术时间为120 min(90～180 min).腹腔镜组为150 min(100～220 min).机器人组的中位术中出血量为100 mL,腹腔镜组为75 mL,两组各有1例患者术中输血.腹腔镜组有1例患者中转开腹手术.机器人组术后中位住院时间为5 d(4～6 d),腹腔镜组为6 d(4～8 d).机器人组无手术并发症发生,腹腔镜组有1例因术后双侧胸腔积液而需引流.随访至今腹腔镜组有1例发生肝内复发.结论 初步结果显示,对周边型(如Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ段)肝细胞癌患者,机器人外科手术系统辅助肝切除手术的治疗效果与腹腔镜肝切除相似.     

唇形切肝法用于原发性肝癌外科治疗

目的 陈述唇形切肝法的操作细节并评议此咎方法治疗原发性肝癌（ＰＬＣ）的优点。方法 唇形切肝法是非规则性肝切除术的方法之一。关键在下列５个技术环节;（１）充分游离肝周韧带;（２）设计唇形肝切口;（３）切中山品两侧置缝线牵提;（４）楔形断肝和（５）肝断面对缝。结果 笔者单位用此咎子术方法治疗２３３例ＰＬＣ患者,其中８便因肿瘤复发接受了两次肝切除手术。手术死亡率为１．２％,２例死于肝功能衰竭,１例死于肾