Effects of arotinoid acid on induction of apoptosis and differentiation and telomerase activity and cell cycle in the HL-60 cell line

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白血病部分未知基因片段与公共生物信息资源的比较与分析

目的 快速分析白血病K562细胞中未知基因的结构与功能，方法 用白血病未知基因片段的碱基序列与网上多种公共生物信息资源进行比较，分析未知基因的结构与功能。结果 有四个基因片段与已知的蛋白或蛋白酶的碱基序列完全相符或高度同源；有一个基因片段除与17号染色体高度同源外，与其它数据库均无显著同源性。结论 四个基因片段为与细胞的增殖与分化相关的已知基因，有一个基因片段可能为新的功能性的白血病基因。     

中药及其有效成分抗白血病的分子机制

白血病是造血系统常见的恶性肿瘤,近年来中药在治疗白血病及抗白血病作用机制方面作了大量的研究。本文对此进行了综述。     

苦参碱对K562细胞培养液中PGE2含量的影响

目的：研究苦参碱诱导K562细胞分化的胞外信号：方法：运用酶联免疫法，动态检测苦参碱作用于K562细胞后，培养液中PGE2含量的变化。结果：培养液中PGE2含量在苦参碱作用于K562细胞2天后有增高，并与苦参碱浓度有关。结论：在苦参碱诱导K562细胞分化的过程中，PGE2含量的增高可能涉及到PLA2的激活，并且PGE2可能作为胞外信号影响K562细胞的增殖与分化。     

重组慢病毒表达PML核定位信号缺失体抑制急性早幼粒白血病细胞系c-Myc蛋白表达

目的构建携带PML(ΔNLS)基因的重组慢病毒,研究其对NB4细胞中c-Myc蛋白表达的影响。方法以质粒p CMV-HA-PML(ΔNLS)为模板,PCR扩增PML(ΔNLS)基因,克隆入慢病毒载体LV5-EF1a-GFP/puro,与p Helper 1.0和p Helper 2.0共转染293T细胞,包装病毒。收取病毒上清液,纯化后感染NB4细胞,荧光倒置显微镜观察感染效率,RT-PCR法检测PML(ΔNLS)mRNA的转录水平,Western blot检测PML(ΔNLS)、β-catenin、γ-catenin和c-Myc蛋白表达的变化。CCK-8实验观察细胞增殖。结果成功构建PML(ΔNLS)过表达慢病毒,病毒感染NB4细胞,感染效率达82.74%,LV5-PML(ΔNLS)携带的PML(ΔNLS)能够在NB4细胞中稳定表达;感染LV5-PML(ΔNLS)的NB4细胞中β-catnin、γ-catenin和c-Myc蛋白表达下降(P0.05);NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和空病毒载体组(P0.05)。结论成功构建了重组慢病毒PML(ΔNLS),PML(ΔNLS)过表达可促进NB4细胞体外增殖,并抑制c-Myc蛋白表达。     

对现阶段临床生物化学双语教学模式的思考与探索

目前高校专业课的双语教学既存在可行性的问题，又存在相当多的误区，使得教学质量难以保证。笔者率先提出的“1＋1”双语教学新模式，不但可以保证教学质量，又能潜移默化地达到双语教学的目标，有效地促进临床生物化学专业课的教学改革与实践，提高学生的学习兴趣和专业外语水平，亦能增强教师的教学积极性和执教能力，从而在教学的发展与改革中，不断在更高层面上达到新的教与学的和谐统一，为检验医学的人才培养探索一条新的教学模式。     

人K562细胞糖皮质激素受体基因阻断模型的建立

目的 利用腺病毒载体介导的RNAi技术，建立糖皮质激素受体基因阻断的人K562细胞模型。方法 将针对糖皮质激素受体发挥RNAi效应的合成寡核苷酸序列连入含有绿色荧光蛋白基因的腺病毒穿梭质粒pRNAT-H1.1/Adeno中，在含有pAdEasy-I病毒骨架的BJ5183大肠菌内进行同源重组；重组体通过脂质体介导转染293T细胞，并在293细胞内包装为具有感染能力的病毒颗粒，通过反复感染扩增病毒以达感染靶细胞的适当滴度，通过绿色荧光表达来监测腺病毒扩增；应用Western blot法检测人K562细胞感染病毒后糖皮质激素受体蛋白的表达。结果 重组腺病毒穿梭质粒psiGR/Adeno和重组腺病毒pAdEasy-siGR的成功构建；转染腺病毒载体的293T细胞表达绿色荧光，随着时间逐渐增强并且出现明显的细胞病变效应，经过3轮扩增，病毒达到合适的滴度；受腺病毒感染的K562细胞内糖皮质激素受体蛋白表达明显降低。结论 可以成功构建针对糖皮质激素受体基因的RNAi腺病毒载体，为进一步研究糖皮质激素受体的生物学功能奠定基础。     

地塞米松的结构改造及对K562细胞增殖抑制的初步研究

目的:通过对地塞米松进行结构改造,探寻具有更高生物活性的新化合物.方法:以地塞米松为原料,通过氧化反应对其侧链进行结构改造,并采用1H NMR,13C NMR及ESI-MS对其进行结构表征.通过MTT比色法检测新化合物对K562细胞增殖的影响.结果:地塞米松经氧化反应后,改构为预期的新化合物.新化合物具有抑制K562细胞增殖的生物活性.在5及10 mg/L时,抑制率分别为9.64%±0.27%和22.75%±0.35%,高于地塞米松(P<0.01).结论:地塞米松经结构改造为新化合物.新化合物在低浓度时对K562细胞具有较好的抑制活性.     

临床生物化学精品课程的建设

临床生物化学课程以精品课程的标准为要求，经过历年来不断的教学研究与改革，从教学队伍、教学内容、教学方法与手段以及教学条件等方面不断加强建设，逐渐形成为一门特色鲜明、成效显著的精品课程：     

糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建及鉴定

目的构建糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）结合域的诱饵表达载体。方法RT—PCR扩增GR结合域，克隆入pMDl8-T，测序正确后，再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中，再把构建好的诱饵载体pGBKT7．GR转化到酵母AHl09细胞中，并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况，同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用。结果成功扩增了GR结合域，并分别成功克隆到pMDl8-T和pGBKT7中，测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AHl09细胞中，无毒性和自激活作用，Western blot分析结果也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白。结论成功构建了GR结合域的酵母诱饵表达载体。