鼠疫耶尔森氏菌分子分型方法的研究进展

鼠疫是一种流行在啮齿动物间通过跳蚤传播的自然疫源性传染病,以发病急、传播快、病死率高为特征,是我国法定的甲类传染病。历史上鼠疫曾经引起3次人间的世界大流行,给人类带来巨大的灾难,20世纪90年代以来,鼠疫发病率呈上升趋势[1]。鼠疫仍是人类面临的重要的公共卫生问题。鼠疫耶尔森氏菌(以下简称鼠疫菌)是引起鼠疫的病原菌,对鼠疫菌进行分型可以了解其在自然界的生存条件及生物学特征,     

应用3种方法检测鼠疫恢复期患者血清中F1抗体水平

目的 了解鼠疫恢复期患者血清F1抗体水平的维持情况及间接血凝、酶联免疫、胶体金免疫层析技术在鼠疫F1抗体检测中的应用。 方法 应用间接血凝试验(IHA)、双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgs-ELISA)和胶体金免疫层析试验(GⅠCA)3种方法,对比检测25例鼠疫恢复期患者血清中F1抗体。 结果 25份血清样品F1抗体IHA阳性19份,DAgs-ELISA阳性21份,GⅠCA阳性18份。F1抗体滴度:IHA 15例为1∶80~1∶320;ELISA 10例为1∶640~1∶1280。 结论 大部分鼠疫恢复期患者血清能检出F1抗体,3种F1抗体检测方法均为敏感、特异的检测技术。     

云南省鼠疫耶尔森菌多位点可变数目串联重复序列分析

目的 通过多位点可变数目串联重复序列分析(multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis,MLVA)方法,对云南省鼠疫菌株进行基因分型。 方法 采用聚合酶链反应(PCR)和毛细管电泳,通过BioNumerics软件进行处理,分析云南省158株鼠疫耶尔森菌基因型。 结果 选取鼠疫菌的14个VNTR位点,5个VNTR位点对云南省鼠疫菌具有多态性分析意义,利用这5个位点对云南菌株进行分析,云南158株鼠疫菌可分为2个群,3个簇,5个基因型,野鼠鼠疫菌属于A簇,丽江玉龙鼠疫菌属于B簇,家鼠鼠疫菌属于C簇,与传统的生态分型结果吻合。 结论 本次试验筛选的5个位点可以用于云南省鼠疫菌的分型,云南家鼠鼠疫菌、野鼠鼠疫菌及玉龙鼠疫菌分属不同的基因簇,玉龙鼠疫菌与野鼠鼠疫菌同属一个群,聚类结果与实际的地理相关性很好。     

云南省保山市蚊虫中检测到基因Ⅰ型流行性乙型脑炎病毒

目的 调查云南省保山市蚊虫及其自然感染虫媒病毒状况，为蚊媒病毒病防控提供参考依据。方法 2015年9月采用诱蚊灯法在保山市隆阳区农村人房和畜圈采集蚊虫标本，反转录聚合酶链反应（RT-PCR）用于检测蚊虫标本中黄病毒属、甲病毒属、布尼亚病毒属和流行性乙型脑炎病毒（乙脑病毒）等相关病毒核酸，阳性者进行C/prM基因序列测定、同源性和系统进化分析。结果 共捕获蚊虫3种8 202只，三带喙库蚊（Culex tritaeniorhynchus）、中华按蚊（Anopheles sinensis）和骚扰阿蚊（Armigeres subalbatus）构成比依次为88.50%（7 259只）、11.43%（937只）和0.07%（6只）。蚊虫标本分30批进行RT-PCR检测，14批三带喙库蚊中检测到乙脑病毒核酸，并获得14株乙脑病毒C/prM基因核苷酸序列。同源性和进化分析表明，14株乙脑病毒与基因Ⅰ型乙脑病毒同在一个进化分支，并与2007年保山市腾冲县和2010年德宏傣族景颇族自治州（芒市和瑞丽市）的基因Ⅰ型乙脑病毒具有较近的进化关系。结论 三带喙库蚊为保山市的优势蚊种和乙脑病毒主要传播媒介，当地存在基因Ⅰ型乙脑病毒流行，此为近10年保山市首次检测到基因Ⅰ型乙脑病毒。     

云南香格里拉县不同生境小型兽类群落多样性特征

目的研究香格里拉县小型兽类动物群落结构及多样性特征。方法用群落生态学方法计算群落结构、多样性和相似性指数。结果2011年6～7月,在该地区4类不同生态环境中,捕获小型兽类425只,包括4目7科14属21种;多样性分析结果表明,4种不同生境的Shannon．Winner多样性指数0．3857～1．9537,Pielou均匀度指数0．5564～0．7862,Simpson优势度指数O．1809—0．7743,Margalef丰富度指数0．0501。2．3938;Whittaker群落相似性指数显示,林区与农耕地生境小兽群落相似性相对较高,居民区和高山灌丛草甸小兽群落完全不同。结论香格里拉县小型兽类群落物种组成和多样性因生境条件的差异而不同,多样性以林区生境最高,高山灌丛草甸次之,农耕地及居民区较低。     

云南省自然感染鼠疫菌宿主动物的研究

目的 分析云南省鼠疫疫源地自然感染鼠疫的宿主动物的分布规律.方法 整理核实1954～2006年间云南省地方病防治所有关鼠疫监测资料,并通过SPSS13.0统计软件进行处理和分析.结果 家鼠鼠疫疫源地自然感染鼠疫动物有黄胸鼠、褐家鼠等17种和亚种,其中黄胸鼠为该疫源地的主要宿主;野鼠鼠疫疫源地自然感染鼠疫的动物有齐氏姬鼠、大绒鼠等27种,其中齐氏姬鼠和大绒鼠为该疫源地的主要宿主.结论 由于两块疫源地自然环境、宿主媒介、动物活动等差异和联系,形成染疫动物既有区别又相互交错的格局,两块疫源地分别具有相对独立的鼠疫流行规律.     

应用双抗体夹心ELISA定量检测鼠疫F1单克隆抗体IgG含量

目的建立一种用于定量检测鼠疫单克隆抗体样品中IgG含量的方法 ,以更好地指导杂交瘤细胞的筛选和抗体的生产、纯化。方法采用羊抗鼠IgG为包被抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG为标记抗体,纯化鼠IgG作参考品,制作标准曲线,测定未知样品中的IgG含量。结果该方法与BCA蛋白浓度测定法测得的结果基本一致,且重复性好,特异性强,灵敏度高。结论双抗体夹心ELISA法可用于测定鼠疫F1单克隆抗体样品中的IgG含量。     

云南省野鼠鼠疫现状及疫源地毗邻关系研究

收集整理近30a的鼠疫监测资料信息,运用描述流行病学方法,分析野鼠鼠疫疫源地,特别是玉龙鼠疫的发现、证实及其流行态势．结果发现玉龙存在野鼠鼠疫疫源地,目前正处于活跃时期,疫源地范围尚不清楚,由于疫区距中心城市较近,其潜在危害较大．玉龙鼠疫与剑川齐氏姬鼠、大绒鼠鼠疫可能同属一种类型的野鼠鼠疫自然疫源地,我省滇西北高海拔地区,尤其是有齐氏姬鼠、大绒鼠、喜马拉雅旱獭栖息的一些地带可能存在有鼠疫的活动．从鼠疫菌某些生物学特征看,玉龙鼠疫菌株能酵解甘油、麦芽糖、阿胶糖,不酵解鼠李糖、密二糖,脱氮阴性,与青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地分离的菌株相似,提示玉龙鼠疫有可能渊源于青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫,可能是青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫沿横断山脉向南扩散的一种过渡型．这一研究发现将为进一步研究我国鼠疫遗传与进化提供一新的思路．     

我国鼠疫血清学诊断方法的应用和研究进展

鼠疫是一种自然疫源性传染病,其特点是发病急、传播快、病死率高,主要通过跳蚤叮咬从染疫动物传播到人,还可通过空气飞沫在人与人之间传播。20世纪70年代初,鼠疫血清学诊断方法开始在我国推广使用,因为其快速、简便、特异、灵敏等特点,现在已经得到了广泛应用。鼠疫的血清学诊断方法在我国人间鼠疫的监测、动物鼠疫的监测、鼠疫自     

滇西纵谷野鼠鼠疫疫源地人群鼠疫F1抗体调查

目的 了解云南野鼠VNUNUMC 疫源地人群鼠疫F1抗体的水平和分布情况.方法 采集野鼠疫源地剑川县石龙村、长乐村的高危人群血清279份,同时采集5个县的非疫区人群血清235份作为对照,采用间接血凝试验进行检测,阳性判定标准为血清滴度≥1:20.结果 剑川县疫区高危人群检出鼠疫F1抗体阳性血清34份,阳性率为12.19%,其中2份为隐性感染,1份鼠疫历史病人血清滴度高达1:640,鼠疫非疫区健康人群血清皆为阴性.结论 此次野鼠鼠疫疫源地人群鼠疫F1抗体调查所检出的血清阳性滴度,可认为是主要由反复接种疫苗形成,但是也发现了少数未接种疫苗的血清阳性者,所以不可忽视该疫源地对人类的威胁,应加大监测和防护力度.