山茱萸注射液中马钱素与莫诺苷的药代动力学研究

目的 :建立高效液相色谱法同时测定血浆中山茱萸单体成分马钱素和莫诺苷的浓度 ,研究小鼠静注和灌胃给药后体内药代动力学特点。方法 :采用DiamonsilTMC₁₈色谱柱 (4.6mm× 250mm ,5 μm) ,流动相乙腈 甲醇 0.2 %甲酸 (12∶8∶80 ) ,流速 1.0mL·min^-1,检测波长 237nm。结果 :马钱素和莫诺苷的回归方程分别为Y=1.76 4X-0.0615和Y=1.242X-0.00199,r=0.9999(n =9) ;马钱素和莫诺苷的线性范围分别为 0.38～68.2 5mg·L^-1和 0.66～117.2 2mg·L^-1;其最低检测浓度分别为 0.10,0.16mg·L^-1。马钱素的平均回收率及相对标准偏差分别为99.6% (2.0% ) ,102.0% (1.0% ) ,87.9% (7.2%) ,莫诺苷的平均回收率及相对标准偏差分别为 99.2% (2.5 % ) ,104.1% (1.2%) ,92.7%(4.2%) ,该法的日内和日间精密度 (RSD)均小于 6.8%。小鼠静脉注射山茱萸注射液后 ,药动学行为均符合二室模型 ,马钱素和莫诺苷的主要药动学参数T_1/2(α) ,T_1/2(β) ,K₂₁,K₁₂ ,K₁₀ ,V(c) ,AUC ,CL分别为3.2 ,2 5 .1min ,5.997,4 .981,3.564h^-1,0 .5 5 1L·kg^-1,13.59mg·L^-1·h ,1.965L·kg^-1·h^-1;3.6 ,21.5min ,5.926,3.833,3.797h^-1,0.647L·kg^-1,2 7.15mg·L^-1·h,2.457L·^-1·^-1。结论：首次建立了山茱萸注射液中马钱素和莫诺苷血药浓度的HPLC测定方法，阐明了山茱萸中马钱素和莫诺苷的药代动力学参数，方法的专属性强，结果可靠。     

滋补肝肾、益气活血方药对血管平滑肌细胞增殖及相关基因表达的影响

目的:采用血清药理学方法研究滋补肝肾、益气活血方药对内皮素(ET)诱导的自发性高血压大鼠(SHR)和WKY大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及相关基因表达的影响。方法:采用3HTdR掺入实验检测VSMC增殖状态,应用Northern杂交、反转录聚合酶链反应(RTPCR)检测中药血清对VSMC诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因和ET诱导的cjun、增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达活性的影响。结果:中药血清可明显抑制ET对VSMC的促丝裂作用(P<005);抑制原癌基因cjun和PCNA基因表达,促进iNOS转录。结论:滋补肝肾、益气活血方药通过调节iNOS和细胞增殖相关基因的表达活性进而阻止VSMC增殖。     

血管平滑肌细胞粘附分子的表达与心血管疾病的关系

粘附分子是指由细胞合成、存在于细胞膜或细胞外,介导细胞间、细胞与细胞基质粘附的一大类分子.与心血管疾病有关的粘附分子包括整合素家族、免疫球蛋白超家族和选择素家族.免疫球蛋白超家族成员细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和血管细胞粘附分子(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)在白细胞向激活的内皮细胞粘附过程中起重要作用.血管内皮细胞表达粘附分子的作用已比较清楚,但几年前有人发现在动脉粥样硬化血管壁的内膜平滑肌细胞也表达ICAM-1和VCAM-1,这就引起了与这些分子相关问题的探讨.本文就ICAM-1和VCAM-1在血管平滑肌细胞表达的调节及在动脉粥样硬化(AS)和血管再狭窄发生、发展中的作用作一综述.     

论中医临床医学现代化发展战略

中医临床医学现代化,是整个中医现代化进程中的关键步骤,也是检验中医学是否走向现代化的标志之一。中医临床医学现代化的发展战略,应着重于传病微观辩证,增强理论的自然科学属性,提高诊疗手段的科技含量和临床疗效的飞跃等方面,正确把握中医临床医学现代化的发展战略,对于中医学的发展将起到积极的推进作用。     

用含底物SDS-PAGE检测明胶酶活性

将明胶加入ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶中,电泳后样品中所含明胶酶按分子量大小不同停留于凝胶中的特定位置。用ＴｒｉｔｏｎＸ－１００除去ＳＤＳ使酶复性后,明胶酶便可分解凝胶中的底物,底物被分解处考马斯亮蓝染色时不着色,因此在蓝色背景下可见酶所在位置呈白色条带,根据白色条带的深浅和宽窄可判断酶活性的高低,用此方法检查了大鼠不同组织中的明胶酶活性及传代培养对血管平滑肌细胞分泌明胶酶的影响。结果显示,大鼠不同组织     

白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α对血管平滑肌细胞及基质金属蛋白酶-2骨桥蛋白基因表达的影响

促炎细胞因子白细胞介素－ １β和肿瘤坏死因子－ α是血管平滑肌细胞的强效促分裂原,为了探讨其促血管平滑肌细胞增殖是否与细胞外基质降解及粘附蛋白合成有关,本文以体外培养的血管平滑肌细胞为研究对象,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹及基质金属蛋白酶－ ２ 活性酶图分析方法动态观察白细胞介素－ １β、肿瘤坏死因子－ α对血管平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶－２ 及骨桥蛋白的影响。结果发现,白细胞介素－１β和肿瘤坏死因子－ α均可显著诱导基质金属蛋白酶－ ２ 及骨桥蛋白的基因表达,血管平滑肌细胞受两种细胞因子刺激１２ ｈ 后,基质金属蛋白酶－２ 及骨桥蛋白ｍＲＮＡ表达活性最高,分别达到对照细胞的３ 倍左右和１０ 倍以上。对细胞培养基基质金属蛋白酶活性进行酶图分析的结果发现,肿瘤坏死因子－α及白细胞介素－１β作用于血管平滑肌细胞１２ 及２４ ｈ 时,基质金属蛋白酶降解明胶的活性约为对照细胞培养基的２ 倍和１．５ 倍。提示这类细胞因子可同时在多位点上对血管平滑肌细胞的迁移与增殖发挥促进作用。     

基质金属蛋白酶-2及其组织抑制剂与大肠癌侵袭和转移的关系

大肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤之一 ,肿瘤的侵袭和转移是患者死亡的主要原因。近年来对肿瘤侵袭和转移机制的研究发现 ,细胞外基质(extracellularmatrixECM )的降解是肿瘤侵袭和转移过程中关键的一步 ,而基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinasesMMPs)在这一过程中起了十分重要的作用。国外研究表明 ,多种肿瘤组织中存在MMPs的高表达和高活性现象。体内天然存在的组织金属蛋白酶抑制剂 (tissueinhibitorsofmetalloproteinasesTIMPs) ,可以抑制所有MMPs的活性 ,影响肿瘤的侵袭和转移等过程。以往研究发现 ,大肠癌组织中含有较多…     

欧亚旋覆花总黄酮类提取物抑制内皮损伤诱导的血管氧化应激反应

目的:观察欧亚旋覆花总黄酮类提取物(FE)对大鼠血管球囊损伤诱导的氧化应激反应的影响.方法:采用主动脉球囊剥脱后血管狭窄大鼠模型,将实验动物分成四组:对照组、模型组、FE组和阳性药物(卡托普利,CAP)组;采用常规HE染色法观察血管的形态学变化以确定最佳给药浓度并对比FE与CAP的疗效,分别采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定大鼠血清中丙二醛(MDA)的含量,用黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力,用二氢乙锭(DHE)测定超氧阴离子(O_2~(·-))的水平,用免疫组化和Western blot检测血管组织中的SOD表达变化.结果:FE的有效剂量为50 mg·kg~(-1)·d.在此浓度时,FE可显著降低血管球囊损伤大鼠血清中MDA含量(P＜0.01),提高血清和血管组织中SOD的活力(P＜0.05),降低血管组织中O_2~(·-)水平.因此,FE对损伤诱导的血管内膜增生具有一定的抑制作用,达到与阳性对照药物相似的疗效.结论:从欧亚旋覆花中提取的FE可通过提高血管系统抗氧化活性而抑制损伤诱导的氧自由基生成,这可能是该药物抑制内皮剥脱诱导的血管内膜增生的机制之一.     

白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α对血管平滑肌细胞及基质金属蛋白酶-2骨桥蛋白基因表达的影响

促炎细胞因子白细胞介素－１β和肿瘤坏死因子－α是血 滑肌细胞的强效促分裂原,为了探讨其促血管平滑肌细胞增殖是否与细胞外基质降解及粘附事成有关,本文以体外培养的血管平滑肌细胞为研究对象,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹及其质金属蛋白酶－２及骨桥蛋白的影响。结果发现,白细胞介素－１β和肿瘤坏死因子－α均可显著诱导基质金属蛋白本科及骨桥蛋的基因表达,血管平滑肌细胞受两种细胞因子刺激１２小时后,基质金属蛋白酶－２     

新生小牛血清、碱性成纤维细胞生长因子和肝素对大鼠血管平滑肌细胞骨桥蛋白基因表达的影响

为探讨新生小牛血清和碱性成纤维细胞生长因子促血管平滑肌细胞迁移与肝素抑制新生小牛血清促血管平滑肌细胞迁移的分子机制,采用反转录聚合酶链反应方法合成骨桥蛋白ｃＤＮＡ探针,以羟基脲抑制新生小牛血清、碱性成纤维细胞生长因子对血管平滑肌细胞的促增殖作用后,观察其对骨桥蛋白基因表达及能量转换的影响。结果发现,新生小牛血清、碱性成纤维细胞生长因子均能显著诱导血管平滑肌细胞骨桥蛋白基因表达,在两种因素作用下肌酸激酶活性分别较对照组升高７６％和６１％,具有显著性差异（Ｐ＜０．０５）;在肝素与新生小牛血清共同作用下,骨桥蛋白基因表达减弱,细胞肌酸激酶活性也较新生小牛血清单独作用时降低２２％。提示新生小牛血清和碱性成纤维细胞生长因子促进血管平滑肌细胞迁移以及肝素抑制新生小牛血清促血管平滑肌细胞迁移的作用与细胞内骨桥蛋白基因表达改变和能量转换有关。