趋化性细胞因子及其受体与类风湿性关节炎

趋化性细胞因子主要介导炎症性细胞向损伤处的迁移。类风湿性关节炎 (RA )是以Th1型细胞浸润为主的慢性炎症性疾病 ,在RA的滑膜组织及关节腔滑液中含有大量的趋化性细胞因子 ,趋化性细胞因子受体则在T细胞、单核细胞及中性粒细胞等细胞上高表达。趋化性细胞因子与其受体间的相互作用在RA的致病机制中起着重要的作用。基于此 ,众多抗趋化性细胞因子或抗趋化性细胞因子受体的研究已经开展 ,这也为RA的治疗开辟了新的途径     

中国版纳猪MHCI类P1分子全长的原核表达与纯化

目的：获得原核表达的中国版纳猪ＳＬＡＩ类Ｐ１蛋白质分子。方法：ＰＣＲ扩增去信号肽的ＳＬＡＩ类Ｐ１ｃＤＮＡ序列，亚克隆至ｐＧＥＭＴ载体，测序。将亚克隆的Ｐ１　ｃＤＮＡ片段插入表达载体ｐＥＴ４２ｂ（＋），构建重组表达质粒ｐＥＴ－４２ｂ（＋）／ｓｌａ－ｐｌ，转化Ｅ·ｃｏｌｉ表达菌 ＢＬ２１－ＣｏｄｏｎＰｌｕｓ（ＤＥ３）－ＲＩＬ，ＩＰＴＧ诱导 Ｐ１－８ ｘ ｈｉｓ融合蛋白表达，经包涵体洗涤，８ ｍｏｌ／Ｌ尿素变性溶解，Ｎｉ２＋亲和层析，梯度透析后，定量保存。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ鉴定目的蛋白的表达与纯化。结果：目的蛋白（分子量３９．５ ｋＤ）表达量占细菌总蛋白 １５％，每升表达菌获得纯度９５％的目的蛋白 ４０ ｍｇ～６０ｍｇ。结论：成功建立猪 ＳＬＡ分子全长原核表达、纯化体系，为建立间接识别猪移植抗原ＳＬＡＩ类分子的人Ｔ细胞系及表位分析打下基础。     

可溶性TRAIL重组蛋白治疗CIA实验研究

用sTRAIL重组蛋白治疗CIA模型 ,探讨sTRAIL用于自身免疫病治疗的可能性。将鸡肋骨II型胶原蛋白注射大鼠 ,建立了RA的动物模型———胶原诱导性关节炎 ,自制的可溶性TRAIL蛋白治疗CIA ,观察治疗后关节炎指数与血清中炎性细胞因子的变化。结果是sTRAIL 30 0ng/只 (0 1ml/次 )局部应用于关节炎部位 ,皮下注射 1周以后 ,sTRAIL应用的大鼠症状较对照组指数评分稍有下降 ;患病大鼠较正常大鼠IFN γ和TNF α表达量增加 ,而经过sTRAIL治疗后两者表达量都有显著下降 (P <0 0 5 )。提示sTRAIL局部应用后可缓解关节炎的局部炎症 ,可能是通过抑制激活的淋巴细胞 ,减少炎症细胞因子的分泌量和对炎症细胞的趋化而起作用     

类风湿性关节炎患者关节滑膜液浸润的T细胞表达特性

目的 :为研究类风湿性关节炎 (RA)患者关节滑膜液浸润的淋巴细胞介导自身免疫病的特性 ,分析了 2 2例RA患者滑膜液中淋巴细胞的免疫表型、对II型胶原的反应频率及IL 10、IL 12的分泌格局。方法 :用流式细胞术分别测定滑膜液和外周血淋巴细胞表型 ,并采用国际标准半有限稀释法分析了关节滑膜液中浸润的淋巴细胞对II型胶原 (CII)的反应频率 ,同时用ELISA方法检测了滑膜液与外周血中IL 10与IL 12含量。结果 :滑膜液中的T淋巴细胞的表型分别为CD4 (39 6 %±10 5 % )和CD8细胞 (36 4 %± 16 4 % ) ,CD4 CD8细胞比值显著低于外周血 ,且同时表达CD16和CD5 6的活化NK细胞占15 5 %± 11 1%。T细胞受体谱取用表明仍以αβTCR为主 (6 9 6 %± 15 7% )。有意义的是 :滑膜液中的T细胞对CII的反应频率为 15 2× 10 - 6 ,远远高于外周血 (4 0× 10 - 6 )。IL 12含量为 (4 19 9± 89 2 )pg ml,IL 10含量为 (187 7± 34 5 )pg ml,与外周血中这 2种细胞因子的含量〔分别为IL 12 :(6 5 32± 34 2 )pg ml和IL 10 :(85± 12 7)pg ml〕比较 ,具有显著的统计学差异。结论 :上述实验结果表明这种具有表达特性的浸润T细胞介导了RA患者关节滑膜组织的免疫损伤。     

间充质干细胞免疫负调节机制研究进展

骨髓间充质干细胞是存在于骨髓中含量极微的一群细胞,它们通过与造血干细胞的密切接触,支持造血干细胞的分化和成熟,另外它也可以向骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞进行多向分化。近年来研究发现,骨髓间充质干细胞具有弱免疫原性以及能够抑制T、B、NK细胞和DC的功能等一系列独特的免疫学特点,有望在将来利用骨髓间充质干细胞进行免疫介导疾病的治疗,但是目前有关免疫机制仍然有待全面深入研究。     

免疫系统中细胞的程序性死亡：文献综述

细胞的程序性死亡是一种生理性死亡。近年来这种过程在免疫系统的发生与发展中也起着很重要的作用。影响免疫细胞程序性死亡的因素多种多样。本文简要综述了近年来在这方面的研究进展。     

ANALYSIS OF APOPTOSIS BY DNA END LABELING METHOD (TDT) IN LEUKEMIA CELL LINES HL-60 AND U937

Apoptosisisakindofcelldeathrecognizablebyaseriesofspecializedchangesinmorphological,biochemicalandmolecularbiologicalforms.Apoptosisisanactiveprocessofcelldestruction,characterizedbycellshrinkage,chromatinaggregationwitheXtensivegenomicfragmentation,crescentbodyformingbychromosomepyknosisalongthenuclearmargin.Intheapoptosis,endouncleaseasedependentCa2 andMg2 isactivated,thisenzymemakechromosomedegradedatthelinkersectionstofragmentsequivalenttosingleandmultiplenucleosomes.Thelatterarerevealeda…     

骨碎补总黄酮对胶原诱导性关节炎大鼠关节骨破坏影响的实验研究

目的:通过建立胶原诱导性关节炎(collagen inducted arthritis,CIA)大鼠模型,评价骨碎补总黄酮在抑制CIA大鼠关节骨破坏方面的作用及机制。方法:利用皮下注射牛Ⅱ型胶原诱导Wistar大鼠发病,建立CIA大鼠模型。将造模成功且炎症分值在2分及以上的大鼠进行随机分组并进行相应治疗,评价骨碎补总黄酮对关节骨破坏情况的作用。结果:治疗12周后,骨碎补总黄酮组、骨碎补总黄酮加1/2依那西普组、依那西普组骨小梁面积百分数及骨小梁数量均明显高于灭菌用水组(P<0.05);骨小梁分离度明显小于灭菌用水组(P<0.05)。结论:骨碎补总黄酮能明显抑制CIA大鼠炎症关节骨破坏,其作用可能与骨小梁数量减少及骨小梁分离度的增大相关。     

不同实验室方法在肺结核辅助诊断中的应用评价

目的评价不同实验室方法在肺结核(PTB)诊断中的应用效能,为PTB的早期诊断提供数据参考。方法 2016年1月至2018年12月在上海市同仁医院肺科门诊诊治的298例疑似PTB患者,依照临床诊断,分为活动性肺结核组138例、非活动性肺结核组43例、非肺结核组117例。对其痰标本分别采用痰涂片快速抗酸染色、MGIT培养、Xpert MTB/RIF分子检测,采用卡方检验比较其敏感性、特异性。结果 3种方法在区分活动性肺结核组与非活动性肺结核合并非肺结核组上具有一定的意义(χ~2值分别为89.08,138.94,137.12,P均0.01),非活动性肺结核组与非肺结核组的阳性率之间差异无统计学意义。痰涂片、MGIT培养、Xpert MTB/RIF和3种方法联合检测诊断活动性肺结核的敏感性分别为45.7%(63/138)、63.8%(88/138)、65.4%(87/133)和78.2%(104/133),MGIT培养和Xpert MTB/RIF敏感性高于痰涂片(χ~2值分别为35.79和11.26,P均0.01),MGIT培养和Xpert MTB/RIF的敏感性差异无统计学意义(χ~2=29.87,P0.05),联合检测敏感性高于3种方法单独检测(χ~2值分别为30.84,64.62,70.14,P均0.01);诊断特异性分别为99.1%(116/117)、98.3%(115/116)、99.1%(113/114)和97.3%(110/113),3种方法的特异性差异无统计学意义。结论 MGIT培养与Xpert MTB/RIF对PTB检测具有较高的敏感性,3种方法联合检测可提高敏感性。     

黄芪对糖尿病大鼠肾组织血管生成素受体Tie-2表达的作用

目的:探讨血管生成素受体Tie-2在糖尿病大鼠肾组织中的表达以及黄芪对其影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和黄芪治疗组。8周后处死大鼠,采用实时定量聚合酶链反应和免疫组化法分别检测3组大鼠肾组织中Tie-2基因和蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠肾组织Tie-2蛋白表达显著升高(P<0.01);黄芪治疗组大鼠肾组织Tie-2蛋白表达较糖尿病组显著下调(P<0.01)。结论:黄芪通过下调糖尿病大鼠肾组织Tie-2的表达而发挥肾保护作用是其治疗糖尿病肾病的作用机制之一。