TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型的建立

目的 建立TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型.方法 构建pEGFP-TNNT3(R69H)转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pEGFP-TNNT3(R69H)注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠.用PCR和Southern blot方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过RT-PCR及Western blot的方法检测TNNT3基因表达.结果 8只假孕小鼠共移植注射后的胚胎82枚,出生40只子代鼠,经PCR和Southern方法检测得到5只转基因阳性小鼠.对其子代小鼠进行RT-PCR、Western blot检测结果显示,TNNT3在转基因小鼠心脏和骨骼肌中表达量明显增多.结论 通过显微注射法使外源基因pEGFP-TNNT3(R69H)在小鼠基因组中整合,成功建立了TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型.     

326株病原菌及药敏分析

抗生素是临床应用最广泛的一类药物,由于在市场经济的影响及医药厂商不良促销的诱导和部分低年资医生药理知识欠缺,抗生素的滥用情况时有发生,从而增大了细菌的耐药性,导致耐药菌群增多,造成人体菌群失调,免疫力下降,增加了医院感染的机会[1].     

vWF、P-选择素、SOD、MDA与心功能不全关系的研究

目的:探讨血管性血友病因子(vWF)、P-选择素、过氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)在充血性心力衰竭(CHF)中的变化特点和临床意义。方法:选择59例CHF患者用ELISA法测定vWF、P-选择素,用黄嘌呤氧化酶法测定SOD、硫代巴比妥酸法测定MDA水平并与36例正常对照组进行对比分析。结果:CHF患者组与健康组比较,vWF、P-选择素、MDA显著增加(P<0.05),SOD显著降低(P<0.001),随着心衰的加重而愈显著。结论:CHF患者存在内皮细胞损伤,血小板活化和氧自由基代谢紊乱。各项指标异常程度与CHF严重程度密切相关。     

pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M26I真核表达载体构建及其在NIH3T3细胞中表达

目的 构建pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1M26I重组表达载体,为进一步研究DJ-1M26I基因的功能及建立转基因动物模型奠定基础.方法 采用突变试剂盒将第26位氨基酸进行突变,分别构建pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1M26I重组表达载体,采用脂质体转染的方法分别将pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1M26I质粒转染NIH3T3细胞并用G418压力筛选稳定克隆,对获得的2种转染细胞在DNA水平、转录水平和蛋白质水平鉴定.结果 pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1 M26I质粒转染NIH3T3细胞经G418筛选后,经PCR检测分别获得1个和3个阳性细胞克隆,RT-PCR及western blot方法进行DJ-1-His基因表达检测,结果均证明外源插入基因的表达,MTT实验结果初步证明转染DJ-1 M26I基因的NIH3T3阳性细胞组增殖速率低于正常NIH3T3细胞组(P＜0.05).结论 成功构建pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1 M26I重组表达质载体.     

益母草注射液配合卡孕栓预防产后出血的应用与护理观察

目的：观察益母草注射液配合卡孕栓应用于防治剖宫产产后出血的临床效果,探讨其应用价值与观察护理措施。方法：选择我院产科2014年9月起正常足月妊娠因有医学指征和/或社会因素需要行剖宫产的120例分娩产妇为研究对象,随机分两组,每组60例,观察组使用益母草注射液配合卡孕栓,对照组仅使用益母草注射液,观察两组患者术中及产后24h的出血量、用药前后血压变化及不良反应。结果：观察组产后出血量较对照组明显减少 (P﹤0.05);两组给药前后无血压升高,收缩压及舒张压差异无统计学意义(P﹥0.05);观察组用药后不良反应发生率高于对照组 (P﹤0.05)。结论：益母草注射液配合卡孕栓防治剖宫产产后出血是一种简便、安全、有效的方法,值得临床推广,但其不良反应应予重视。     

β-连环蛋白在结肠癌细胞及肿瘤球细胞中的表达

目的：研究信号通路β-连环蛋白在人结肠癌ccl187细胞及其肿瘤球细胞中的表达状况。方法：培养ccl187细胞及其肿瘤球,分别提取ccl187细胞和肿瘤球细胞的总RNA,应用半定量RT-PCR和Westernblot方法分别检测β-连环蛋白在ccl187细胞及其肿瘤球中的mRNA水平及蛋白水平的表达。结果：半定量RT-PCR结果显示ccl187细胞和肿瘤球细胞中β-连环蛋白转录水平分别为41.6%和42.6%（P〉0.05）。半定量Western blot结果显示ccl187细胞和肿瘤球细胞中β-连环蛋白的含量分别为36.7%和73.4%（P〈0.05）。结论：信号通路β-连环蛋白在人结肠癌ccl187细胞及其肿瘤球细胞中转录水平基本一致,但肿瘤球细胞中β-连环蛋白被积累,含量显著高于ccl187细胞。     

加拿大卫生改革现状、发展趋势及其对我国的启示

全民医疗保健制度是加拿大卫生体系乃至社会政策的核心,经济起伏下的筹资增减深刻影响到加拿大近二十年卫生发展历程,以公平、公正为基本价值观,构建低成本高效益卫生服务体系,为全民及时提供高质量卫生服务是加拿大卫生改革发展的基本趋势。本文介绍了上世纪后十年和本世纪初十年两阶段的加拿大卫生改革的背景、现状、特征、主题、内容、影响、经验和教训,并从公平、效率和长期性三方面阐述了对我国卫生改革发展的启示。     

利用秀丽线虫进行纳米材料安全性评价研究进展

鉴于纳米材料易于进入生物体内且已经进入生活环境,有关其生物安全性及相应毒理学研究日益受到关注〔1-2〕。有关纳米材料环境暴露的致生物毒性,利用各种离体(in vitro)与在体(in vivo)生物体系已经证明了环境暴露确实存在安全     

溶血标本在ELISA一步法和二步法中对HBVM测定结果的影响

目的通过实验观察溶血标本在酶联免疫吸附试验（ELISA）一步法和二步法中对乙型肝炎两对半（HBVM）检测结果的影响。方法用80例健康人（HBVM均为阴性）的血液标本,人为造成不同程度溶血,用ELISA一步法和二步法同时检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒e抗体（抗-HBe）、乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBe）,通过对检测结果的观察来分析溶血对检测结果的干扰程度。结果当溶血程度大于或等于10g／L时,ELISA一步法40％以上的标本0D值均大于临界值,差异有统计学意义（P〈0．01）;ELISA二步法仅为3％,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论当溶血程度大于或等于10g／L对ELISA一步法检测HBVM的结果有干扰,可造成临界假阳性;ELISA二步法干扰不明显,无统计学意义。     

2150例受血者梅毒血清学试验检测方法评价及结果分析

目的了解受血者梅毒感染状况及合理选择实验方法。方法同时用非特异性类脂质抗原试验（RPR）检测血清中反应素,酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金检测血清中特异性抗体。结果2150例受血者RPR法检出梅毒阳性78例,占总数的3.63%,78例阳性者用ELISA检测72例阳性,占总数的3.34%,胶体金法检测出74例阳性,占3.44%。结论RPR阳性率较高,但存在一定的生物学假阳性占0.28%,虽操作简便,但只能作为筛查,必须用ELISA确认。