阵发性心房颤动患者血清代谢组学初步研究

目的 采用代谢组学方法分析阵发性心房颤动患者血清中低分子代谢物的变化。方法 采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）检测15例阵发性心房颤动患者（病理组）和同期20例健康者（对照组）血清中代谢物,采用正交偏最小二乘法（OPLSA）的方法比较两组代谢谱的变化。结果 对照组和病例组的代谢谱分离趋势明显,利用Wiley和NIST质谱库及本课题组建立的标准品谱库鉴定了29个具有统计学意义的差异代谢物。并对29个差异代谢物进行了ROC曲线绘制,计算ROC曲线下的面积,得出甘油曲线下的面积为0.937,丝氨酸曲线下的面积为0.853,天冬氨酸曲线下的面积为0.933,苏氨酸曲线下的面积为0.823,色氨酸曲线下的面积为1。结论 心房颤动患者血清中低分子代谢产物与正常人存在差异,心房颤动患者血清中甘油、丝氨酸、天冬氨酸、苏氨酸以及色氨酸可能成为心房颤动诊断标志物。     

血浆miR-128-3p在重症胰腺炎患者中的表达及临床意义

目的检测微小RNA-128-3p(miR-128-3p)在重症胰腺炎(severe pancreatitis, SAP)患者血浆中的表达情况及临床意义。方法选择2017年6月至2020年12月在上海市宝山区中西医结合医院就诊的SAP患者175例为观察对象, 根据患者严重程度分级, 将患者分为轻症急性胰腺炎(mild acute pancreatitis, MAP)组78例, 中重症急性胰腺炎(moderate to severe acute pancreatitis, MSAP)组50例和SAP组47例。根据患者预后情况, 将SAP组分为存活组28例和死亡组19例。qRT-PCR法检测miR-128-3p水平, 对患者进行急性生理健康与慢性疾病(APACHEⅡ)评分、Ranson评分, pearson分析血浆miR-128-3p水平与APACHEⅡ、Ranson评分相关性, ROC曲线分析血浆miR-128-3p对SAP患者预后不良的预测价值。结果 MAP组、MSAP组、SAP组3组间APACHEⅡ[(3.41±1.56)、(5.63±1.78)、(6.57±1.83)分]、Ranso...     

基于网络药理学及分子对接技术探讨补气消脂方治疗非酒精性脂肪性肝病的作用机制

目的利用网络药理学和分子对接技术预测补气消脂方治疗非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）的主要活性成分和目标基因靶点,并探讨其潜在的作用机制。方法通过检索中药系统 药理技术平台（TCMSP）、OMIM、GeneCards 等数据库,查找补气消脂方活性成分、作用靶点以及NAFLD 相关 靶点,以OB≥30%和DL≥0.18 为标准筛选活性成分,并查阅文献补充文献报道中常见的中药活性成分,汇总 得到活性成分库,并利用STRING 数据库平台分析各靶点之间的相互作用,构建蛋白互作网络。利用 Cytoscape 3.7.2 软件进行“活性成分-疾病靶点”网络分析,在此基础上采用R 4.0.3（依托于“clusterProfiler” “org.Hs.eg.db”以及“pathview”程序包）进行GO 与KEGG 基因功能富集分析。筛选出补气消脂方关键活性成 分和靶基因后,利用Autodock-vina 软件进行分子对接,选择蛋白互作网络中度值排名前6 位的重要的靶点进 行分子对接,验证结合活性。结果通过筛选发现了补气消脂方中共有98 种活性成分和229 种相应靶点, NAFLD 靶点1 283 个。最终筛选获得103 个关键靶点和30 个重要的信号通路,如癌症通路、AGE-RAGE 信 号通路、TNF 信号通路、HIF-1 信号通路等。补气消脂方治疗NAFLD 的主要成分为槲皮素、木犀草素、丹 参酮ⅡA、山柰酚等,关键靶点为IL-6、FOS、CXCL8、RELA、STAT3、AKT1 等。通过分子对接得到结合 能≤-6 kcal·mol-1 的“靶点蛋白-活性分子”16 个,与排名前6 位的关键靶点均有较好的亲和力。结论补气 消脂方中的活性成分槲皮素、木犀草素、丹参酮ⅡA、山柰酚、柚皮素等可能通过作用于多个靶点和调控多条 通路治疗NAFLD。     

姜黄素对间歇性睡眠剥夺大鼠特定肠道菌的影响

目的从肠道菌群角度探讨姜黄素(CUR)对间歇性睡眠剥夺大鼠产生抗抑郁样作用的可能机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、大平台对照组(BP)、模型组和CUR(70 mg/kg)组,采用改良的平台水环境法建立大鼠间歇性睡眠剥夺模型;通过敞箱实验和糖水偏好实验考察大鼠的抑郁样行为;同时收集粪便样本,提取肠道菌群的DNA,应用细菌16S r RNA基因序列设计引物,进行荧光定量PCR(q RT-PCR)检测。结果行为学实验结果表明模型大鼠出现抑郁样行为,敞箱实验得分和糖水偏好率显著低于BP组(P0.01),给予CUR可显著改善抑郁样行为;q RT-PCR检测表明,模型组粪便中的大肠杆菌、拟杆菌及有益菌双歧杆菌和乳酸杆菌,与对照组比较显著减少,有害菌产气荚膜梭菌相对量显著增加(P0.05、0.01)。CUR组大鼠肠道菌群总量增加,除产气荚膜梭菌显著减少外,其余几种细菌相对量较模型组显著增加(P0.05、0.01)。结论间歇性睡眠剥夺引起大鼠抑郁样状态和肠道菌群失调,CUR改善肠道菌群失调,可能为其改善抑郁样状态的机制之一。     

白藜芦醇壳聚糖纳米粒的制备及理化性质

 目的建立白藜芦醇壳聚糖纳米粒的制备方法。方法以三聚磷酸钠作为离子聚合剂,在弱酸性条件下制备白藜芦醇壳聚糖纳米粒;考察pH值、壳聚糖与离子聚合剂浓度、白藜芦醇加入顺序、搅拌时间及探头超声等因素对纳米粒性质的影响,确定最佳制备工艺。结果在透射电子显微镜下,制备的白藜芦醇壳聚糖纳米粒呈球形;平均粒径为38nm,多分散指数为0.13;包封率与载药量分别为(61.6±2.3)%和(13.1±1.1)%;与白藜芦醇壳聚糖溶液相比,白藜芦醇壳聚糖纳米粒显示了明显的缓释效应。结论离子聚合法可用于小粒径壳聚糖纳米粒的制备。     

不同证型非酒精性脂肪性肝病患者的血清胆汁酸谱特征研究

目的：在血清胆汁酸谱层面探究非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者中医证型肝胆湿热证、肝郁脾虚证的物质基础。方法：182例NAFLD患者辨证分为无证可辨（36例）、肝胆湿热（92例）和肝郁脾虚（54例）3组;收集受试者各项指标及血清总胆汁酸（TBA）水平;通过液相色谱/串联质谱分析15种血清胆汁酸水平;比较NAFLD各证型间代谢相关指标及胆汁酸谱特征。结果：肝胆湿热组的TBA显著高于无证可辨组、牛磺石胆酸（TLCA）显著低于无证可辨组（P<0.05）;肝郁脾虚组的TBA、石胆酸（LCA）、甘氨石胆酸（GLCA）均显著高于无证可辨组（P<0.05,P<0.01）;肝郁脾虚组的甘氨鹅脱氧胆酸（GCDCA）显著高于肝胆湿热组（P<0.05）。结论：肝郁脾虚证的NAFLD患者表现出相对更加紊乱的血清胆汁酸代谢异常,血清胆汁酸的代谢紊乱是NAFLD不同证型的物质基础之一。     

基于肌醇需求激酶1α/c-Jun氨基末端激酶信号通路探讨胆宁片干预非酒精性脂肪性肝病的作用及机制

目的 基于肌醇需求激酶1α/c-Jun氨基末端激酶（（IRE1α/JNK）信号通路,探讨胆宁片对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）模型大鼠的作用及机制。方法 将32只SD大鼠随机分为正常饮食组（A组,等体积生理盐水,8只）和高脂饮食组（24只）;高脂饮食组大鼠喂养10周复制NAFLD模型成功后,再随机分为模型组（B组,等体积生理盐水）、多烯磷脂酰胆碱组[C组,142.5 mg/（kg·d）]和胆宁片组[D组,562.5 mg/（kg·d）],各8只。各组小鼠均灌胃相应药物干预6周。测定大鼠的体质量、血糖（GLU）;采用苏木精-伊红染色（HE）法观察大鼠肝组织病理形态变化,采用油红染色法观察肝组织脂质沉积;检测血清胰岛素（INS）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、游离脂肪酸（NEFA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平;采用免疫印迹（Western blot）法检测肝组织IRE1α、JNK1、磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS1)的蛋白表达水平。结果 与B组比较,D组大鼠血糖和TC,TG,...     

基于网络药理学及分子对接技术探讨实脾固肾化瘀方治疗IgA肾病的作用机制

目的 运用网络药理学方法和分子对接技术分析实脾固肾化瘀方（黄芪、菟丝子、川芎等）治疗IgA肾病（IgA nephropathy,IgAN）的潜在作用机制。方法 通过TCMSP数据库筛选实脾固肾化瘀方的活性成分及作用靶点,通过OMIM、GeneCards、PharmGkb、DrugBank等数据库筛选IgA肾病的疾病相关靶点,获取二者交集靶点,即实脾固肾化瘀方治疗IgA肾病的潜在作用靶点。使用Cytoscape 3.7.2软件构建“药物-活性成分-潜在作用靶点”网络,并分析网络中的关键活性成分;将交集靶点导入STRING数据库进行蛋白互作（PPI）网络分析,筛选出潜在核心靶点;运用R 4.0.3软件对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。利用AutoDockVina软件对关键活性成分与核心靶点进行分子对接验证。结果 共筛选得到69个活性成分及97个潜在作用靶点（交集靶点）;获得槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、木犀草素、异鼠李素等关键活性化合物;筛选得到IL6、MMP2、AKT1、HIF1A、TNF、MMP9等核心靶点;潜在作用靶点主要富集在IL-17、TNF、HIF-1、PI3K-Ak...     

HPLC测定疏肝和胃颗粒中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量

目的：建立HPLC法测定疏肝和胃颗粒中木香烃内酯及去氢木香内酯含量的方法。方法：采用C18柱（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱;流动相为甲醇-水（65∶35）;流速1.0 mL/min;检测波长225 nm。结果：木香烃内酯的线性范围为0.0738~0.492μg,r=0.9997,平均回收率为99.75%,RSD=0.88%;去氢木香内酯线性范围为0.0786~0.524μg,r=0.9998,平均回收率为99.58%,RSD=0.48%。结论：6批样品测定结果表明,该方法简便,准确,可作为疏肝和胃颗粒质量控制的定量方法。     

高效液相色谱法测定前列通胶囊中盐酸小檗碱的含量

目的：采用高效液相色谱法测定前列通胶囊中盐酸小檗碱的含量。方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以乙腈-磷酸二氢钾（0.05 mol/L）（28∶72）为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长265 nm。结果：盐酸小檗碱进样量在0.045-0.30μg范围内与峰面积具有良好的线性关系,r=0.9997,回收率为99.92%,RSD=1.67%（n=5）。结论：该方法操作简便,精密度好,结果准确可靠,适用于前列通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定。