DNA聚合酶θ对乳腺癌细胞株MCF-7放射敏感性的影响

目的 观察DNA聚合酶θ(POLQ)对人类乳腺癌细胞株MCF-7放射敏感性的影响.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法检测siRNA转染前后POLQ表达率的变化;利用噻唑蓝(MTT)比色法、平板克隆形成实验、流式细胞术对不同实验组进行分析.结果 POLQ-siRNA组细胞POLQ mRNA和POLQ蛋白表达量分别是空白对照组的(12.16±0.56)％和(32.01±0.65)％ (P＜0.01).转染后72 h,POLQ-siRNA组、空白对照组细胞吸光度(A)值分别为(0.76±0.02)和(0.81 ±0.02),POLQ-siRNA 组细胞增殖能力明显低于空白对照组(P＜0.01);平板克隆形成实验分析结果显示POLQ-siRNA组放射增敏比(SER)为1.24(＞1),表明转染POLQ-siRNA后MCF-7细胞放射敏感性显著增强.结论 抑制POLQ表达可以显著提高MCF-7细胞对放射的敏感性.     

PTEN与VEGF在乳腺癌中的表达及其意义

目的探讨抑癌基因PTEN蛋白在人乳腺癌中的表达情况及其与VEGF表达的相关性。方法应用免疫组织化学染色S—P法。检测44例乳腺癌组织和10例乳腺纤维瘤石蜡切片中PTEN蛋白、VEGF蛋白的表达情况，比较PTEN蛋白表达与VEGF蛋白表达的相关性及二者与临床病理指标的关系。结果PTEN蛋白表达定位于细胞质，乳腺癌组织PTEN蛋白表达阴性者占47．7％（21／44），表达阳性者占52．3％（23／44）。PTEN在乳腺癌腋淋巴结是否转移（P〈0．01）或ER状态（P〈0．05）组间比较有统计学意义。PTEN与VEGF蛋白表达呈副相关，但差异不显著（rH=-0．236P=0．122）。结论PTEN对乳腺癌预后判定有一定价值，乳腺癌患者PTEN蛋白低表达与预后不良有关。VEGF可能是PTEN的主要下游基因，二者对乳腺癌发生发展起重要作用。     

凋亡抑制蛋白Survivin在结直肠癌预后评估中的价值

目的：探讨结直肠癌组织中凋亡抑制因子Survivin的表达及其与各病理因素的关系，评价Survivin在结直肠癌预后判断中的价值。方法：应用组织芯片结合免疫组织化学链霉亲和素一过氧化物酶复合物法(strept-avidlnbiotin complex，SABC)，检测126例早期结直肠癌组织中Survivin的表达情况，回顾性分析Survivin与各临床病理因素及预后之间的关系。根据免疫组化染色强度和分级结果，所有病例被分为Survivin高表达组和低表达组。Survivin高表达组和低表达组的生存率用Kaplan．Meier方法评估，并用log-rank test进行比较，多因素生存分析用Cox模型。结果：Survivin高表达组有26例(20．6％，26／126)，低表达组有100例(79．4％，100／126)。两组之间生存率差异有显著性意义(r=13．26，P&;lt;0．01)。多因素分析结果显示，在潜在的预后因素中(年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、组织学类型、淋巴是否转移、Dukes分期、Survivin表达)，Survivin表达和Dukes分期被认为是结直肠癌根治术后独立预后因素。结论：Survivin的表达与结直肠癌的术后复发相关：结直肠癌术后复发率在Survivin高表达组明显高于Survivin低表达组，是与预后相关的独立危险因子。     

黄胸鼠体表长形病蚤的数量变动

本文汇集了１９８３－１９９４年云南保山同市坝区的调查资料，对长形病蚤指名亚种的数量变动进行分析。结果表明：长形病蚤多分布在海拔１６５０米的保山坝区在，海拔１０００米以下的盈江县和梁河县的热坝区则稀少。在连续４８个月总蚤指数和长形病蚤指数的季节变化中显示每年春季一次的单峰型；与总蚤指数的春，秋两季双峰型明显不同。     

云南省耿马县鼠疫疫源地及人间鼠疫调查报告

1990年12月11日～31日,对云南省耿马县首次鼠疫流行进行了现场调查。用血清学及细菌学方法在33个疫点(180km~2)检出了63例腺鼠疫患者和13例隐性感染者,并从人,鼠、蚤分离到49株鼠疫菌。造成鼠间鼠疫流行,主要是黄胸鼠数量及印鼠客蚤指数的急骤增高;人间鼠疫是由于鼠间鼠疫长期流行,地面游离蚤增加,人与蚤类接触频繁所致。结果表明:耿马县以勐撒镇为中心的鼠间及人间鼠疫大面积流行是一次典型的家鼠型鼠疫,其疫源地具有西南山地黄胸鼠鼠疫疫源地的特征。鼠疫在该县(至少在动物间)有可能长期存在。     

自噬基因Beclin1与乳腺癌的关系

Beclin1基因是近年来许多学者研究的热点。笔者就自噬在癌症中的作用及其调节机制,Beclin1在乳腺癌中的缺失或下调机制、自噬与乳腺癌的关系、利用自噬治疗乳腺癌的策略等方面进行综述。     

Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞后的体外实验研究

目的:探讨Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞后对MCF-7细胞的影响.方法:利用脂质体将真核表达载体pIRES2-EGFP-Noxa瞬时转染至乳腺癌MCF-7细胞.通过RT-PCR检测转染后mRNA的表达情况.MTT比色法测定细胞增殖的抑制.Hoechst 33342检测细胞的凋亡情况.结果:Noxa基因转染后在乳腺癌MCF-7细胞中成功表达,其转染后24、48、72 h后mRNA表达量逐渐增高.Noxa基因的表达使得乳腺癌MCF-7细胞出现增殖抑制,其24、48、72 h抑制率之间的差异具有显著性(P＜0.05).Hoechst 33342染色显示Noxa基因转染后细胞出现凋亡,其24、48、72 h凋亡率与阴性对照组相比,差异具有显著性(P＜0.05).结论:Noxa基因特染乳腺癌MCF-7细胞后能够抑制细胞增殖并促进其凋亡.     

相关成纤维细胞自噬调控对乳腺癌MCF-7细胞上皮间质转化影响

目的 研究报道,乳腺癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)在乳腺癌的侵袭、转移中起到促进作用,而机制未明.本研究探讨乳腺癌CAFs自噬调控对MCF-7细胞EMT进程的影响.方法 采用胶原酶消化法对CAFs及配对人乳腺癌正常成纤维细胞(NBFs)进行原代培养,采用免疫荧光和蛋白质印迹法进行鉴定;建立CAFs和NBFs与MCF-7条件培养基(CM)共培养及Transwell小室共培养模型,共分为3组进行实验,空白组即MCF-7单独培养组(CON),对照组即正常乳腺癌成纤维细胞与MCF-7共培组(NBFs),实验组即乳腺癌相关成纤维细胞与MCF-7共培养组(CAFs).Transwell侵袭及迁移实验检测各组MCF-7细胞侵袭和迁移能力.蛋白印迹法检测各组MCF-7细胞EMT上皮标志分子E-cadherin蛋白和间质标志分子N-cadherin和Vimentin蛋白表达情况;蛋白质印迹法检测CAFs与NBFs自噬相关蛋白LC3B、Beclin1和p62表达差异;自噬抑制剂3MA处理CAFs后蛋白质印迹法检测CAFs上述自噬相关蛋白表达差异;予以自噬抑制剂3MA预处理CAFs后,收集CM与MCF-7共培养,分3组进行实验,空白组即MCF-7单独培养组(CON);对照组即MCF-7与CAFs-CM共培养组(CAFs-CM);实验组即MCF-7与3MA-CAFs-CM共培养组(3MA-CAFs-CM).蛋白质印迹法检测各组MCF-7细胞EMT上皮标志分子E-cadherin蛋白和间质标志分子N-cadherin和Vimentin蛋白表达情况.结果 通过酶消化法原代培养可获取α-SMA(+)、Vimentin(+)E-cadherin(-)具有CAFs典型特征的肌成纤维细胞;Transwell侵袭、迁移实验证实CAFs可促进MCF-7细胞侵袭、迁移;蛋白质印迹法检测显示,CAFs组MCF-7 E-cadherin蛋白表达量为0.432±0.012,比NBFs组的0.585±0.02及空白组的0.659±0.016表达水平低,F=120.098,P<0.05.而CAFs组间质蛋白标志物Vimentin蛋白表达量为0.309±0.065,比NBFs组的0.103±0.011及空白组的0.062±0.009表达低,F=42.395,P均<0.05.CAFs组N-cadherin蛋白表达量为1.439±0.07比BNFs组的1.3347±0.028及空白组的1.176±0.021表达低,F=22.578,P<0.05,提示CAFs促进MCF-7发生EMT;CAFs细胞的Beclin1蛋白表达量为2.950±1.261,高于NBFs的0.862±0.727,t=-3.21,P<0.05;CAFs细胞的LC3BⅡ/LC3BⅠ灰度值比值为2.937±0.194,高于NBFs的2.314±0.224,t=-3.638,P<0.05;而CAFs p62蛋白表达量为0.342±0.093,低于NBFs的0.750±0.021,t=7.432,P<0.05,提示CAFs自噬水平高于NBFs.予以自噬抑制剂3MA处理CAFs后,处理组CAFs细胞的Beclin1蛋白表达量为0.211±0.008,低于未处理组的0.266±0.009,t=8.094,P<0.05;处理组CAFs细胞的LC3BⅡ/LC3BⅠ灰度值比值为0.496±0.004,低于未处理组的0.618±0.022,t=9.312,P<0.05;而处理组的p62蛋白表达量为0.307±0.043,高于未处理组的0.143±0.008,t=-6.471,P<0.05,说明3MA可以抑制CAFs自噬水平.自噬调控后共培养,各组E-cadherin蛋白表达有统计学意义,F=44.157,P<0.05;与对照组MCF-7细胞E-cadherin蛋白表达量1.209±0.010相比,CAFs-CM组的1.062±0.027表达下调,而3MA-CAFs-CM组MCF-7细胞E-cadherin蛋白表达量为1.104±0.019,较CAFs-CM组表达上调,均P<0.05;3组MCF-7细胞Vimentin和N-cadherin表达差异有统计学意义,P<0.05.结论 CAFs能够促进MCF-7发生EMT并增强其侵袭转移能力,而抑制CAFs自噬后,其诱导的MCF-7发生EMT进程受到抑制.     

脾切除对地中海贫血的治疗意义

地中海贫血 (地贫 )属先天性血红蛋白异常分子遗传病 ,目前仍无彻底治愈的有效方法。现就我院行脾切除手术治疗地贫 12例临床资料进行分析。临床资料一、一般情况　男 3例 ,女 9例 ,年龄 5～ 32ａ(平均 13±2 .1ａ) ,α 地中海贫血 (α 地贫 ) 6例 ,β 地中海贫血 (β 地贫 ) 6例 ,平均住院 16ｄ。二、发病情况　发病最早时间 7个月 ,最晚 14ａ(α 地贫 ) ,确诊时间最早 7个月 ,最晚 2 0ａ(α 地贫 )。三、临床表现　均自幼有乏力 ,易疲乏 ,面色萎黄 ,食欲差 ,发育迟滞。症状逐渐加重 ,以致影响学习。查体 :贫血貌 ,面色萎黄 ,地贫的特殊面…     

大肠癌细胞,癌旁粘膜与切除缘粘膜上皮细胞DNA含量与CEA表达的研究

本实验观察了26例原发大肠癌手术切除标本之癌组织、癌旁粘膜与切除缘牯膜的形态特征、CEA表达强度、细胞DNA含量之差异相互联系。结果见:CEA在癌组织中着色最强、癌旁次之、切除缘最弱。任意二组比较,P<0.005。CEA在中等分化的癌组织、分期较晚的癌组织与非整倍体癌组织中着色较强。细胞核DNA含量均数为:癌细胞组3.358±1.10(Au)、癌旁组2.356±1.07(Au)、切除缘组1.674±0.796(Au),各组比较,差异有显著性。癌旁及切除缘形态正常的粘膜可非整倍体DNA细胞。