三黄泻心汤煎煮过程中13种指标成分动态变化与分布规律研究

目的 建立经典名方三黄泻心汤（Sanhuang Xiexin Decoction,SXD）中13种指标成分（表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚）的含量同时测定方法,探索SXD煎煮过程中成分动态变化和分布规律,揭示SXD复合分散体系的制剂特征。方法 按照SXD传统煎煮方法制备煎液,建立样品中13种指标成分的含量同时测定方法,检测各指标成分在汤剂、离心上清液、离心沉积物中的含量;进一步地,分别制备浸泡结束、刚沸腾以及煎煮不同时间后的样品进行测定,绘制SXD煎煮过程中13种指标成分动态变化和分布规律图,分析煎煮过程中各成分在汤剂、离心上清液和离心沉积物中的含量变化情况。结果 SXD煎液中,含量最高的指标成分为黄芩苷（15.496 mg/g）,其次为小檗碱（3.048 mg/g）,含量最低的指标成分为大黄素甲醚（0.046 mg/g）;离心沉积物中黄连碱、小檗碱含量分别为离心上清液的4.13、3.44倍,离心上清液中黄芩苷、汉黄芩苷、芦荟大黄素含量分别为离心沉积物的2.04、2.76、1.33倍;煎煮过程中,自浸...     

多元回归分析大黄不同炮制品中蒽醌与抑菌活性相关性

目的:采用多元回归分析不同大黄炮制品蒽醌含量和大黄抑菌能力之间的相互关系。方法:采用HPLC法建立大黄中蒽醌的指纹图谱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长为254 nm。通过大黄不同炮制样品对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑制效果来评价其抑菌活性,采用主成分、多元线性回归分析大黄不同蒽醌与抑菌效力的关系。结果:建立大黄不同炮制品的HPLC指纹图谱;大黄蒽醌成分中芦荟大黄素和大黄酸在大黄抑菌中起主要作用,抑菌关联度均达到了90%以上。结论:大黄蒽醌成分与其抑菌效能存在显著相关性,其中芦荟大黄素和大黄酸起到主要作用。     

转化生长因子β及大黄酸对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白功能的影响(英文)

目的:对人肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白-1(GLUT1)进行鉴定。研究转化生长因子(TDF-β_1)对GLUT1表达和功能的影响及大黄酸的干预作用。方法:分别用RT-PCR、免疫荧光染色、流式细胞仪、Northern杂交和[~3H]-2脱氧葡萄糖摄入率对系膜细胞GLUT1 mRNA表达、蛋白质分布和功能进行了研究。观察不同浓度TGF-β_1在加或不加大黄酸的情况下对系膜细胞葡萄糖摄入以及GLUT1 mRNA表达的影响。结果:研究发现人类肾小球系膜细胞上存在功能性的GLUT1。TGF-β_1能上调系膜细胞GLUT1 mRNA的表达和增加系膜细胞葡萄糖摄入率。大黄酸对正常糖浓度培养条件下系膜细胞葡萄糖摄入无影响,但能明显抑制TGF-β_1增加系膜细胞GLUT1 mRNA表达和葡萄糖摄入的作用。结论:TGF-β_1增加人肾小球系膜细胞GLUT1 mRNA的表达和细胞葡萄糖的摄入,该作用能够明显地被大黄酸所拮抗。     

大黄酸诱导肿瘤细胞凋亡及与丝裂霉素的协同作用

目的研究大黄酸(rhein)诱导肿瘤细胞凋亡及与丝裂霉素(MMC)的协同作用。方法采用流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和荧光显微镜观察,［³H］-胸苷转运和参入测定,MTT法检测。结果大黄酸可诱导KB细胞凋亡,出现sub-G1峰与DNA梯形条带。大黄酸与MMC合用能明显提高KB细胞凋亡率。大黄酸可抑制KB细胞核苷转运和DNA合成。大黄酸对KB,BEL-7402和MCF-7细胞有一定的增殖抑制作用,并且与MMC合用对3种细胞均有显著协同作用。结论大黄酸可能作为生化调节剂应用于肿瘤联合化疗。     

大黄游离蒽醌的制备与纯化

从中药大黄中提取总蒽醌（结合和游离２类）,经水解后用水化学试剂或大孔树脂制备总游离蒽醌（含大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚）,进一步纯化得大黄酸和大黄素。     

大黄酸治疗对db/db小鼠第1相胰岛素分泌的影响

目的:通过db/db小鼠先天性2型糖尿病动物模型,探讨大黄酸对胰岛β细胞第1相胰岛素分泌功能的影响。方法:20只4周龄db/db雄性小鼠,随机分成治疗组和对照组,每组10只。另取10只db/m雄性小鼠作为非糖尿病正常对照。治疗组每日固定时间给予大黄酸120 mg.kg-1灌胃,db/db对照组和db/m对照组均给予相同体积的1%纤维素钠,连续给药8周,测定给药前后小鼠体重和空腹血糖,并于给药结束后分离胰岛,建立离体胰岛灌流系统,开始2.8 mmol.L-1KRB0.5 mL.h-1速度灌流1 h,后换为16.7 mmol.L-1KRB 1 mL.h-1灌流,在-30,-20,-10,0,1/3,2/3,1,4/3,5/3,2,3,4,5,6,7,8,9,10,15,20,30 min时分别收集灌流出的液体,-80℃保存后测定胰岛素。结果:db/db大黄酸治疗组和对照组相比,空腹血糖明显下降。db/db对照组小鼠的离体胰岛第1相胰岛素分泌明显受损,而db/db大黄酸治疗组小鼠离体胰岛在高糖刺激后立即出现明显的第1相胰岛素分泌高峰,较db/db明显好转。结论:早期大黄酸治疗可以明显改善db/db小鼠的葡萄糖耐量,恢复第1相胰岛素分泌功能,保护胰岛功能。     

何首乌主要成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷对肝细胞、肝癌细胞的影响

目的通过观察何首乌主要成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷对肝细胞、肝癌细胞的影响来探讨引发何首乌不良反应的物质基础,为规范中药合理应用提供理论依据。方法用MTT法观察何首乌主要有效成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷在不同浓度下作用不同时间对肝细胞和肝癌细胞的影响。结果蒽醌类化合物大黄素、大黄酸在终浓度6.25~50μmol/L,随着浓度的增加、作用时间的延长对L-02细胞和BEL细胞的损伤加大、抑制率增加;二苯乙烯苷在终浓度5~400μmol/L,随着浓度的增加、作用时间的延长对L-02细胞和BEL细胞的影响不明显,无显著性差异。结论大黄素、大黄酸是何首乌引发不良反应—肝毒性的主要成分,在高浓度、长时间作用下有细胞毒作用,二苯乙烯苷在5~400μmol/L作用不同时间对肝细胞和肝癌细胞的影响不明显,无细胞毒作用。     

HPLC测定大黄通气口服液中大黄酸、大黄素及大黄酚的含量

目的:建立大黄通气口服液中大黄酸、大黄素及大黄酚的HPLC含量测定方法。方法:采用Inertsil ODS-SP(4.6mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相甲醇-0.1%磷酸(72∶28),柱温25℃,检测波长440 nm,流速1.0 mL·min-1。结果:测定大黄酸、大黄素及大黄酚的线性范围分别为4.2～50.4(r=0.999 9),3.9～46.8,(r=0.999 7),4.2～50.4 mg·L-1(r=0.999 9);平均回收率(n=5)为大黄酸97.68%,RSD 1.09%,大黄素97.36%,RSD 59%,大黄酚97.27%,RSD 0.97%。结论:方法简便、结果准确、重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

基于网络药理学的夏黄颗粒治疗阿片类药物所致便秘的作用机制研究

目的 探索夏黄颗粒治疗阿片类药物所致便秘的潜在作用机制。方法 在TCMSP数据库中查找夏黄颗粒的各药材成分和靶点信息，在Genecards数据库中以“opiod constipation”“opioid-induced bowel dysfunction”“opioid-induced constipation”为关键词搜索阿片类药物所致便秘相关靶点，与夏黄颗粒活性靶点映射筛选出共同靶点作为研究靶点；将共同靶点导入STRING数据库中构建靶点相互作用网络图，利用Cytoscape 3.3.0软件进行可视化处理，筛选出核心靶点；借助OmicsBean分析平台与STRING数据库对靶点进行基因本体论（GO）功能和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果 通过筛选得到夏黄颗粒化学成分55个，候选靶基因158个，Venny映射后的共同靶点86个，对应化学成分49个，核心靶点12个，主要化学成分19个。GO功能富集分析得到生物过程条目4 150个，涉及化学刺激性细胞反应、化学反应、生物质量调控等过程；细胞组成条目302个，涉及体元投射、细胞外间隙、全膜等过程；分子功能条目459个，涉及蛋白结合、分子转导活性、酶结合等过程。KEGG富集分析得到与夏黄颗粒作用相关的信号通路149条，涉及糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、肿瘤坏死因子信号通路等；构建了夏黄颗粒核心靶点的“药材-成分-靶点-通路”网络。结论 夏黄颗粒中主要化学成分柚皮素、川陈皮素、芦荟大黄素、大黄酸等可能通过作用于TNF、MAPK3、IL-6、VEGFA、PTGS2等关键蛋白，调节内分泌抵抗、肿瘤坏死因子信号通路等信号通路，发挥通便、解痉、促进胃肠运动等作用，为夏黄颗粒治疗阿片类药物所致便秘提供理论依据，同时与夏黄颗粒药效初步验证结果相吻合。     

大黄中4种蒽醌类化合物抑幽门螺杆菌效果比较

 目的:对4种大黄蒽醌化合物抑制幽门螺杆菌( Helicobacter pylori )进行实验研究。方法:用梯度碱提取法，将大黄中的4种蒽醌类化合物提取，然后用试管稀释法和纸片扩散法，分别观察其对幽门螺杆菌的抑菌效果。结果:4种大黄蒽醌，最低抑菌浓度及抑制幽门螺杆菌环分别为:大黄素(emodin) 0.40μg· ml^{-1(30mm,强)、大黄酸(rhein)0.60μg·ml-1(28mm,强)、大黄酚(chrysophanol ) 0.78μg·ml-1(24mm,强)、芦荟大黄素(aloe-emodin)0.85μg·ml-1(23mm,强)。衬照品大黄提取物(Rheum officinale extracts)仅为17.24μg·ml-1(15mm，中)。空白对照为灭菌注射用水，无抑菌环，幽门螺杆菌生长正常。结论:4种大黄蒽醌类化合物对幽门螺杆菌均有较强的抑制生长作用。}