ERCC1、XRCC1单核苷酸多态性与非小细胞肺癌铂类药物化疗预后关系的研究

目的:探讨核苷酸切除修复交叉互补组基因1(ERCC1)、人类X射线交错互补修复基因1(XRCC1)单核苷酸多态性(SNP)与非小细胞肺癌(NSCLC)铂类药物化疗后的预后关系。方法:经病理学确诊的晚期NSCLC患者120例,采用铂类为主的两药联合化疗方案,化疗前采集患者的外周血。采用基因芯片法检测ERCC1(118)、XRCC1(399)的SNP,并随机抽取10%的样本进行基因测序来验证该方法的准确性。比较不同基因型与铂类药物化疗后生存期的关系。结果:成功进行基因分型,野生型、杂合型和突变型的叠加荧光分别显示为绿色、黄色和红色,与基因测序结果完全吻合。中位随访时间11个月(6～49个月)。携带ERCC1(118)C/C、C/T+T/T基因型患者铂类化疗后中位生存时间(MST)、1年生存率、2年生存率及3年生存率分别为10.9个月、35.9%、6.3%、1.6%和13.5个月、59.5%、19.0%、14.3%,两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);携带XRCC1(399)G/G基因型、G/A+A/A基因型MST、1年生存率、2年生存率、3年生存率分别为15.2个月、59.1%、15.9%、6.8%和11.1个月、35.5%、8.1%、6.5%,两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ERCC1、XRCC1基因多态性与NSCLC患者铂类药物化疗后的生存期有显著相关性,有可能成为铂类药物化疗后生存期的预测指标。     

miR-520a靶基因PIK3CA结合位点多态性与中国汉族人群大肠癌易感性的关联研究

背景与目的：越来越多的研究表明,微小RNA(microRNA,miRNA,miR)靶基因位点的多态性可能会影响miRNA的转录或生成能力,影响个体对肿瘤的易感性。本研究旨在探讨大肠癌患者miR-520a靶基因PIK3CA 3 ’端单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs141178472与中国汉族人群大肠癌易感性之间的关系。方法：选取386例大肠癌标本作为实验组,394名年龄及性别比例匹配的非肿瘤个体作为对照组。病例对照研究检测rs141178472的分布频率。统计分析大肠癌易感性与多态性之间的关系。结果：携有rs141178472 CC基因型或C等位基因显著增加了大肠癌的发病风险(CC vs TT,OR=1.716,95%CI：1.084~2.716,P=0.022;C vs T,OR=1.258,95%CI：1.021~1.551,P=0.033)。通过检测大肠癌患者外周血单个核细胞PIK3CA的表达发现,PIK3CA mRNA的表达与SNP基因型rs141178472具有关联性。结论：miR-520a与PIK3CA 3’UTR的SNP位点rs141178472相互作用可能与大肠癌易感性有关。     

氟尿嘧啶缓释剂（中人氟安）大鼠腹腔内植入给药安全性的实验研究

目的　探讨大鼠腹腔内植入氟尿嘧啶缓释剂（中人氟安）的不良反应及其机制。方法　选取５６只健康雄性ＳＤ大鼠,随机分为生理盐水组、赋型剂对照组（Ｌ-聚乳酸）、中人氟安组（２０ｍｇ）和普通氟尿嘧啶（５-ＦＵ）注射液组（２０ｍｇ）,每组１４只。适应性饲养１周后开始实验。给药前、后检测各组大鼠体重、血常规及肝肾功能指标;给药第２１天处死大鼠,观察腹腔脏器的粘连情况,ＨＥ染色光镜观察腹腔脏器、粘连组织的病理学改变。结果　与生理盐水组大鼠的体重增长比较,中人氟安组无明显差异,而５-ＦＵ注射液组大鼠的体重增长缓慢（Ｐ＜０.０５）。给药第７天,中人氟安组大鼠外周血白细胞、中性粒细胞、红细胞和血小板浓度分别为（１１.４６±０.７１）×１０^９／Ｌ、（１.７５±０.１４）×１０^９／Ｌ、（６.４７±０.２８）×１０^１２／Ｌ和（６７０.００±７４.７９）×１０^９／Ｌ,与给药前水平相近;而普通５-ＦＵ注射液组大鼠外周血白细胞、中性粒细胞浓度分别为（８.７３±０.５４）×１０^９／Ｌ和（０.５２±０.１２）×１０^９／Ｌ,均低于给药前水平（Ｐ＜０.０５）。与给药前比较,给药第１４天各组大鼠外周血的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血肌酐和尿素氮均无明显变化。中人氟安组大鼠的腹腔脏器粘连率为５７.１４％,明显高于普通５-ＦＵ注射液组的２１.４３％（Ｐ＜０.０５）;其腹腔脏器间粘连程度亦较普通５-ＦＵ注射液组严重（Ｐ＝０.０４５）。ＨＥ染色光镜下观察中人氟安组大鼠的小肠、结肠和胃组织未见异常,而脾肝包膜、脾胃浆膜和胃肝包膜粘连紧密。结论　中人氟安大鼠腹腔内植入给药的毒性低,较为安全,但易引起大鼠腹腔脏器粘连,其粘连发生机制可能与药物颗粒植入方式及药物载体Ｌ-聚乳酸相关。     

汉防已甲素对人食管癌细胞株Ｅｃａ-１０９增殖抑制和诱导凋亡的机制研究

目的　探讨汉防已甲素（Ｔｅｔ）对人食管癌细胞株Ｅｃａ-１０９增殖和凋亡的影响。方法　将人食管癌细胞株Ｅｃａ-１０９设不同浓度Ｔｅｔ处理组,并设立空白对照组。采用ＭＴＴ法观察Ｔｅｔ对Ｅｃａ-１０９细胞体外生长的抑制作用;采用透射电镜、流式细胞术观察Ｔｅｔ对Ｅｃａ １０９细胞凋亡的影响;采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ、ＲＴ-ＰＣＲ观察Ｔｅｔ对Ｅｃａ-１０９细胞凋亡相关蛋白和ｍＲＮＡ表达的影响。结果　Ｔｅｔ对Ｅｃａ-１０９细胞的抑制作用呈时间 剂量依赖性（Ｐ＜０.０５）,Ｔｅｔ干预４８、７２ｈＥｃａ-１０９细胞的ＩＣ５０分别为（２０.８８６±０.２１５）μｍｏｌ／Ｌ和（１４.３５２±０.１０２）μｍｏｌ／Ｌ。３０μｍｏｌ／ＬＴｅｔ处理细胞４８ｈ后,电镜下可见细胞缩小,核裂解,凋亡小体形成。分别以２０、３０、４０μｍｏｌ／Ｌ的Ｔｅｔ干预Ｅｃａ-１０９细胞４８ｈ后,流式细胞术显示早期凋亡率依次为０.１２％、０.３４％和０.３１％,中晚期凋亡率依次为４.０２％、７.４３％和７７.４２％;ＲＴ-ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ显示,Ｂｃｌ-２蛋白和ｍＲＮＡ表达均随Ｔｅｔ浓度的增加而逐渐下调（Ｐ＜０.０５）,Ｂａｘ蛋白和ｍＲＮＡ表达均随Ｔｅｔ浓度增加而逐渐上调（Ｐ＜０.０５）,而ｐ５３蛋白水平在处理前后无明显变化。结论　Ｔｅｔ可以抑制食管癌Ｅｃａ-１０９细胞生长,促进其凋亡,其作用机制可能与下调Ｂｃｌ-２表达,上调Ｂａｘ表达有关。     

奈达铂联合顺铂对人食管癌细胞株（Eca-109）抑制作用机制的研究

目的研究奈达铂（NDP）联合顺铂（DDP）对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法采用MTT法检测NDP联合DDP对Eca-109细胞的增殖抑制率,中效原理法判断联合用药的相互作用;采用RT-PCR和蛋白印迹法分析Ki-67及Bax表达的变化。结果NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2IC50（NDP）＋1/2IC50（DDP）对Eca-109细胞的抑制率分别为（41.9±4.1）%、（47.4±2.9）%和（52.5±0.9）%;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67基因（蛋白）表达显著降低,而Bax基因（蛋白）表达显著增高。结论1/2IC50浓度NDP和DDP联合应用与两药IC50浓度单独应用相比,对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。     

8例肿瘤患者300半卧位置入PICC体会

传统PICC置管体位首选平卧位,其次坐位,不推荐30°的半卧位,临床中有许多因疾病的原因不能平卧或者不能长时间坐位并且外周血管条件差的患者,半卧位置管尤为重要.近期我科成功为8位30°半卧位患者以改良塞丁格技术置入PICC导管,认为30°半卧位置入PICC值得临床运用.     

尼妥珠单抗包被的四氧化三铁纳米颗粒对肺癌细胞放射增敏及磁共振显像的研究

目的尼妥珠单抗(Nimotuzumab)简称hR3,是表皮生长因子单克隆抗体,对多种实体瘤细胞具有明显的放疗增敏作用,四氧化三铁纳米粒子有良好的磁共振信号敏感性,文中探讨hR3包被的超胜磁性四氧化三铁纳米颗粒(superpara-magnetic iron oxide particles,SPIO)对肺癌A549细胞的放射增敏作用和对肺癌细胞体外磁共振成像(MRI)的影响。方法采用MTT法检测hR3-SPIO对肺癌A549细胞的毒性;用克隆形成抑制实验检测hR3-SPIO对肺癌A549细胞放射增敏的影响,用多靶单击方程拟合肺癌A549细胞的剂量存活曲线,求出放射增敏比(sensitization enhancement ratio,SER),评价增敏效果;将hR3-SPIO、hR3、SPIO分别与A549细胞孵育,同时设立对照组,体外MRI观察各组T2弛豫时间。结果不同浓度的hR3-SPIO作用于人肺癌A549细胞株24 h后,其细胞毒性呈剂量依赖性;hR3-SPIO对肺癌A549细胞有放射增敏作用,25μg/ml hR3-C225培养24 h的放射增敏比(SER)为1.20;体外MRI显示hR3-C225组T2弛豫时间低于其他3组(P<0.05)。结论 hR3-SPIO对肺癌A549细胞有毒性作用和有放射增敏性;hR3-SPIO对表皮生长因子受体过表达的肺癌细胞具有较好磁共振靶向成像作用。     

卡培他滨节拍化疗联合塞来昔布治疗晚期结直肠癌的临床疗效观察

目的:评价卡培他滨节拍化疗联合塞来昔布治疗晚期结直肠癌的临床疗效和不良反应.方法:对51例晚期结直肠癌患者应用卡培他滨节拍化疗联合塞来昔布治疗.卡培他滨500 mg,2次·d(-1),塞来昔布胶囊400 mg,2次·d(-1),4周为1个周期.患者至少完成2个周期,中位治疗周期数为4.8个.结果:51例患者无一例完全缓...     

不同孕期妊娠妇女尿碘水平调查分析

目的了解不同孕期妊娠妇女碘营养状况。方法采用过氧乙酸四甲基联苯胺氧化显色法检测2 687例不同孕期妊娠妇女尿碘水平。结果 2 687例不同孕期妊娠妇女尿碘值中位数为150μg/L,尿碘值在150~300μg/L者的比率为61.3%,尿碘值小于100μg/L者的比率为21.2%,而小于50μg/L者的比率为0.2%。其中,早、中、晚期孕妇尿碘值中位数分别为150μg/L、150μg/L、200μg/L;尿碘值在150~300μg/L者的比率分别为53.8%、60.9%、79.1%;尿碘值小于100μg/L者的比率分别为25.4%、21.8%、10.4%;尿碘值小于50μg/L者的比率分别为0.4%、0.1%、0.0%。结论南京地区不同孕期妊娠妇女的碘营养水平是适宜的。仍有部分孕妇存在碘摄入不足的情况。故尿碘的检测对及时发现碘摄入不足的孕妇并指导其正确补碘有着重要的意义。     

重组人生长激素对裸鼠人胃癌移植瘤组织生长及Janus 激酶2-信号转导与转录激活因子3通路的影响

目的探讨重组人生长激素（rhGH）对荷人胃癌裸鼠移植瘤生长及Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路相关的肿瘤血管生成因子的影响。方法采用免疫细胞化学染色法筛选出生长激素受体阳性（GHR^＋）和阴性（GHR^-）细胞株各1株,分别接种于裸鼠皮下,建立GHR不同表达状态胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,将裸鼠随机分为对照组、低剂量rhGH组和高剂量rhGH组,连续给药14d,观察并记录裸鼠体重及肿瘤体积的变化,RT-PCR、Western-bolt检测肿瘤血管生成因子mRNA及蛋白表达。结果SGC-7901细胞株GHR强阳性表达,MKN-45不表达GHR。SGC-7901接种裸鼠,低剂量rhGH组和高剂量rhGH组肿瘤体积[（1．141±0．234）和（2．106±0．260）cm^3]较对照组[（0．6124±0．156）cm^3]增大（P=0．034,P=0．001）,高剂量rhGH促增长效应最为显著（P=0．043）,各组间裸鼠体重差异无统计学意义;低剂量rhGH可促SGC-7901血管生成因子mRNA表达,GHR、Janus激酶2、信号转导与转录激活因子3、血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子1et（HIF-1α）、成纤维细胞生长因子和基质金属蛋白酶2（MMP-2）的P值分别为：0．001、0．011、0．042、0．045、0．040、0．002和0．003,但高剂量组未增加;低剂量rhGH组血管生成因子的蛋白表达水平明显升高,。磷酸化信号转导与转录激活因子3、信号转导与转录激活因子3、VEGF、HIF-lα和MMP-2的P值分别为：0．015、0．003、0,010．0,008和0．005,高剂量组VEGF、HIF-lα和MMP-2较低剂量组表达增加（P=0．012,P=0．025,P=0．046）。MKN-45接种裸鼠,低剂量rhGH组和高剂量rhGH组裸鼠体重[（24．94±0．517）和（26．97±0．686）g]较对照组[（22．78±0．418）g]增加（P=0．040,P=0．012）,肿瘤体积、血管生成因子mRNA及蛋白水平各组之间差异无统计学意义。结论rhGH促GHR^＋的SGC-7901移植瘤生长,并促肿瘤血管生成因子的分泌,对GHR^-的MKN-45则无此效应;GHR的表达情况是rhGH影响肿瘤生长及肿瘤血管生成因子表达的关键靶点之一,Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路是其可能途径。