bcr/abl反义寡核苷酸净化后自体骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病

目的　观察bcr/abl反义寡核苷酸 (AS ODN)净化后自体骨髓移植 (ABMT)治疗慢性粒细胞白血病 (CML)的疗效。方法　 5例CML中慢性期 2例 ,加速期 1例 ,急变期 2例 ,均具b3a2型bcr/ablmRNA。骨髓采集前患者均经 2个疗程大剂量联合化疗的体内净化 ,自体骨髓经CS30 0 0plus浓集后加入 18bp的硫代bcr/ablAS ODN(40～ 6 0 μg/ml,48～ 6 0h)体外净化Ph 细胞。预处理方案为全身照射 环磷酰胺 (TBI CTX)或马法兰、阿糖胞苷、CTX和环己亚硝脲 (MAC CCNU)。结果　体内净化后骨髓Ph 细胞减至 34 % (2 4%～ 46 % ) ,bcr/ablmRNA( )的CFU GM减至 45 .6 % (33%～ 5 8% )。经bcr/ablAS ODN净化后 ,2例骨髓bcr/ablmRNA(- ) ,3例bcr/ablmRNA( ) ,但bcr/ablmRNA( )的CFU GM明显减少。 5例ABMT后造血重建有延迟现象。经 2年以上随访观察 ,3例移植后持续 9～ 12个月主要遗传学缓解 (MCR) ,且移植后慢性期明显延长 ,其中 1例急变期患者至今无须治疗 ,现已无病生存 37个月 ,bcr/ablmRNA(- )。 1例急变期患者仅获短暂MCR ,移植后 7个月急变期复发 ,1例移植后第 74天因造血重建延迟而感染、出血死亡。结论　bcr/ablAS ODN净化后ABMT可使部分患者取得相当一段时期的MCR及延长慢性期。     

两种方案预防无血缘关系供者造血干细胞移植后移植物抗宿主病的效果比较

移植物抗宿主病（GVHD）是引起无血缘关系供者造血干细胞移植（URD—HSCT）后患者死亡的主要原因，降低URD—HSCT后GVHD发生率和严重程度是提高患者长期生存率的关键。现将我院40例接受URD—HSCT的白血病患者分别采用环孢菌素A（CsA）、甲氨蝶呤（MTX）、抗胸腺细胞球蛋白（ATG）、霉酚酸酯（MMF）四联方案以及CsA、MTX、ATG三联方案预防GVHD的效果报道如下。     

异基因造血干细胞移植后环孢素治疗相关的类线粒体脑肌病一例

患者，男，22岁。因确诊慢性粒细胞白血病（CML）慢性期近5个月余，2005年6月4日接受非血缘关系HLA全相合供者骨髓移植，移植有核细胞数为3．6×10^8／kg。移植预处理为改良BUCY（羟基脲＋白消安＋环磷酰胺＋阿糖胞苷）方案，移植物抗宿主病（GVHD）预防用环孢素（CsA）＋甲氨蝶呤＋抗胸腺细胞球蛋白。其中，CsA从移植前1天（-1天）开始，2mg·kg^-1·d^-1，持续静脉给药，维持全血CsA浓度为2500μg／L。＋15天造血获得重建，＋17天CsA由静脉注射改为7mg·kg^-1·d^-1口服。     

间充质干细胞治疗糖皮质激素耐药性慢性移植物抗宿主病临床疗效观察

Objective To assess whether treatment with mesenchymal stem cells (MSCs) is an effective adjunct therapy for refractory extensive chronic graft-versus-host disease (GVHD) resistant to conventional therapy. Methods 12 patients with steroid-resistant extensive chronic GVHD were treated with MSCs. One patient received one dose, 10 received two doses, and the remaining three doses. The MSCs were obtained from HI,A-identical sibling donors (n = 14), haploidentical donors (n = 2), unrelated mismatched donor (n = 1) and third-party HLA-mismatched donors (n = 7). Of the 11 patients treated with multiple infusions, 5 received cells derived from two donors. The median first dose of MSCs was 1.0 (0. 4-2. 1) × 106/kg , the median second dose was 1.2(0. 8-1.9) × 106/kg , and the third dose in one patient was 1.1 × 106/kg. Meanwhile the proportion of CD3+ ,CD4+,CD8+ ,CD19+,CD4+ CD25+ ,FOXP3+,FOXP3+CD4+ and FOXP3+ CD25+ was determined with double fluorescent-labeled antibodies and flow cytometry before and 4 weeks after the MSCs infusion. Results No patients had side-effects during or immediately after the infusions of MSCs. After a treatment course of one to three doses, 3 patients had complete response(CR), 6 showed partial response(PR) and 3 did not respond; the total effective rate was 75% (9/12). Complete resolution was seen in the involvement of skin (3/12), lung (1/3), joints (1/5), liver (3/10), oralcavity (4/12) and eye (2/7). Response rate was not related to donor HLA-match. 3 CR patients discontinued all of the immunosuppressive agents without relapse 100 to 292 days after the MSC infusion and 6 PR patients taped all immunosuppressive agents after 60 to 79 days. Mean follow-up period was 1152(795-1914) days, leukemia free survival rate was 91.7% (11/12) and the overall survival rate was 75% (9/12). The ratio of CD4/CD8 and the proportion of regulatory T cells were significantly higher than that before MSCs treatment. Conclusion Third-party MSCs were as effective as HLA-identical or haploidentical cells. This finding has practical implications and suggests that third-party cells can be prepared and stored frozen to be used for steroid-resistant extensive chronic GVHD therapy. It is concluded that MSCs may prevent the lethal cGVHD after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation and raise the survival rate by increasing the ratio of CD4/CD8 and proportion of regulatory T cells in vivo.     

应用~(125)I—UdR释放法检测LAK细胞的杀伤作用

本文利用~(125)I-UdR标记K562、Raji靶细胞技术,建立体外测定LAK细胞的细胞毒方法。Raji细胞与K562细胞的标记条件相似,即在标记时间为4h、5×10~(-5)SMFUdR条件下,标记1×10~6细胞/ml。~(125)I-UdR最适用量为2—3μCi,效靶细胞孵育最佳时间为16-18h。~(125)I-UdR释放法检测的结果符合LAK细胞的一般特性。     

LAK细胞对完全缓解状态白血病病人免疫与造血功能影响

ＬＡＫ细胞对完全缓解状态白血病病人免疫与造血功能影响刘启发，周淑芸，罗荣城（第一军医大学南方医院广州５１０５１５）目前大剂量重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）或淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）联合ｒＩＬ－２广泛用于各类肿瘤病人的治疗。我院从１９９２年...     

白血病异基因造血干细胞移植后复发的治疗

异基因造血干细胞移植（Allo-HSCT）是当今治疗白血病的最有效手段,甚至是治愈某些类型白血病的唯一方法。但是移植后白血病复发仍是影响患者长期生存的最主要因素,大部分移植后患者因复发而死亡。造成白血病复发的主要原因是残留白血病细胞的存在和机体缺乏移植物抗白血病效应（GVL）。移植后复发患者如不给予进一步治疗,平均生存仅有3～4个月,当前认为对移植后复发患者最有效的治疗手段是再次移植和供体淋巴细胞输注（DLI）。此外还包括一些细胞因子如IFN,TNF,IL-2和G（GM）-CSF对一部分患者具有一定的疗效,现就有关allo-HSCT后复发患者治疗进行评述。     

联合应用染色体G显带和间期荧光原位杂交技术检测急性早幼粒细胞白血病

目的 联合染色体G显带和间期荧光原位杂交技术(interphase fluorescence in situ hybridization，I—FISH)对急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL．)患者进行早期诊断和治疗后微小残留病的监测，同时对两种方法的灵敏度进行比较。方法 应用染色体G显带技术和I—FISH对20例APL患者进行遗传学检测，包括13例初诊患者和8例治疗后获完全缓解的患者(其中有初诊中的1例)。结果 ①13例初诊病例中，9例染色体G显带检测t(15；17)阳性，2例阴性,2例因分裂相缺乏无法分析结果，阳性检出率为9／13(69.2％)；I—FISH检测PML／RARa融合基因13例为阳性，阳性检出率为13／13(100％)，细胞阳性率为76％～100％，平均91.3％。②8例治疗后血液学获完全缓解病例，染色体G显带后核型分析6例正常，2例无分裂相可供分析；I—FISH检测7例均为阴性，1例阳性。结论 联合运用染色体G显带和I—FISH技术能够有效提高APL患者的诊断和治疗后微小残留病的监测水平。     

急性白血病复发时克隆演化的研究

为研究克隆演化在急性白血病复发发病机制中作用，应用聚合酶链反应（PCR）联合Southern杂交检测75例及其中36例复发急性非淋巴细胞白血病（ANLL）IgH重排基因，PCR检测81例及其中35例复发急性淋巴细胞白血病（ALL）IgH、TCRVγ2－Jγ、TCRVδ－Dδ3重排基因及bcr／ablmRNA，配合形态学和免疫学检查发现8例ALL（22．9％）和4例（11．1％）ANLL复发时形态学，免疫学或／和重排基因类型发生改变（克隆演化）。克隆演化是某些急性白血病复发的主要原因，克隆演化发现对于白血病治疗改进有重要意义，其选择机制尚需进一步研究。     

流式细胞术测定先兆子痫产妇血小板活化

目的探讨先兆子痫患者体内静态血小板与活化态血小板膜糖蛋白CD41a、CD62p、CD63表达量的变化及其临床意义。方法采用全血免洗免疫直标法,用血小板CD41a、CD62p、CD63荧光单抗分别标记20例正常人、15例正常孕妇及16例先兆子痫产妇静息态与ADP活化后血小板,在流式细胞仪上测定其表达量。结果先兆子痫产妇组静息态与活化态血小板膜糖蛋白CD62p、CD63表达量均较正常孕妇组显著增高,CD41a表达无显著性差异;而后者与正常对照组比较,静息态间及活化态间血小板膜糖蛋白CD62p、CD63、CD41a表达量均无显著性差异。结论先兆子痫产妇体内血小板膜糖蛋白CD62p、CD63表达处于较高水平,提示血小板处于活化状态。