条件培养液对脐血CD_(34)~+细胞扩增效应的实验研究

目的探讨并分析不同条件培养液对脐血CD+ 34 细胞的体外扩增效应及影响因素。方法利用 4种条件培养液 (胎儿肌肉、胎盘组织、外周血、脐血单个核细胞 )对脐血CD+ 34 细胞进行 2周的体外扩增 ,并和三细胞因子组合 :干细胞因子 (stemcellfactor ,SCF)、血小板生成素 (thrombopoietin ,TPO)、flt 3配基 (flt 3ligand ,FL) ,对脐血CD+ 3 4 细胞扩增结果进行了比较 ;利用ELISA方法检测 4种条件培养液中细胞因子 [白细胞介素 1(interleukin 1,IL 1)、白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )、FL、TPO]的浓度。结果脐血单个核细胞条件培养液及细胞因子组合对脐血CD+ 3 4 细胞均有明显的扩增效应 ,脐血组优于细胞因子组合 ;4种条件培养液中 ,脐血组细胞因子FL的含量明显高于其余条件培养液组。结论脐血条件培养液可作为体外培养扩增脐血CD+ 34 细胞有效而廉价的扩增剂 ;细胞因子FL可能是造成不同条件培养液对脐血CD+ 34 细胞体外扩增结果差异的主要因素     

卵巢癌、子宫颈癌患者红细胞免疫功能的测定

卵巢癌、子宫颈癌患者红细胞免疫功能的测定附属医院妇产科孔北华，时庆我们应用红细胞Ｃ３ｂ受体花环和免疫复合物花环测定了３１例卵巢癌和子宫颈癌患者的红细胞免疫粘附功能。３１例中卵巢癌２０例、宫颈癌１１例，２５～６０岁；对照组为健康献血员１１例，２７～６５...     

辅舒酮吸入配合小青龙汤对哮喘患者肺功能和血清白细胞介素-16水平的影响

目的：观察辅舒酮吸入配合小青龙汤对哮喘患者肺功能和血清IL-l6的影响。方法：选择中、重度哮喘发作期患者54例,随机分为3组。治疗组：辅舒酮吸入配合小青龙汤口服;辅舒酮组：单纯辅舒酮吸入;小青龙汤组：单纯口服小青龙汤。治疗前和治疗4周后测定肺通气功能FEV1和呼吸阻抗R5,用酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素-16(1L16)的水平。另选10例健康志愿者作为对照组。结果：治疗后3组患者肺通气功能FEV1均显著增加、呼吸阻抗R5均显著减少(P＜0．05或P＜0．01),但以治疗组改善最为明显(P＜0．01)。治疗前3组IL-l6水平均显著高于健康对照组(P＜0．01),治疗后各组IL-l6水平明显下降(P＜0．05或P＜0．01),以治疗组下降最为明显(P＜0．01)。血清IL-l6含量分别与FEV1、R5值呈负相关和正相关(r1＝-0．67,r2＝0．7l,P均＜0．01)。结论：辅舒酮吸入配合口服小青龙汤对哮喘患者肺功能改善和抑制血清IL-16的作用,明显优于单纯吸入辅舒酮或单纯口服小青龙汤,可成为中、重度哮喘的重要治疗手段。     

肥胖儿童载脂蛋白E遗传表型测定与血脂水平的观察

儿童单纯肥胖症多伴有明显的脂质代谢紊乱。为探索载脂蛋白 E(Apo E)遗传多态性对肥胖儿童血脂水平的影响 ,我们对 39例肥胖儿童 Apo E表型与血脂水平的关系进行了研究。1　对象与方法1.1　对象　凡体重超过按身高计算的标准体重的 2 0 %者即为肥胖 [1 ] ,排除遗传、代谢、内分泌、神经系统疾病等所致病理性肥胖。肥胖儿童 (年龄 6～ 16岁 ) 39例。正常儿童 30例 ,选自与肥胖组同期 ,同地区学校的健康儿童。两组间性别、年龄及身高无差异。1.2　方法　空腹外周静脉血 3m l,制备血清 ,置 - 86℃冻存待测。总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG) (…     

apoE基因多态性与老年人血压关系的临床研究

目的 :观察人载脂蛋白E(apoE)的遗传多态性以及与老年人收缩压的关系。 方法 :应用等电聚焦电泳—免疫印迹法测定apoE表型。 结果 :高血压组与对照组apoE表型与apoE等位基因频率分布无显著差异 ,均以E3/ 3表型常见和ε3等位基因频率最高。高血压组中 ,不同apoE表型之间 ,收缩压差异有显著性 ,ε4等位基因携带者收缩压较携带其他等位基因者高。结论 :apoE基因多态性与老年人收缩压明显相关。     

脐血培养上清中白细胞介素15 和干扰素-γ含量检测

目的　研究脐血单个核细胞 (CBMNC)经脂多糖 (LPS)刺激后生成白细胞介素 15 (IL 15 )和干扰素 γ(IFN γ)的能力。方法　采用ELISA法对 14例新生儿CB和 2 0例成人外周血 (APB)MNC经LPS刺激后培养 48h的上清进行测定。结果　CB及APBMNC经LPS刺激后培养 48h的上清中可检测到IL 15和IFN γ ,但CBMNC生成IL 15和IFN γ的能力明显低于APB[IL 15 ( 8.5 5± 0 .60 )ng/Lvs ( 10 .2 4± 1.66)ng/L ,IFN γ( 2 7.96± 5 .88)ng/Lvs ( 60 .5 9± 18.15 )ng/L ,P均 <0 .0 1]。 结论　CBMNC生成IL 15和IFN γ的能力低下 ,在一定程度上揭示了CB的免疫特性 ,同APB相比 ,CB免疫功能发育不成熟     

大鼠肺动脉平滑肌细胞Rho激酶对 p-Smad1核迁移的作用及机制

目的: 研究Rho激酶对p-Smad1核迁移的作用及信号转导途径,探讨它们在肺血管重构中的作用机制。方法: 分离培养大鼠远端肺动脉平滑肌细胞,应用血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)启动肺动脉平滑肌细胞Rho激酶信号通路,应用骨形态发生蛋白2(BMP-2)启动BMP信号通路,并用Rho激酶抑制剂Y-27632、MEK抑制剂U0126进行干预。培养细胞分成5组:(1)对照组;(2)BMP-2组;(3)BMP-2+PDGF-BB组;(4)BMP-2+PDGF-BB+Y-27632组;(5)BMP-2+PDGF-BB+U0126组。免疫荧光染色标记p-Smad1在细胞核内外的分布并计算p-Smad1核迁移阳性细胞百分数(即核迁移率)。分离平滑肌细胞核蛋白和胞浆蛋白,Western blotting分析p-Smad1在细胞内的总量和细胞核内外相对含量的变化。Kit-WST-8试剂盒检测细胞增殖。结果: BMP-2组p-Smad1在细胞内的总量、在细胞核中的相对含量和核迁移率明显高于对照组(P<0.05);BMP-2+PDGF-BB 组p-Smad1的核迁移率和在细胞核中的相对含量明显低于BMP-2组(P<0.05),但是细胞内p-Smad1总量无明显改变(P>0.05);BMP-2+PDGF-BB+ Y-27632组和BMP-2+PDGF-BB+U0126组细胞内p-Smad1的总量、在细胞核中的相对含量和核迁移率与BMP-2组基本相似(P>0.05)。BMP-2组的A值明显小于对照组(P<0.05);PDGF-BB+BMP-2组的A值明显大于BMP-2组(P<0.05)且大于对照组(P<0.05);BMP-2+PDGF-BB+Y-27632组和BMP-2+PDGF-BB+U0126组的A值均小于PDGF-BB+BMP-2组(P<0.05)。结论: 在大鼠肺动脉平滑肌细胞,PDGF-BB激活的Rho激酶通过MEK/ERK1/2抑制BMP-2引起的p-Smad1核迁移,促进平滑肌细胞增殖。     

儿童B系急性淋巴细胞白血病树突状细胞的生物学特性

目的 体外诱导培养正常儿童与B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)儿童的树突状细胞(DC),比较二者的生物学特性.方法 分离10例B-ALL初诊患儿(ALL组)和10例正常儿童(对照组)的外周血单个核细胞,以rhGM-CSF(20 ng/mL)、rhIL-4(10 ng/mL)及TNF-α(10 ng/mL)联合培养8 d,显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞免疫表型(CD11c、CD80、CD83、CD86),ELISA检测培养上清中IL-12的浓度,混合淋巴细胞反应(MLR)检测抗原递呈功能,电化学法检测上清中葡萄糖浓度.结果 ALL组细胞未表现出DC的典型形态,CD11c、CD80、CD83、CD86表达均较对照组细胞低(P< 0.05),分泌IL-12的能力弱于对照组细胞(P<0.05),刺激T淋巴细胞增殖的能力弱于对照组细胞,ALL组细胞培养上清中的葡萄糖浓度高于对照组(P<0.05).结论 B-ALL来源的DC成熟度异常,功能减弱,葡萄糖代谢异常可能是其成熟异常的原因之一.     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死:6个月随访

目的:观察骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死的临床疗效和安全性.方法:本院2003-06/2008-06收治的脑梗死患者120例,均符合1995年全国第四届脑血管病会议制定的诊断标准,随机分为4组:对照组、单纯干细胞动员组、单纯干细胞移植组、联合组,30例/组.对照组采用常规药物治疗与康复训练;单纯干细胞动员组在对照组治疗的基础上,给予重组人粒细胞集落刺激因子150 μg腹部皮下注射;单纯干细胞移植组在对照组治疗的基础上,经静脉移植自体骨髓间充质干细胞(16.2～51.3)×108;联合组综合上述3组方法进行治疗.结果:①与对照组比较,治疗后4周、12周、6个月单纯干细胞动员组、单纯干细胞移植组、联合组Fugl-Meyer运动功能评分、功能独立性评定量表评分均显著好转(P＜0.05或P＜0.01):且联合组治疗效果最佳,疗效明显优于单纯干细胞动员组、单纯干细胞移植组(P＜0.05).②治疗后14 d内,单纯干细胞动员组未发现任何不良反应;单纯干细胞移植组发热4例,体温均在38℃以下,且24h后体温恢复正常,轻微头痛3例,未行治疗24 h后缓解;联合组发热5例,体温均在38℃以下,且24 h后体温恢复正常,轻微头痛3例,未行治疗24 h后缓解.结论:骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死近期疗效明显,不良反应较少.     

Aiolos基因过表达对白血病细胞生物学特性及化疗敏感性的影响

目的 研究Aiolos基因过表达对白血病细胞周期、凋亡及化疗敏感性的影响并探讨其机制。方法 将Jurkat细胞分为Aiolos过表达组、转染GFP组和未转染组,构建Aiolos基因慢病毒载体,感染Jurkat细胞并检测3组细胞的细胞周期、凋亡、相关基因表达及对依托泊苷敏感性。结果 Aiolos转染Jurkat细胞4d后,Aiolos过表达组和转染GFP组的GFP表达量达80%以上,且Aiolos过表达组的Aiolos蛋白表达较转染GFP组和未转染组明显上升(P<0.05)。Aiolos过表达组细胞凋亡比例较转染GFP组和未转染组明显增加(P<0.05),细胞周期由G0/G1进入S期比例明显减少(P<0.05)。周期相关基因Cyclin D3和Skp2表达下调(P<0.05),细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子P21和P27表达上调(P<0.05);凋亡相关基因Bax表达无明显变化,Bcl-2表达下调(P<0.05),Bax/Bcl-2比例增加(P<0.05)。Aiolos过表达组细胞在依托泊苷浓度40μg/mL作用36、48h后,细胞存活百分率较转染GFP组和未转染组均明显降低(P<0.05)。结论 在Jurkat细胞系中介导Aiolos基因过表达能够促进细胞凋亡、抑制细胞周期并提高细胞对化疗药物的敏感性。