高效液相色谱法测定小鼠肝脏中反式-白藜芦醇含量

建立一灵敏的HPLC法，用于测定小鼠肝脏中反式-白藜芦醇含量。取小鼠全部肝脏制成匀浆，用乙酸乙酯提取。分离有机层并挥干，残渣用0．2mL流动相溶解，离心，取上清液50此注入高效液相色谱仪。样品在岛津ODS柱（150mm×4．6mm,5μm）上分离，柱温35℃，检测波长305nm，流动相为甲醇-0．1mol／L乙酸溶液（4：6，v／v），流速为1mL／min。以信噪比3：1计，白藜芦醇在小鼠肝脏中的检测限为3．0ng／g；标准曲线的线性范围为5．0-120．0ng／g；浓度为6、10及80ng／g的平均回收率分别为102％、96．0％及91．2％；日内、日间精密度的RSD均小于5％。与已报道的其它白藜芦醇生物样品测定方法相比较，本法更为快速与灵敏，并具有良好的线性、选择性、准确度与精密度，可用于小鼠肝脏中白藜芦醇的药物动力学研究。     

胃康颗粒质量标准的研究

目的:制定胃康颗粒的质量标准。方法:用高效液相色谱法测定橙皮苷的含量。结果:鉴别方法专属、灵敏、准确,含量测定在0.315～2.1ug范围内呈线性关系。结论:此方法可有效地控制胃康颗粒的质量。     

miR-302c靶向CREB1基因通过P53信号通路影响肺癌的侵袭和迁移

  目的  探讨微小RNA-302c （miR-302c）在肺癌组织中的表达,以及对肺癌侵袭和迁移的影响和作用机制。  方法  在线分析GEO数据库中GSE19945和GSE136043两组肺癌数据集中miR-302c的表达情况,通过Human Protein Atlas数据库研究CREB1表达情况;双荧光素酶实验证明miR-302c和CREB1的关系。正常组细胞不加任何药物,对照组细胞转染miR-302c-mimic-NC,实验组细胞转染 miR-302c-mimic。通过Transwell小室检测细胞的侵袭与迁移能力,通过小管形成检测细胞的血管生成能力,通过Western blot检测各组细胞中CREB1、p-P53、p-P21的表达水平。  结果  生物信息分析显示,与正常组织相比,miR-302c在肺癌组织、肺癌淋巴转移组织中的表达明显降低,肺癌组织中CREB1的表达明显升高;双荧光素酶实验证明miR-302c靶向调控CREB1的表达;与正常组相比,实验组迁移和侵袭的细胞数量、小管生成的数量明显下降,实验组中CREB1的表达明显下降,p-P53、p-P21的表达明显升高（均P<0.05）。  结论  miR-302c在肺癌组织表达降低,过表达miR-302c后能明显抑制肺癌细胞的侵袭与转移,这可能与抑制靶基因CREB1的表达,以及激活P53信号通路有关。      

姜黄素对间歇性睡眠剥夺大鼠特定肠道菌的影响

目的从肠道菌群角度探讨姜黄素(CUR)对间歇性睡眠剥夺大鼠产生抗抑郁样作用的可能机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、大平台对照组(BP)、模型组和CUR(70 mg/kg)组,采用改良的平台水环境法建立大鼠间歇性睡眠剥夺模型;通过敞箱实验和糖水偏好实验考察大鼠的抑郁样行为;同时收集粪便样本,提取肠道菌群的DNA,应用细菌16S r RNA基因序列设计引物,进行荧光定量PCR(q RT-PCR)检测。结果行为学实验结果表明模型大鼠出现抑郁样行为,敞箱实验得分和糖水偏好率显著低于BP组(P0.01),给予CUR可显著改善抑郁样行为;q RT-PCR检测表明,模型组粪便中的大肠杆菌、拟杆菌及有益菌双歧杆菌和乳酸杆菌,与对照组比较显著减少,有害菌产气荚膜梭菌相对量显著增加(P0.05、0.01)。CUR组大鼠肠道菌群总量增加,除产气荚膜梭菌显著减少外,其余几种细菌相对量较模型组显著增加(P0.05、0.01)。结论间歇性睡眠剥夺引起大鼠抑郁样状态和肠道菌群失调,CUR改善肠道菌群失调,可能为其改善抑郁样状态的机制之一。     

生活方式、二甲双胍及罗格列酮早期干预成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者的糖调节受损且胰岛自身抗体阳性同胞的保护效应研究

目的观察生活方式、二甲双胍及罗格列酮早期干预对成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者的糖调节受损且胰岛自身抗体阳性同胞的保护效应。方法将符合标准的241例患者分为自然转归组、生活方式干预组、二甲双胍干预组、罗格列酮干预组。自然转归组不愿进行生活方式干预及药物治疗;生活方式干预组:提供书面饮食、运动指导方案;二甲双胍干预组:在生活方式干预的基础上,服用二甲双胍0.5 g,3次/d;罗格列酮干预组:在生活方式干预的基础上,服用罗格列酮4 mg,1次/d。干预治疗5年。记录患者的身高、体重、血压、肝肾功能、空腹血糖(FPG)、葡萄糖负荷后2 h血糖(2hPG)、空腹胰岛素(FINS)和C肽、葡萄糖负荷后2 h胰岛素(2hINS)和C肽、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、胰岛细胞抗体(ICA)、胰岛素抗体(IAA)阳性率及糖尿病发生率。结果生活方式干预、二甲双胍及罗格列酮可显著改善糖尿病前期患者的自然病程,三组分别恢复为正常糖耐量的61.9%、62.7%及66.1%。三组胰岛B细胞功能(空腹、负荷后2 h)中,C肽、胰岛素降低,胰岛素分泌指数增加,进展为LADA的发病率降低。结论生活方式、二甲双胍及罗格列酮干预对胰岛B细胞功能损伤具有保护效应,能有效减少或延缓LADA患者胰岛细胞抗体阳性同胞的空腹血糖受损(IFG)、葡萄糖耐量受损(IGT)、IFG合并IGT患者进展为LADA。     

基于代谢组学方法的湿热证“异病同证”研究

目的：从代谢组学变化层面揭示“湿热证”异病同证的物质基础。方法：以慢性乙型病毒性肝炎、非酒精性脂肪性肝病及慢性肾小球肾炎的典型湿热证患者各30例为研究对象,以健康者30例为对照,联合选用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪和气相色谱-飞行时间质谱仪两个代谢物检测平台,对血清样本进行全谱代谢组学检测。并运用多维统计方法对数据进行分析,以探索三种不同疾病湿热证的共性及特异性变化物质。结果：通过比较不同疾病湿热证组间代谢组学差异物质,并与健康组对照,发现肌苷、尿苷、天门冬氨酸、油酸甘油酯、乳酸盐是三种疾病湿热证的共同变化物质。结论：基于代谢组学技术发现,上述三种不同疾病的典型湿热证之间,既有反映不同疾病的差异性物质,又存在与湿热证相关的共性物质,从而在代谢水平上为中医“异病同证”理论提供了客观依据。     

橄榄苦苷脂质体包封率测定方法探讨

目的:采用微柱滤过法测定橄榄苦苷脂质体的包封率。方法:用20 ml的注射器装填葡聚糖凝胶,取40 μl的样品加至柱头后,先用2倍柱体积的纯化水冲柱,再用50%的乙醇溶液洗柱,收集洗脱液,测定吸光度值,根据洗脱曲线计算脂质体中游离橄榄苦苷的含量,推算包封率。结果:在橄榄苦苷出峰处,脂质体对测定无干扰;橄榄苦苷在1~16 μg·ml^-1范围内,吸光度与浓度线性关系良好(r²=0.999 6);1,1.5及2 mg·ml^-1橄榄苦苷与空白脂质体混合后的过柱回收率分别为(110.00±2.35)%,(109.75±2.63)%及(97.97±1.82)%;同一批橄榄苦苷脂质体重复测定6次包封率的RSD为1.76%。结论:本方法准确、简便,适于橄榄苦苷脂质体包封率的测定。     

基于群组专家知识集成的中医临床症候评价方法研究

目的:提出一种基于群组专家知识的乙肝中医临床症候评价模型。方法:根据所收集到的883例慢性乙型病毒性肝炎临床资料为依据,建立乙肝中医症候专家评价表,通过专家打分,得到3种不同证型下的112种相关临床指标专家评价结果,利用聚类分析和相对熵集结模型建立评价模型。结果:通过模型计算,对与肝胆湿热证、肝郁脾虚证、肝肾阴虚证等3种证型密切相关的临床指标进行了系统分析,同时,建立了这3种基本证型的综合评价模型。结论:所提出乙肝中医临床评价方法能够符合中医临床评价要求,并且对其他疾病的中医临床研究具有一定的参考和借鉴。     

三化汤对缺血性中风模型大鼠血清脂肪酸谱的影响

目的:观察三化汤对缺血性中风模型大鼠血清脂肪酸谱的影响.方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO模型),随机分为模型组、干预组,每组10只.另设正常组、假手术组,每组各10只.正常组、假手术组、模型组灌胃纯净水,干预组灌胃三化汤水煎液,连续给药10 d.10 d后处死大鼠,取血清样本,采用气相色谱-质谱联用...     

阵发性心房颤动患者血清代谢组学初步研究

目的 采用代谢组学方法分析阵发性心房颤动患者血清中低分子代谢物的变化。方法 采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）检测15例阵发性心房颤动患者（病理组）和同期20例健康者（对照组）血清中代谢物,采用正交偏最小二乘法（OPLSA）的方法比较两组代谢谱的变化。结果 对照组和病例组的代谢谱分离趋势明显,利用Wiley和NIST质谱库及本课题组建立的标准品谱库鉴定了29个具有统计学意义的差异代谢物。并对29个差异代谢物进行了ROC曲线绘制,计算ROC曲线下的面积,得出甘油曲线下的面积为0.937,丝氨酸曲线下的面积为0.853,天冬氨酸曲线下的面积为0.933,苏氨酸曲线下的面积为0.823,色氨酸曲线下的面积为1。结论 心房颤动患者血清中低分子代谢产物与正常人存在差异,心房颤动患者血清中甘油、丝氨酸、天冬氨酸、苏氨酸以及色氨酸可能成为心房颤动诊断标志物。