高效液相色谱法同时测定霉酚酸及其葡糖苷酸的血浆浓度及临床应用

目的建立同时检测人血浆中霉酚酸（MPA）及其葡糖苷酸代谢物浓度的高效液相色谱法（HPLC）,并将其应用于肾移植术后患者霉酚酸酯（MMF）的治疗药物监测。方法以蛋白沉淀剂甲醇-5％硫酸锌（70：30,V：V）溶液进行血浆样品药物提取;内标物为萘普生;色谱柱为C18（4．6mm×250mm,5μm）;流动相为甲醇-水（含0．1％三氟乙酸）（65：35,V：V）;流速0．8mE／rain;检测波长215nm。结果MPA与其葡糖苷酸代谢物MPAG的线性范围分别为0．1—50mg／L及0．5—200mg／L,r2〉0．999;绝对回收率分别为63．95％～83．76％及57．14％-66．19％;两者日间及日内的相对标准偏差（RSD）均小于10％。6例。肾移植术后早期患者服用1．5g/d霉酚酸酯胶囊达药物稳态后,MPA及MPAG的Tmax分别为（1．08±0．74）h及（2．58±1．24）h,Cmax分别为（21．33±8．61）mg／L及（106．98±31．91）mg／L,AUC0-t分别为（58．73±16．26）及（833．32±215．03）mg·L^-1·h^-1。结论HPLC检测方法准确、灵敏、特异性好,并成功应用在。肾移植术后早期患者的治疗药物监测（TDM）中。     

HTR3B基因多态性与舒芬太尼引起的恶心和呕吐的相关性研究北大核心CSCD

目的探讨HTR3B基因多态性及临床指标对舒芬太尼引起恶心呕吐的影响。方法纳入100例进行腹部手术且术后使用舒芬太尼自控镇痛的患者。对HTR3B基因(rs1176744、rs3782025和rs1672717)进行基因分型、并结合年龄、性别、吸烟习惯等临床资料,分析各种因素对患者出现阿片类药物引起的恶心和呕吐(OINV)的影响。结果本研究中,27例患者出现OINV。对于HTR3B rs1176744,携带A/A纯合子是OINV发生的危险因素(OR=1,P=0.032,占OINV患者88.9%),其余单核苷酸多态性(SNPs)与OINV均无相关性。多因素Logistic回归方程纳入了年龄层、HTR3B rs1176744基因多态性和舒芬太尼剂量,可以解释本研究人群中21.5%的OINV个体差异。结论 HTR3B rs1176744基因多态性是舒芬太尼引起恶心呕吐的独立预测因素,有望成为改善临床用药方案的依据。     

缰核对促睡眠区视前区-下丘脑前部的调节作用

目的: 观察缰核损毁及催眠药唑吡坦对视前区-下丘脑前部（PO/AH）腺苷和5-羟色胺（5-HT）相关基因mRNA表达的影响,探讨缰核在PO/AH促睡眠调节中的作用。方法: 以30只雄性Wistar大鼠为实验动物,直流电损毁缰核或灌胃给予催眠药唑吡坦建立缰核损毁大鼠(n=15)和唑吡坦处理大鼠(n=15)两种动物模型,随后随机将大鼠分为缰核假手术组(n=7)、缰核损毁组(n=8)、生理盐水对照组(n=7)和唑吡坦处理组(n=8)。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测各组大鼠PO/AH内腺苷和5-HT相关基因mRNA的表达水平。结果: 与假手术组相比,缰核损毁组大鼠PO/AH内除腺苷激酶mRNA表达的水平轻微升高（P>0.05）外,腺苷A1受体及5-HT相关基因mRNA的表达水平均明显上调（P<0.05）。与生理盐水对照组相比,唑吡坦处理组大鼠PO/AH内的5-HT相关基因mRNA表达明显降低（P<0.05）;腺苷激酶的表达虽下调但无显著性差异（P>0.05）,而腺苷A1受体的表达仅呈现轻微的上调（P>0.05）。结论: 缰核对PO/AH的促睡眠过程具有调节作用,并且是通过腺苷和5-HT途径在此过程中发挥其作用。     

侧脑室注射腺苷对大鼠缰核痛神经元自发放电活动的影响

目的 观察腺苷(Ado)对大鼠痛神经元放电活动的影响及可能机制.方法 采用侧脑室注射及记录神经元胞外放电的方法,观察Ado对缰核痛神经元单位放电活动的影响.结果 侧脑室给予的Ado可引起缰核痛兴奋神经元(PEN)放电频率明显抑制和痛抑制神经元(PIN)放电明显增强.而Ado A1受体阻断剂8-环戊-1,3-二丙基嘌呤(DPCPX)能够阻断Ado在缰核引起的这种效应.结论 Ado具有降低大鼠缰核痛神经元对体外刺激的敏感性作用,其机制可能与缰核内的Ado A1受体介导有关.     

慢性阻塞性肺疾病血小板5-羟色胺变化及意义

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血小板5-羟色胺(5-HT)水平变化及意义.方法 按入选、排除标准,选择COPD患者51例,对照组为同期健康体检者49例.测定COPD组第1秒用力呼气量,用力肺活量及第1秒用力呼气量/用力肺活量;用超声多普勒方法测定肺动脉收缩压(VASV);用反相高效液相方法检测COPD组和对照组血小板5-HT浓度.结果 COPD组无论是急性发作期还是稳定期血小板内5-HT浓度均明显低于对照组(P＜0.01);COPD组患者不同严重程度分级(Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级)对5-HT浓度没有明显影响;COPD组伴有肺动脉高压(PAH)患者的血小板5-HT水平明显低于COPD不伴有PAH患者(P＜0.05);在COPD伴PAH患者中,轻度和中度PAH患者血小板5-HT没有明显差别,重度PAH患者5-HT浓度有降低趋势,但没有达到统计学意义.血小板5-HT浓度与PASP具有负相关性(相关系数f=-0.368).结论 在COPD病理状态下,尤其是伴有肺动脉高压的COPD,血小板内5-HT浓度明显降低,且与肺动脉高压有相关性.5-HT作为一种血管活性物质,其可能对促进COPD形成及诱发晚期PAH有重要作用.     

痛经康口服液对痛经大鼠子宫组织中催产素受体及加压素受体mRNA的表达的影响

目的观察痛经康口服液(延胡索、当归、川芎、香附等)抗痛经作用及相关机制。方法大鼠股部皮下注射己烯雌酚,1次/d,连续11 d,其中第1天及第11天注射量为0.8 mg/只,第2天至第10天注射量为0.4 mg/只。于最后1次给药40 min后,所有大鼠按4 U/kg体质量腹腔注射缩宫素致大鼠扭体反应。采血,处死,取子宫组织采用RT-PCR方法检测大鼠子宫组织催产素受体(OTR)及加压素受体(VPR)mRNA的表达情况。结果痛经康低、中、高剂量组出现扭体反应的动物数量均较模型对照组少。田七痛经胶囊组、痛经康中、高剂量组出现扭体反应潜伏期较模型对照组延长,30 min扭体反应次数较模型对照组减少,其中痛经康中剂量组与模型对照组比较扭体反应潜伏期明显延长(P<0.01),但扭体反应次数无统计学差异。痛经康低、中、高剂量组可不同程度降低痛经大鼠子宫催产素及加压素受体mRNA表达,与模型组比较差异显著(P<0.01,P<0.05)。结论痛经康口服液具有明显的抗痛经作用,机制可能与下调痛经大鼠子宫催产素及加压素受体表达有关。     

小鼠胚胎干细胞药物代谢酶CYP3a11基因敲除的实验研究

目的研究小鼠胚胎干细胞药物代谢酶CYP3a11基因的敲除。方法根据已知小鼠的CYP3a11基因组DNA序列,从129品系小鼠E14胚胎干细胞基因组DNA中,通过PCR的方法分别获得用于构建基因敲除载体的0.65kb的5'-短臂(short arm,SA)和(3.3+4)kb的3'-长臂(long arm,LA)片段,通过常规分子克隆技术,构建完成针对小鼠药物代谢酶CYP3a11基因的替代型基因敲除载体pCR-CYP3a11_KO,并对载体进行酶切鉴定。将线性化的pCR-CYP3a11_KO载体通过电穿孔技术转入E14胚胎干细胞。G418药物筛选4～6周直至克隆形成,用PCR和Southern blot技术对筛选出的细胞克隆进行鉴定。结果酶切结果表明基因敲除载体pCR-CYP3a11_KO DNA序列正确;转染后的E14胚胎干细胞经过G418筛选后,存活的细胞可形成单克隆集落,经过PCR和Southern blot技术鉴定,其中有5个单克隆被证实CYP3a11基因已被敲除。结论成功构建了小鼠CYP3a11基因敲除载体,并在小鼠E14胚胎干细胞的CYP3a11基因敲除中获得阳性克隆。     

雷公藤多苷片对类风湿关节炎大鼠肠道菌群的影响

摘要：目的:考察胶原诱导的关节炎（CIA）大鼠给予雷公藤多苷片6周后,对关节炎症状、主要脏器和肠道菌群的影响。方法:选取雄性SD大鼠随机分为正常组和CIA模型组,其中CIA模型组采用牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂诱导类风湿关节炎。造模成功后,CIA大鼠灌胃给予溶剂或雷公藤多苷片混悬液(90 mg·kg-1),给药期间观察大鼠的一般状况并记录足趾容积。6周后,检测雷公藤多苷片的抗炎效果,以及大鼠的肝肾情况和肠道菌群变化。结果:与模型组相比,给予6周雷公藤多苷片后,CIA大鼠关节肿胀程度减轻（P<0.05）,炎症因子IL-6水平降低（P<0.01）,TNF-α水平降低（P<0.05）;给药期间大鼠未见异常症状;肝功能及病理切片与正常对照组无明显差异,肾脏发生轻微肾小球囊腔狭窄、粘连;肠道菌群结构发生改变,其中有益菌群增加,条件致病菌群减少。结论:雷公藤多苷片长期给药对CIA大鼠的抗炎治疗作用与对肠道菌群的影响有关。     

重组人胸腺肽α1对大鼠肝组织细胞色素P450基因表达的影响

目的评价重组人胸腺肽α₁（rh-Tα₁）对大鼠肝组织细胞色素P450（CYP450）基因表达的影响。方法SD大鼠经腹腔注射不同剂量的rh-Tα₁（150、300和600μg/kg）,14 d后从肝组织中提取总RNA,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测CYP3A1、CYP1A2和CYP2E1 mRNA的表达。结果与空白对照组相比,rh-Tα₁可显著诱导CYP3A1、CYP 1A2和CYP 2E1的基因表达。结论rh-Tα₁通过诱导CYP450酶系的mRNA表达影响其活性。