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目的建立CR2稳定表达的HOS-CR2、HOS-CD4CR2细胞系,研究细胞中MAPKs的活化和细胞增殖变化,阐明经CR2的信号传导、CR2的表达对HIV-gp160等所致的CD4+细胞的影响.方法用哺乳动物细胞稳定转染法建立稳定表达CR2的HOS-CR2、HOS-CD4CR2细胞系,细胞经磁珠阳性纯化后,用FACS和Western blot对CR2的表达进行鉴定.用PMA、10% NHS、HIV-gp160等处理细胞后,经Western blot检测细胞的MAPKs的活化水平;用Cell Titer 96 Aqueous One Solution Reagent检测和分析处理后细胞的增殖差异.结果 FACS检测和统计学方法分析结果表明CR2表达的阳性率高达96%以上;Western blot结果显示所建HOS-CR2、HOS-CD4CR2细胞系的CR2的表达水平与Raji细胞相近;细胞经PMA、预先激活补体的10% NHS处理细胞,发现在处理10 min时ERK、JNK、P38的活化达高峰;PD98059、Wortmanin和抗-CR2能阻断ERK、JNK、P38的活化.HIV-gp160、预先激活补体的10% NHS能相应激活HOS-CR2, HOS-CD4 和HOS-CD4CR2细胞ERK、JNK、P38,这些激活均可被相应的抗体所阻断;细胞增殖实验结果显示HIV-gp160能抑制细胞增殖(P<0.01),CR2的表达能加重HIV-gp160所致的细胞增殖抑制(P<0.01).结论磁珠阳性纯化法可浓集稳定表达靶基因的细胞,提高阳性率和表达水平.刺激因素可经由CR2激活MAPKs,CR2的表达促进HIV-gp160所诱导的细胞死亡,与HIV感染所致的CD4+细胞缺损密切相关,CD4+细胞缺失机制的阐明将有助于AIDS致病机制和防治策略的研究. 相似文献
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目的:观察不同剂量长波紫外线(UVA)对人皮肤成纤维细胞增殖及诱导型一氧化氮合酶(iNOS) /一氧化氮(NO)系统的影响,探讨皮肤光老化机制。方法:用1,5,10 J/cm2 剂量UVA照射培养的人原代皮肤成纤维细胞。分别采用四唑盐比色实验(MTT法)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹以及Griess反应等技术检测UVA照射后培养不同时间(24,48和72 h)人皮肤成纤维细胞增殖情况、iNOS mRNA和蛋白表达水平及NO生成量。结果:正常人成纤维细胞在72 h之内随培养时间延长细胞存活率增加, 仅检测到低水平iNOS表达和NO生成,但在5和10 J/cm2剂量UVA照射后各时间点成纤维细胞存活数下降,iNOS mRNA/蛋白表达水平和NO生成量随着UVA剂量的增加升高,与同一时间点对照组和1 J/cm2UVA照射组相比,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),而且以各剂量UVA照射后24 h时间点细胞存活数下降、iNOS mRNA/蛋白表达水平和NO生成量增高最为明显,与同剂量UVA照射后48 h和72 h组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:UVA抑制人皮肤成纤维细胞的增殖可能与其诱导iNOS基因的表达和NO的分泌有关。 相似文献
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表皮肿瘤细胞中β-连环蛋白的分布 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:探讨β-连环蛋白在表皮肿瘤中的亚细胞分布及其意义。方法:选择Bowen病(BD)、鳞状细胞癌(SCC)和基底细胞癌(BCC)患者各20例,运用免疫组化方法观察肿瘤细胞中β-连环蛋白的表达。结果:与正常表皮相比,β-连环蛋白在BCC和SCC肿瘤细胞膜上的表达显著降低,而在SCC和BD肿瘤细胞的胞浆或胞核中的表达显著升高。结论:SCC和BD肿瘤细胞的胞浆或胞核区的β-连环蛋白的聚集可能源于β-连环蛋白基因突变,并可能在表皮肿瘤发生中发挥重要作用。 相似文献
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目的 :用纸片琼脂扩散法对湖南地区 175株淋球菌进行药物敏感性试验 ,结果显示 :淋球菌对头孢噻肟钠和头孢三嗪的敏感率分别达 94.9%和 92 .0 % ;对壮观霉素和氟嗪酸的敏感率为 82 .9%和 76 .0 %。该研究为了解湖南地区淋球菌对目前常用抗生素的敏感性及临床医生合理使用抗生素提供实验依据 相似文献
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胃肠超声随着超声学的迅速发展已被广泛应用于临床,笔者在大肠癌研究所B超室工作期间,积累了11例病例,现就B型超声对结肠癌的显像分析及临床意义报告如下。1 资料与方法 本组11例结肠癌均在超声检查后,经手术及病理证实,男9例,女2例,年龄31~75岁,平均年龄50岁,病程半月~半年,均有不同程度的腹痛、腹泻、血便、大便次数增多,里急后重、肛门坠胀、粪条变细、面色不华、消瘦及体重减轻等症状。 相似文献
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