2009年上海地区细菌耐药性监测

Soriano A,Marco F,Martinez JA,et al.Influence of vancomycin minimum inhibitory concentration on the treatment of methicillin-resistant Staphylococcus aureus bacteremia[J].Clin Infect Dis,2008,46(2):193-200.

Sun W,Chen H,Liu Y,et al,Prevalence and characterization of heterogeneous vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus isolates from 14 cities in China?[J].Antimicrob Agents Chemother,2009,53(9):3642-3649.

Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Eighth Informational Supplement,1998,M100-S8.

Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Sixteenth Informational Supplement,2006,M100-S16.

Lahey Clinic.Amino acid sequences for TEM,SHV and OXA extended-spectrum and inhibitor-resistant β-lactamases[EB/OL].URL:http://www.lahey.org/studies/webt.asp.

Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Twentieth Informational Supplement,2010,M100-S20.

沈继录,朱德妹,吴卫红,等.革兰阴性杆菌碳青霉烯酶产生与细菌耐药性关系的研究[J].中华检验医学杂志,2008,31(4):408-414.

Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Twentieth Informational Supplement(June 2010 Update),2010,M100-S20-U.

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Agilent2100分析仪在鲍曼不动杆菌同源性分析中的应用

目的Agilent 2100分析仪在基因组外非编码重复序列片段的聚合酶链反应(REP-PCR)同源性分析中的应用并评估该系统。方法应用REP设计引物并进行PCR扩增,用Agilent2100分析仪DL7500 Labch ip芯片进行产物分析。结果51株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌中,耐药菌株分为4大型别(A、B、C、D),其中A型共48株,分别为A1型33株,A2型13株,A3型和A4型各1株;B、C、D型各1株;18株碳青霉烯类敏感菌株中,有2株与A1型别一致,其他菌株型别都不一致。结论基于REP-PCR的Agilent2100同源性分析具有快速、易于操作、高重复性和高分辨率、结果定量处理和多种形式输出等优点,可作为临床同源性分析鉴定和分型的一线工具。     

奇异变形杆菌产超广谱β内酰胺酶基因检测

目的 了解我院2007年1月-2008年6月临床分离119株奇异变形杆菌产ESBLs检出率,并分析研究其耐药性和耐药基因分型. 方法用药敏纸片法(K-B法)对119株奇异变形杆菌进行抗菌药敏试验,并作ESBLs初筛和确证试验.对其中产ESBLs菌用PCR方法检测TEM、CTX-M-1组、CTX-M-2组、CTX-M-9组和SHV 5种基因并对其进行测序.结果 119株奇异变形杆菌ESBLs确证试验阳性率为20.2%,产ESBLs菌株对头孢呋辛、头孢唑林、头孢克洛和哌拉西林等耐药率均为100%,对头孢噻肟、庆大霉素和环丙沙星耐药率分别为95.5%、95.2%和86.4%.24株表型确证试验产ESBLs菌中,TEM基因检出率为70.8%,CTX-M-1组基因检出率为54.2%,CTX-M-2组基因检出率为33.3%,未检测到CTX-M-9组和SHV基因.经DNA测序,17株产TEM型ESBLs奇异变形杆菌均属于TEM-1型基因,13株CTX-M-1组和8株CTX-M-2组奇异变形杆菌分别为CTX-M-3型和CTX-M-2型基因,未检测到TEM型ESBLs菌株.结论 奇异变形杆菌中产ESBLs菌株检出率较高,产ESBLs菌对头孢菌素类、喹诺酮类、磺胺类和氨基糖苷类等抗菌药物呈多重耐药性.     

宋内志贺菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性研究

目的 检测宋内志贺菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药情况,探讨染色体介导DNA旋转酶A亚单位(gyrA)和拓扑异构酶ⅣC亚单位(parC)基因突变或(和)质粒介导qnrA基因存在与宋内志贺菌耐喹诺酮类药物的相关性.方法 用K-B纸片扩散法对58株宋内志贺菌进行耐药性检测;PCR法检测宋内志贺菌喹诺酮耐药决定区(QRDR)相关gyrA、parC基因,并根据药敏结果 挑选5株菌扩增片段进行DNA测序;PCR法扩增qnrA基因片段.分析宋内志贺菌gyrA、parC基因突变或(和)qnrA基因存在与喹诺酮类药物耐药性的关系.结果 宋内志贺菌对萘啶酸的耐药率高达94.8%.58株宋内志贺菌中,8株检出qnrA基因,5株测序gyrA、parC基因的菌株中,4株萘啶酸耐药菌株均在gyrA 83位发生有义突变TCG(Ser)→TTG(Leu),但未发生parC基因突变,gyrA基因突变菌株对萘啶酸全耐药.qnrA基因阳性菌株对5种喹诺酮类药物抑菌圈中位数比较都缩小;对NAL、氧氟沙星的耐药率高于qnrA基因阴性菌株(P<0.05),差异有统计学意义.结论 gyrA Ser83分→Leu突变是导致宋内志贺菌临床分离株对喹诺酮类药物耐药的关键突变,宋内志贺菌若携带质粒介导qnrA基因则会导致对喹诺酮类药物的敏感性下降,若两者同存也可引起喹诺酮类药物耐药增强,除萘啶酸耐药外对其他喹诺酮类药物也可呈中介.     

Agilent2100分析仪在鲍曼不动杆菌同源性分析中的应用

目的Agilent2100分析仪在基因组外非编码重复序列片段的聚合酶链反应（REP-PCR）同源性分析中的应用并评估该系统。方法应用REP设计引物并进行PCR扩增,用Agilent2100分析仪DL7500 Labchip芯片进行产物分析。结果51株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌中,耐药菌株分为4大型别（A、B、C、D）,其中A型共48株,分别为A1型33株,A2型13株,A3型和A4型各1株;B、C、D型各1株;18株碳青霉烯类敏感菌株中,有2株与A1型别一致,其他菌株型别都不一致。结论基于REP-PCR的Agilent2100同源性分析具有快速、易于操作、高重复性和高分辨率、结果定量处理和多种形式输出等优点,可作为临床同源性分析鉴定和分型的一线工具。     

女性抗苗勒管激素的临床应用新进展

女性抗苗勒管激素(anti-Müllerrian hormone, AMH)来源于卵泡发育早期的卵泡颗粒细胞,在卵泡成熟调控中起重要的作用。AMH是目前评估卵巢储备功能以及多囊卵巢综合症的诊断与跟踪指标之一;也可作为某些卵巢肿瘤的诊断、疗效评估和复发监测的肿瘤标志。在辅助生殖领域,AMH测定有助于卵巢超刺激的个性化给药,从而提高体外受精(in vitro fertilization, IVF)的效率和安全性。AMH在临床上的广泛应用,有助于为个性化、合理化的治疗方案提供参考。     

糖化血红蛋白及糖化白蛋白在高龄孕妇妊娠期糖尿病中的应用价值

目的探讨糖化血红蛋白(HbA_(1c))和糖化白蛋白(GA)在高龄孕妇妊娠期糖尿病(GDM)筛查中的价值。方法选取妊娠时年龄≥35周岁的孕妇1 201名,其中血糖正常者(对照组)626名,GDM患者575例。分别采用己糖激酶法检测血糖、高效液相色谱法检测HbA_(1c),酶法检测GA。将GDM患者按葡萄糖耐量试验(OGTT)3个值(空腹血糖、1 h血糖、2 h血糖)的异常个数分别分组,其中1个值异常者330例、2个值异常者170例、3个值异常者75例,分别比较各组的HbA_(1c)和GA水平。各项目之间的相关性采用Pearson相关分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线及Logistic回归分析评价HbA_(1c)、GA诊断GDM的价值。结果与对照组比较,GDM组HbA_(1c)和GA水平均明显升高(P0.01)。在GDM患者中,OGTT 3个值异常者HbA_(1c)水平明显高于2个值异常者和1个值异常者(P0.01),OGTT 3个值异常者和2个值异常者的GA水平明显高于1个值异常者(P0.01)。相关性分析显示,HbA_(1c)、GA与空腹血糖呈明显正相关(r值分别为0.309、0.141,P0.01),HbA_(1c)与GA呈正相关(r=0.206,P0.01)。ROC曲线分析显示,HbA_(1c)和GA联合检测诊断GDM的曲线下面积[95%可信区间(CI)]为0.851(0.821~0.881),明显优于单项检测。结论 HbA_(1c)和GA联合检测对辅助诊断高龄孕妇GDM有重要价值。     

上海地区四家医院鲍曼不动杆菌产β-内酰胺酶研究

目的了解上海地区4家医院2010年鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物耐药性及β-内酰胺酶基因携带情况,研究该菌的流行型别,为临床合理用药及控制医院感染提供依据。方法收集上海4家医院临床分离的鲍曼不动杆菌共204株。采用琼脂稀释法检测上述细菌对13种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),三维试验检测AmpC酶,乙二胺四乙酸(EDTA)纸片协同试验检测金属酶表型。聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、ampC、IMP-1、IMP-4、VIM-2编码基因。结果 4家医院鲍曼不动杆菌对环丙沙星、哌拉西林-他唑巴坦、头孢西丁、复方磺胺甲口恶唑、头孢哌酮耐药率均较高,达到90%以上;对左氧氟沙星、多黏菌素B耐药率均相对较低。研究发现浦东地区医院对美罗培南、左氧氟沙星、多黏菌素B的耐药率均高于浦西地区医院。AmpC酶表型检测以公利医院表型阳性率最高(84.6%),瑞金医院表型阳性率最低(42.3%);金属酶表型检测,公利医院和仁济医院西院未检测到金属酶表型阳性菌株,另外3家医院中以东方医院检出率最高(27.3%),瑞金医院检出率最低(7.7%)。基因检测,浦东地区医院的OXA-23和ampC阳性率要比浦西地区医院的阳性率高。204株菌株OXA-51均为阳性,均未检测到OXA-24、OXA-58、IMP-1基因。在仁济医院东院和东方医院标本中检测到IMP-4和VIM-2基因,其他医院标本未检测到IMP-4和VIM-2基因。结论本地区分离到的鲍曼不动杆菌均检测出OXA-51,上海地区不同医院之间鲍曼不动杆菌产β-内酰胺酶情况略有不同。     

金黄色葡萄球菌耐药性监测分析

目的分析临床分离金黄色葡萄球菌的科室分布情况及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率,比较MRSA和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）的抗生素耐药情况。方法收集2010年7—2010年9月临床分离的80株金黄色葡萄球菌菌株,分别通过头孢西丁纸片法及聚合酶链反应（PCR）扩增macA基因筛选MRSA,用琼脂稀释法检测MRSA和MSSA对11种抗生素的最低抑菌浓度（MIC）,比较两者耐药性的差异。结果 80株金黄色葡萄球菌经头孢西丁纸片法检测,筛选出46株MRSA,检出率为57.50%;经PCR检测mecA基因,筛选出45株MRSA,检出率为56.25%。MRSA检出率前3位科室是神经外科（17/45,37.78%）、普外科（7/45,15.56%）和留院观察室（5/45,11.11%）。80株金黄色葡萄球菌对替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺的敏感率均为100%,MRSA与MSSA对其余8种抗生素的耐药性差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MRSA检出率及耐药率均较高,应引起临床各科室和微生物实验室的高度重视,以避免由其引发的大规模院内感染和流行。     

2012年上海地区细菌耐药性监测

目的了解2012年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法（K—B法）对上海地区29所医院的临床分离菌进行药敏试验,其中包括17所三级医院和12所二级医院。采用CLSI2012年版标准判断结果。结果总计76407株临床分离菌,革兰阳性菌占26．6％,革兰阴性菌占73．4％。耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的平均检出率分别为52．1％和77．0％。MRSA和MRCNS在二级医院和三级医院的平均检出率分别为67．3％、82．9％和48．3％、76．1％。葡萄球菌属中未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。685株儿童非脑膜炎分离株中青霉素敏感、中介和耐药肺炎链球菌（PSSP、PISP和PRSP）的检出率分别为72．7％、13．7％和13．6％,75株成人分离株的检出率分别为92．0％、5．3％和2．7％。发现万古霉素耐药屎肠球菌26株、粪肠球菌3株。首次在二级医院中发现万古霉素耐药粪肠球菌2株、屎肠球菌4株。根据表型推测,多数万古霉素耐药肠球菌（VRE）为VanA基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌中产ESBLs的检出率分别为60．1％、35．8％和38．9％。上述3种细菌中的ESBLs菌株的检出率在二级医院和三级医院的检出率分别为65．6％、32．5％、51．5％和58．7％、36．6％、32．8％。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为6．1％和4．1％。铜绿假单胞菌、不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为28．4％、23．2％和50．6％、55．1％。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中有少数菌株对所有测试药物耐药的泛耐药株（替加环素和多黏菌素未测）。分离自尿液标本中的肠球菌属细菌和大肠埃希菌对磷霉素的耐药率低。结论细菌耐药性仍对临床构成严重威胁,尤其是二级医院中某些细菌的耐药率高于三级医院,应引起严重关注。