青霉素、链霉素体外对人脐带组织源间充质干细胞胞外分泌物基因表达的影响

本研究探讨青霉素和链霉素对人脐带组织源间充质干细胞增殖、凋亡和胞外分泌物基因表达的影响。首先分离培养人脐带间充质干细胞,然后检测其免疫表型以及向成骨细胞和脂肪细胞分化的能力,并用MTT法检测细胞增殖,定量RT-PCR法检测胞外分泌物(ECS)和凋亡相关基因(bcl-2,bax)的cDNA表达。结果表明:培养得到的贴壁细胞表型符合间充质干细胞特征,低浓度的青霉素和链霉素可以有效促进脐带间充质干细胞的增殖,其最佳作用浓度为100 U/ml;同时青霉素和链霉素能降低其细胞外分泌物(extracellular secretion,ECS)成分的表达,抗生素浓度越高,ECS表达降低越多;而且低浓度的青链霉素还能提高bcl-2/bax的cDNA表达比值。结论:在脐带MSC的体外培养中,低浓度的青霉素、链霉素可增加细胞增殖,降低凋亡比率,但大剂量使用会降低脐带MSC胞外分泌物的基因表达。     

气密封接头最佳上扣扭矩计算与分析

阐述了一种带金属/金属密封结构的双台肩气密封接头的具体结构,指出其上扣扭矩由主、副台肩面、密封锥面及螺纹4部分的摩擦扭矩构成,由于承载结构的变化,API推荐的上扣扭矩计算公式不再适用于这种气密封接头。本文运用圆锥过盈配合模型与应力应变模型建立了相应的扭矩计算公式,并通过有限元方法验证了该理论计算公式的可靠性。通过理论计算、有限元模拟与全尺寸上扣试验相结合的方法确定了该接头的最佳上扣扭矩,研究结果可为生产厂家及油田确定气密封接头最佳上扣扭矩范围提供参考。     

MicroRNAs在白血病中作用的研究进展

MicroRNAs(miRNAs)是一类通过转录后调控机制对基因进行调控的非编码的短链RNA.它们以完全或者不完全互补的方式结合到靶mRNA的3'端非编码区发挥基因调控作用.研究发现,miRNAs的功能涉及多种生物学过程,参与了正常造血分化的调节,与肿瘤的发生有密切关系.因此推测,其与白血病的发生、发展、分型和预后密切相关.     

MicroRNAs在白血病中作用的研究进展

MicroRNAs(miRNAs)是一类通过转录后调控机制对基因进行调控的非编码的短链RNA.它们以完全或者不完全互补的方式结合到靶mRNA的3'端非编码区发挥基因调控作用.研究发现,miRNAs的功能涉及多种生物学过程,参与了正常造血分化的调节,与肿瘤的发生有密切关系.因此推测,其与白血病的发生、发展、分型和预后密切相关.     

儿童B系急性淋巴细胞白血病树突状细胞的生物学特性

目的 体外诱导培养正常儿童与B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)儿童的树突状细胞(DC),比较二者的生物学特性。方法 分离10例B-ALL初诊患儿(ALL组)和10例正常儿童(对照组)的外周血单个核细胞,以rh GM-CSF(20 ng/m L)、rh IL-4(10 ng/m L)及TNF-α(10 ng/m L)联合培养8 d,显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞免疫表型(CD11c、CD80、CD83、CD86),ELISA检测培养上清中IL-12的浓度,混合淋巴细胞反应(MLR)检测抗原递呈功能,电化学法检测上清中葡萄糖浓度。结果 ALL组细胞未表现出DC的典型形态,CD11c、CD80、CD83、CD86表达均较对照组细胞低(P<0.05),分泌IL-12的能力弱于对照组细胞(P<0.05),刺激T淋巴细胞增殖的能力弱于对照组细胞,ALL组细胞培养上清中的葡萄糖浓度高于对照组(P<0.05)。结论B-ALL来源的DC成熟度异常,功能减弱,葡萄糖代谢异常可能是其成熟异常的原因之一。     

MicroRNAs在白血病中作用的研究进展

MicroRNAs(miRNAs)是一类通过转录后调控机制对基因进行调控的非编码的短链RNA.它们以完全或者不完全互补的方式结合到靶mRNA的3'端非编码区发挥基因调控作用.研究发现,miRNAs的功能涉及多种生物学过程,参与了正常造血分化的调节,与肿瘤的发生有密切关系.因此推测,其与白血病的发生、发展、分型和预后密切相关.     

撤除生长因子对间充质干细胞增殖和胞外基质表达的影响

目的:研究撤除表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的增殖和胞外基质(ECM)表达的影响。方法:将第5代hUCMSCs分3组:对照组(保持上述生长因子浓度不变),半量撤除组(使生长因子浓度减半),完全撤除组(不添加生长因子)。培养30h后瑞特-姬姆萨法染色观察细胞形态,MTT法细胞计数。培养15h后,定量PCR检测BCL-2、BAX及胞外基质基因的表达情况。结果:撤除生长因子后细胞增殖减慢,形态变大,核质比减小,BCL-2/BAX比率增高,胞外基质表达多数下调。半量撤除组细胞的形态、增殖能力、胞外基质表达的改变相对较小,BCL-2/BAX比率增高更明显。结论:撤除生长因子会影响细胞增殖和胞外基质的表达,保留半量生长因子可以改善这种情况。     

血小板衍生生长因子对人脐带间充质干细胞胞外基质的影响

目的     探讨血小板衍生生长因子(PDGF)对人脐带间充质干细胞(UCMSCs)增殖和细胞外基质(ECM)表达的影响及其可能的作用机制。方法     体外传代培养UCMSCs,分为对照组和实验组,其中对照组不加PDGF,实验组分别加入不同质量浓度(2、5、10、20、50μg/L)的PDGF。加入PDGF 12h后,用qRT-PCR法检测ECM基因和凋亡相关基因(Bcl 2、Bax)的表达;加入PDGF 24h后,用四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞增殖。结果    与对照组比较,随着PDGF质量浓度的增加,反映细胞代谢活性的OD值逐渐增加,且PDGF质量浓度在20μg/L时达到最高值,但PDGF质量浓度为50μg/L时OD值反而降低;PDGF质量浓度为2μg/L时,ECM表达和Bcl 2/Bax比值较对照组有所降低,随着PDGF质量浓度的增加,ECM的表达和Bcl 2/Bax比值呈现先增高后降低的趋势,且在10μg/L时达到最高值。 结论     PDGF可以促进脐带间充质干细胞的增殖,同时能促进其ECM的表达,还能提高细胞耐受凋亡的能力,最佳作用质量浓度为10μg/L。