高效液相色谱法测定脂平康中大黄酸、大黄素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定脂平康中大黄酸、大黄素含量的检测方法.方法:采用高效液相色谱法,Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.3%醋酸(87:13);检测波长:434 nm;流速:1.0 mL·min-1;柱温:25℃.结果:大黄酸在1.47～29.40)mg·L-1,大黄素在1.16～23.20 mg·L-1范围内呈良好线性关系;回收率:大黄酸为98.38%,大黄素为98.06%;RSD:大黄酸为1.80%,大黄素为1.07%.结论:本方法检测快速,定量准确,重现性好,可用于脂平康的含量测定.     

HPLC法测定清热解毒方芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定清热解毒方中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:KromasilC₁₈(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.2%磷酸(85∶15)为流动相,流速:1.0mL·min^-1,检测波长:254nm,柱温:35℃。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在1.0125～16.2μg、1.025～16.4μg、1.025～16.4μg、1.025～16.4μg、0.625～10μg范围内呈良好线性关系,相关系数分别为0.9991,0.9998,0.9997,0.9994,0.9996,平均回收率分别为101.4%,102.0%,101.7%,102.1%,100.8%。结论:该方法操作简单、准确,且重复性好,可作为清热解毒方质量的控制指标之一。     

Anti‐fibrotic and Anti‐tumorigenic Effects of Rhein,a Natural Anthraquinone Derivative,in Mammalian Stellate and Carcinoma Cells

Anthraquinone compounds have been recognized to possess antiinflammatory, anti‐fibrotic and anti‐tumour properties and thus applied in human and veterinary therapeutics as active substances of medicinal products. Amongst the anthraquinones isolated from Rheum palmatum, also known as da‐huang, rhein was detected as one of the highest metabolite contents in the bloodstream of mammals. The biological activities of rhein therefore deserve detailed investigation. In this study, we aimed to delineate the mechanism of inhibitory actions of rhein on fibrotic and tumorigenic processes by means of various biochemical assays, such as immunofluorescent staining, real‐time polymerase chain reaction (PCR) and western blotting analyses in rat pancreatic stellate cells (LTC‐14), human pancreatic ductal adenocarcinoma cells (PANC‐1) and human colon carcinoma cells (SW480 and SW620). Our results demonstrated that the application of rhein notably suppressed the mRNA and protein levels of various fibrotic and tumorigenic mediators including alpha‐smooth muscle actin, type I collagen, fibronectin, N‐cadherin and matrix metalloproteinases in the testing mammalian cells. The mechanism of the suppressive actions of rhein was associated with the modulation of the sonic hedgehog and serine‐threonine kinase signalling pathways. In conclusion, we suggest that rhein may serve as a therapeutic or an adjuvant agent in anti‐fibrotic and anti‐tumorigenic approaches. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.     

多元回归分析大黄不同炮制品中蒽醌与抑菌活性相关性

目的:采用多元回归分析不同大黄炮制品蒽醌含量和大黄抑菌能力之间的相互关系.方法:采用HPLC法建立大黄中蒽醌的指纹图谱,流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液梯度洗脱,检測波长为254 nm.通过大黄不同炮制样品对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑制效果来评价其抑菌活性,采用主成分、多元线性回归分析大黄不同蒽醌与抑菌...     

壳聚糖对大黄有效成分吸附作用的研究

目的观察高分子吸附剂壳聚糖对大黄醇提液澄清吸附作用。方法以高分子壳聚糖为吸附剂,在不同条件下进行吸附澄清,通过UV法和HPLC法测定,以获得最佳实验室工艺条件。结果在温度为70℃,pH11～12,吸附剂用量小于1.5‰,吸附时间为1.5h时,澄明度最好,但对大黄素、大黄酚等有效成分的吸附率较高,含量会降低16%～40%。结论壳聚糖作为澄清剂对大黄素等有效成分有一定的吸附作用,故在实际应用中应尽量避免使用壳聚糖作为大黄或含大黄、虎杖、决明子、番泻叶、茜草等制剂的澄清剂,以保证药物的疗效。     

大黄酸配伍羟基红花黄色素A对大鼠单侧输尿管结扎慢性肾病的作用及机制研究

目的 研究大黄酸（RH）配伍羟基红花黄色素A（HSYA）对慢性肾病（CKD）模型大鼠抗炎、抗氧化、抗凋亡能力的影响及其可能机制。方法 30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、RH（100 mg/kg）组、HSYA（50 mg/kg）组和RH（100 mg/kg）+HSYA（50 mg/kg）组,采用单侧输尿管结扎（UUO）建立CKD模型。试剂盒法测定大鼠肾组织丙二醛（MDA）水平、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性;Masson染色观察肾组织病理变化;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blotting检测肾组织中IκBα、p-IκBα、NF-κB p-65、p-p65和Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 RH和HSYA配伍使用明显降低MDA水平,提高SOD及GSH-Px活性;减少肾小球炎细胞浸润,改善肾小管间质纤维化等病理改变;抑制细胞凋亡;抑制磷酸化的IκBα及p65蛋白表达;使Bcl-2蛋白表达上调、Bax表达下调,且效果好于单用组。结论 在CKD进程中,RH和HSYA配伍使用可抑制肾脏组织的氧化损伤,抑制肾小球炎细胞浸润,降低细胞凋亡,且效果好于两个药物单用。     

赖氨大黄酸对KK/HlJ糖尿病小鼠胰岛素抵抗的改善作用及其机制

目的：探讨赖氨大黄酸（RHL）对链脲佐菌素（STZ）诱导的KK/HlJ糖尿病（DM）小鼠胰岛素抵抗的改善作用,并阐明其作用机制。方法：腹腔注射STZ （50 mg·kg^-1）并给予DM专属饲料制备KK/HlJ小鼠DM模型。将48只小鼠分为正常对照组、模型组、低剂量RHL治疗组（25 mg·kg^-1）和高剂量RHL治疗组（50 mg·kg^-1）,每组12只,共治疗16周。采用葡萄糖氧化酶法检测各组小鼠空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平,HE染色观察小鼠胰腺组织形态表现,免疫组织化学法检测小鼠胰岛组织中胰岛素水平,酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠血清胰岛素、C反应蛋白（CRP）和肝脏组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）及白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测小鼠肝脏组织中糖原合成相关基因（PI3K、AKT和GSK-3β）的磷酸化表达水平。结果：与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠FBG、TG和TC水平降低（P<0.05）,胰岛素水平无明显变化（P>0.05）。与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠血清CRP水平和肝脏组织中TNF-α和IL-6水平降低（P<0.01）。HE染色,与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠胰岛形态有一定恢复,偶见炎症浸润;免疫组织化学染色,与模型组比较,低剂量RHL治疗组小鼠棕色颗粒状物质明显减少,而高剂量RHL治疗组小鼠胰岛中未见棕色颗粒状物质。与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠糖原合成相关基因PI3K、AKT和GST-3β磷酸化表达水平升高（P<0.01）。结论：RHL对STZ所致KK/HlJ DM小鼠胰岛素抵抗有改善作用,其机制可能与RHL促进糖原合成有关。     

大黄及其蒽醌对自身免疫性疾病治疗的研究进展

大黄始载于《神农本草经》,药理活性广泛.自身免疫性疾病是一类因机体免疫耐受功能受损而致免疫细胞及其成分对自身组织结构和功能破坏的疾病,包括动脉粥样硬化、多发性硬化、痛风、类风湿性关节炎、自身免疫性甲状腺炎、溃疡性结肠炎、1型糖尿病、IgA肾病等.近年临床和实验研究显示,大黄及其蒽醌类成分对自身免疫性疾病具有良好的治疗潜...     

赖氨大黄酸和紫杉醇对肺癌细胞增殖的抑制作用和凋亡诱导作用

目的:研究赖氨大黄酸（RHL）、紫杉醇单独和两者联合对人肺癌H460细胞增殖和凋亡的影响,阐明其作用机制。方法:选取处于对数生长期肺癌细胞株H460,随机分为对照组(不加药物)、紫杉醇组(1 μmol•L^-1紫杉醇)、RHL组(100 μmol•L^-1 RHL)和紫杉醇联合RHL组,并设空白组。采用MTT法和流式细胞术分别检测各组处理后48 h的细胞增殖率和凋亡率;采用Western blotting 方法检测凋亡相关蛋白和MEK/ERK蛋白的表达水平。结果:细胞培养48 h后,联合用药组细胞增殖率显著低于对照组、紫杉醇组和RHL组 (P<0.05),联合用药组细胞凋亡率显著高于对照组、紫杉醇组和RHL组(P<0.05),联合用药组caspase-3和poly ADP-ribose polymerase (PARP)的切割片段蛋白表达强度明显高于对照组、紫杉醇组和RHL组,联合用药组Bcl-2和NF-κB蛋白表达强度明显低于对照组、紫杉醇组和RHL组,同时RHL组紫杉醇上调的MEK和ERK蛋白磷酸化强度降低。结论:紫杉醇和RHL均可抑制肺癌H460细胞增殖,诱导细胞凋亡;RHL通过降低ERK活性、上调caspase-3和PARP的切割片段蛋白表达,增强紫杉醇抑制肺癌细胞增殖和凋亡诱导作用。     

赖氨大黄酸抑制HER2信号通路对肺癌H460细胞的凋亡诱导作用

目的: 研究赖氨大黄酸（RHL）对肺癌H460细胞增殖、凋亡的影响及人类表皮生长因子受体2（HER2）信号通路在其中的作用,为RHL抗肺癌的临床实验研究提供依据。方法: 选取HER2高表达并处于对数生长期的H460细胞,随机分为空白对照组和25、50、75、100、125、150 μmol•L^-1 RHL组,采用MTT法检测各组细胞增殖活性。H460细胞随机分为空白对照组及50、100、150 μmol•L^-1 RHL组,流式细胞术检测各组细胞48 h凋亡情况,Western blotting法检测各组细胞48 h后凋亡相关蛋白和HER2信号通路蛋白的表达。结果: 细胞培养48 h后,不同浓度RHL组H460细胞存活率显著低于空白对照组(P<0.05),细胞凋亡率显著高于空白对照组(P<0.05),RHL的增殖抑制作用和凋亡诱导作用呈剂量依赖性。不同浓度RHL组H460细胞Caspase-3、Caspase-7和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶 (PARP)的切割片段蛋白表达明显高于空白对照组 (P<0.05), HER2、AKT蛋白磷酸化水平和NF-κB蛋白的表达水平明显低于空白对照组(P<0.05)。结论: RHL可能通过抑制HER2/AKT/NF-κB信号通路诱导H460细胞凋亡。