胃癌细胞中SerpinB5与MAFbx的相互作用及其作用位点研究

目的 探讨胃癌细胞中SerpinB5能与MAFbx的相互作用及其作用位点.方法 采用酵母双杂交及免疫共沉淀方法检测SerpinB5与MAFbx之间的相互作用.分别用RNA干扰及瞬间转染pGBKT7-SerpinB5调节SerpinB5表达水平.在胃癌细胞株SUN-16中研究SerpinB5对MAFbx表达的影响.用同源建模的方法构建出MAFbx的结构信息;并以分子对接的手段来预测SerpinB5与MAFbx相互作用的位点.结果 酵母双杂交及免疫共沉淀均证实SerpinB5能与MAFbx相互作用;MAFbx的表达水平随着SerpinB5的表达水平变化而变化.同源建模和分子对接的方法预测SerpinB5与MAFbx蛋白相互作用的关键残基是PR0261、ASN361和LYS362.结论 胃癌细胞中SerpinB5能与MAFbx相互作用,且SerpinB5上的PR0261、ASN361、LYS362残基是其与MAFbx蛋白相互作用的可能位点.     

胃癌相关激肽释放酶的筛选及其临床意义

目的:筛选并探讨胃癌相关激肽释放酶(kallikrein,KLK)在胃癌中的表达,及其与胃癌临床病理和预后的关系。方法:用cDNA微阵列检测胃癌组织及正常胃黏膜标本,筛选出在胃癌组织中差异表达的KLK;用real-timePCR方法进一步验证;再用免疫组化检测胃癌组织石蜡切片中之目标KLK表达水平,并分析其与胃癌病人临床特征及预后的关系。结果:胃癌组织中,KLK10表达上调9.55倍,KLK11表达下调12.02倍。KLK10的表达水平与肿瘤直径、肿瘤浸润深度及淋巴结转移情况明显相关,而KLK11的表达水平与这些临床病理学特征均无关;肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及KLK10和KLK11表达状况与病人的总体生存率明显相关。结论:胃癌组织中差异表达的KLK主要包括KLK10及KLK11;KLK10的表达水平与肿瘤直径、肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及病人的总体生存率明显相关;而KLK11的表达水平与这些临床病理学特征均无相关,而与病人的总体生存率明显相关。     

选择性动脉造影及栓塞在术后上消化道大出血诊治中的应用

在术后近期发生上消化道大出血的原因是复杂多样的.一旦发生,病情凶险.若在出血原因和部位不明的情况下盲目急诊再手术不仅风险较大,且单纯剖腹探查的确诊率仅为31%～65%[1].而选择性动脉造影因其创伤小、对出血定位正确并能有效地进行止血治疗,因此对术后近期上消化道大出血的病例尤为适用.我院自1994年1月至2008年6月间共收治上消化道手术后近期大出血病例13例,均经选择性动脉造影明确了出血部位和原因,并进行栓塞治疗,均成功止血.除1例需择期另行确定性手术外,12例免于再次手术,现总结报道如下.     

术后并发甲亢危象的诊治分析

甲亢危象是医疗重症之一,发病率低,约0.8%,女性多于男性,发病期间可伴有一种或多种器官功能衰竭,致死率高达20%.甲亢危象临床表现多样,包括高热、心动过速、腹泻、恶心、呕吐、烦躁不安、昏迷以及其它各种中枢神经症状.该病的早期诊断,诱因的正确认识,对于抢救措施的及时实施具有重要意义.     

胸大肌切开第Ⅲ水平淋巴结清扫在乳腺癌改良根治术中的意义

目的:了解乳腺癌第Ⅲ组淋巴结的受累情况,探讨Auchincloss改良根治术加胸大肌开窗淋巴结清扫在乳腺癌诊断与治疗中的意义。方法:选取乳腺癌患者130例,在Auchincloss改良根治术基础上,施行胸大肌开窗清扫第Ⅲ组淋巴结,对该组淋巴结的受累情况及相关因素进行分析。结果:乳腺癌患者第Ⅲ水平淋巴结阳性率13.08%,与原发肿瘤大于5cm、腋淋巴结阳性个数≥4枚及高复发率有关,术后无胸肌萎缩、严重的淋巴水肿等并发症。结论:联合胸大肌劈开的乳腺癌改良根治术,创伤较小,对腋窝第Ⅲ组淋巴结清扫效果明确,能为乳腺癌术后的综合治疗提供准确的临床病理依据。     

术中快速免疫组化检测早期乳腺癌前哨淋巴结的临床价值

目的 探讨术中快速免疫组化检测乳腺癌前哨淋巴结（SLN）CK19、端粒酶表达的临床实用价值.方法 以蓝染法对66例乳腺癌患者施行SLN活检,62例获得成功,该62例患者的117枚SLN进行快速免疫组化检测,以CK19、端粒酶为检测指标,以术中冰冻切片、术后连续石蜡切片和常规免疫组化以及术后腋淋巴结连续石蜡切片为对照.结果 SLN活检成功率达93.93%,冰冻切片对SLN的阳性检出率最低,连续石蜡切片次之,快速免疫组化检测SLN阳性检出率明显高于冰冻切片（P = 0.002）,而快速免疫组化检测与常规免疫组化检测SLN阳性检出率的差异无统计学意义（P = 0.961）.快速免疫组化检测预测腋淋巴结转移准确率达96.55%,CK19与端粒酶的灵敏度分别为96.36%、96.83%,特异度均为100%.结论 正确使用蓝染法可获得较高的SLN活检成功率,SLN的快速免疫组化检测方法具有快速、及时、准确的优点,能在术中即时为术者提供检测结果,从而拟定个体化治疗方案,使早期乳腺癌患者免受腋淋巴结清扫之苦.     

DNA载体介导的RNAi抑制肝癌细胞的骨桥蛋白表达及侵袭性

目的探讨骨桥蛋白(OPN)对高转移潜能人肝癌细胞系HCCLM3侵袭性影响。方法构建两个针对人OPN mRNA干扰质粒pENTR~(TM)/U6-INF(pINF-1、2)及对照质粒pENTR~(TM)/ U6-CTR(pCTR),并将其转染HCCLM3细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定OPN的mR—NA表达量；Western印迹测定OPN蛋白的表达量；噻唑蓝(MTT)比色法实验检测HCCLM3的增殖力；Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭力的改变；结果与仅加转染试剂的空白对照组(2．01±0．13)相比。转染24h后,plNF-1组OPN mRNA用RT-PCR无法检测到,pINF-2组mRNA(1．00±0．12)下降50%,而pCTR组mRNA(2．02±0．13)表达差异无统计学意义(P＞0．05)。转染48h后plNF-1组OPN蛋白表达(0．11±0．02)与空白对照组(1．02±0．11)相比下降90%；转染plNF-1后,HCC-LM3细胞的增殖力下降2%。但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。Matrigel侵袭实验结果显示,与空白对照组(28．4±1．5)相比,转染plNF-1后HCCLM3细胞穿过人工基底膜的数量(10．2±0．8)明显减少,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论pINF-1可以特异性抑制高转移肝癌细胞系HCCLM3中OPN的表达,并显著降低其侵袭力,但对细胞增殖力影响不大,此技术有望成为抑制肝癌侵袭转移的新途径。     

甲状腺术后低钙血症的预测与防治

甲状腺手术后发生低钙血症是一种较为常见的手术并发症,其发生率为1．7％-68．0％。甲状腺手术后并发低钙血症,轻者可无症状,或出现手足、口周针刺麻木感,重者可出现四肢痉挛性抽搐,甚至可发生喉和膈肌痉挛,引起窒息死亡。并发症也严重影响了甲状腺功能亢进症（甲亢）、甲状腺癌等患者的手术治疗效果。我院2005—2009年发生甲状腺术后低钙血症436例,现将病例资料分析如下。     

术后并发甲亢危象的诊治分析

甲亢危象是医疗重症之一,发病率低,约0.8%,女性多于男性,发病期间可伴有一种或多种器官功能衰竭,致死率高达20%.甲亢危象临床表现多样,包括高热、心动过速、腹泻、恶心、呕吐、烦躁不安、昏迷以及其它各种中枢神经症状.该病的早期诊断,诱因的正确认识,对于抢救措施的及时实施具有重要意义.     

染色体8p上FGL1基因可能与肝癌转移相关

目的：比较不同转移潜能的肝癌组织的基因表达谱差异，结合以往研究发现的有关肝癌转移相关分子遗传学异常，以发现与肝癌转移相关基因。方法：应用基因芯片技术，比较不同转移潜能的肝癌组织标本的基因表达谱，并应用RT—PCR方法对差异表迭较明显的基因进行了验证。结果：不伴转移与伴有转移的肝癌组织之间，有989个基因存在差异表达，其中10个位于染色体8p上。选取定位于8N1．3-p22的类纤维蛋白原1基因（FGLl）（fibfinogen-like 1，同义于HFREP1，LFIRE1），用RT-PCR的方法进行验证，结果证明FGL1在伴有转移的肝癌组织中表达明显下调。结论：不同转移潜能的肝癌组织中基因表达谱存在明显差别。染色体8p上可能存在抑制肝癌转移的基因。FGL1基因可能是-候选肝癌转移抑制基因，值得进一步研究。