内皮素基因的克隆与表达调控研究

为了阐明ＥＴ在高血压和动脉粥样硬化发病过程中的作用，研究ＥＴ基因表达的调控机制是必要的。本研究用ＰＣＲ方法分别合成ＥＴｃＤＮＡ和ＥＴ基因５’侧翼区ＤＮＡ片段后，以此为核酸杂交和检查ＤＮＡ和蛋白质相互作用的探针，观察了肿瘤促进剂ＴＰＡ对ＥＴ基因表达的影响，探讨了ＴＰＡ和ｃ－ｊｕｎ在诱导ＥＴ基因表达之间的相互关系。     

基因组和蛋白质组学与中医药研究

基因组学和蛋白质组学技术是当今世界发展最快和影响最深远的生物高新技术之一.利用基因组学和蛋白质组学技术筛查中药作用的靶标、鉴定中药新的有效成分、研究中医药作用机制,可以弥补传统方法的缺陷.为此,将基因组学和蛋白质组学的理论和研究方法应用于中医药研究,对开辟中医药研究新领域,加快传统中医药与现代生命科学技术的对接,推动中医药走向世界具有十分重要的意义.     

黄芪、当归对粘着斑激酶表达和活化的抑制作用及其在防治血管内皮剥脱后再狭窄中的作用

经皮腔内冠状动脉成形术 (ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌｃｏｒｏｎａｒｙａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ ,ＰＴＣＡ)后血管再狭窄的发生与血管平滑肌细胞 (ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ )增殖、迁移以及细胞外基质(ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ )的大量合成和重构有关。粘着斑激酶 (ｆｏｃａｌａｄｈｅｓｉｏｎｋｉｎａｓｅ ,ＦＡＫ)是一种非受体酪氨酸蛋白激酶 ,介导细胞外信号由整合素向细胞内转导的过程。ＦＡＫ的磷酸化激活以及由此产生的下游一系列蛋白质的磷酸化 ,是…     

河北省汉族人群CYP450 2C9和VKORC1基因多态性与华法林剂量相关性研究

目的 了解河北省汉族人群CYP450 2C9和VKORC1的基因多态性分布与其他不同民族之间的差异,探讨CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G基因多态性与华法林剂量的关系.方法 随机选取门诊体检的健康人487名,检测CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G基因型及其分布频率,并与国外多个民族的CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G的基因多态性进行比较.选取服用华法林稳定剂量的患者101例,检测其基闪型并结合其个体差异和华法林的稳定剂量进行分析.结果 487名正常人CYP450 2C9*3+1075C/A基因型中,AA型为449名(92.2%),AC型36名(7.4%),CC型2名(0.4%);VKORC1-1639A/G基因型中AA型为415名(85.2%),GA型72名(14.8%),未发现GG型(0.0%).采用多元逐步回归得出有关华法林稳定剂量的方程:In(D)=0.346+0.017(体重)-0.376(CYP450 2C9~*3+1075C/A)+0.148(VKORC1-1639A/G)-0.002(年龄)(r=0.827,P=0.02).结论 汉族人群CYP450 2C9和VKORC1存在明显的基因多态性.CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G的基因型和患者个体之间的体重、年龄差异是影响华法林稳定剂量的因素.     

引起突变和癌的环境化学物质的鉴定

环境诱变剂(天然的和人工的)对DNA的损伤可能是癌变和先天性缺陷的主要原因。人类的诱变剂包括食物的天然化学物质、人工合成的化学物质及其某些复杂的混合物;能诱发人类癌变的环境诱变剂则包括纸烟的焦油、紫外线、石棉以及乙烯氯、1,2-二氯乙烷和多种杀虫药等化学物质。另外大部分氯化和溴化化合物都是动物的致癌剂,因此也很可能是     

收缩蛋白在血管新生内膜形成过程中的表达变化及其对血管收缩力的影响

目的：为了探讨两种收缩蛋白SM α-actin和SM22α在新生内膜形成过程中的表达变化及与血管收缩反应性之间的关系。方法： 在建立大鼠颈总-胸腹主动脉血管内皮剥脱后内皮增生模型的基础上，用Western blot和免疫组化检测两种收缩蛋白的动态变化，用透射电镜观察VSMC肌丝和用生物法测定血管收缩反应性。结果： 血管内皮剥脱后，中膜SM α-actin和SM22α的表达下降，以术后7-14 d最低，VSMC内肌丝由致密变为稀疏，由束状变为网状，但是血管的收缩反应性显著高于对照组（P<0.05）。结论： 内皮剥脱后，VSMC的增生及新生内膜的增厚可引起受损血管收缩反应性的升高，这是内皮损伤促发动脉硬化的重要原因。     

益气健脾中药对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨益气健脾中药血清体外诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法：采用缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nicked labeling,TUNEL)分析、透射电镜、流式细胞仪分析、DNA电泳分析检测细胞凋亡；应用Northern印迹检测bcl-2、c-myc和p53基因表达活性。结果：经中药血清处理的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC)，可出现典型的凋亡特征，DNA电泳呈梯状图谱；流式细胞仪分析显示G0／G1期细胞阻滞现象，亚二倍体凋亡细胞增多，出现典型的凋亡峰，细胞凋亡率与中药血清浓度具有量效关系。杂交结果提示，30％中药血清可抑制抗凋亡基因bcl-2的表达，上调促凋亡基因c-myc和p3 mRNA水平。结论：益气健脾中药通过影响凋亡相关基因bcl-2、c-myc和p53的表达活性而诱导VSMC凋亡。     

从肾骨髓血脑一体论看中西医结合理论体系的可能形式

中西医结合是在近、现代这个特殊时代背景下,中西文化、两个文明体系碰撞、交流、兼并、融合的特有产物。建立中西医结合理论体系是医学实践的需要,并非个人主观意愿。中西两个医学的兼并融合互补是中西医结合医学的本质特征。肾骨髓血脑一体论是兼并融合互补的标志之一。根据中西医结合医学的本质特征分析,并以“肾-骨-髓-血-脑”一体论为例,推测中西医结合医学理论体系的可能形式之一是离不开中医却又高于中医;其二是离不开西医却不拘泥于西医;其三中西医结合医学理论形式还应当符合客观对象现代科学认识形式;其四必须摆脱哲学困扰却又需要哲学指导。     

丹参对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶和骨桥蛋白基因表达及细胞增殖的影响

目的：探讨丹参（SAL）对氧化低密度脂密度（ox-LDL)诱导体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）基质金属蛋白酶（MMP）和骨桥蛋白（OPN）基因表达的影响，以提示SAL抑制VSMC增殖和迁移的作用机理。方法：应用Northern,Western印迹和斑点杂交检测SAL对MMP-2，MMP-9和OPN表达的影响；采用^3H-TdR掺入实验，检测VSMC增殖活性。结果：SAL或复方丹参（SALC）注射液对ox-LDL诱导的MMP-2和MMP-9表达以及OPN的合成与分泌具有明显的下调作用。且可显著抑制VSMC的DNA合成；将ox-LDL与SAL或SALC注射液共孵育1h后再处理VSMC，ox-LDL对上述基因表达和VSMC增殖的诱导作用基因消化。结论：SAL抗VSMC增殖与迁移的作用与其调整基质代谢有关。     

益气活血补肾方药对体外培养的肾小球系膜细胞增殖及c-myc基因表达的影响

目的:探讨益气活血补肾方药治疗系膜增殖性肾炎的机制。方法:用该方药灌胃大鼠后采血分离含中药血清(中药血清),借~3H-TdR 掺入实验和 Northem 印迹分析技术,观察该方药对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖及原癌基因 c-myc 表达的影响。结果:中药血清能明显抑制体外培养的 MC 增殖;用中药血清或对照鼠血清处理 MC1h 后,MC c-myc 基因表达活性明显降低,说明该方药对 MC 增殖的抑制效应可能与抑制 MC 原癌基因 c- myc 表达有关。结论:该方药可能对系膜增殖性肾炎具有良好的治疗作用。