JTV1对K562细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的观察上调JTV1基因的表达对人白血病K562细胞系增殖与凋亡的影响并探讨其机制。方法将携带有JTV1基因的pcDNA3.1-JTV1载体转染人K562细胞作为阳性转染组,转染pcDNA3.1空载体作为空载体转染组,未转染的K562细胞为未转染组。通过集落形成实验检测各组K562细胞的增殖能力,采用流式细胞术与Annexin-PI双染色结合分析细胞周期和细胞凋亡率,同时采用RT-PCR法检测JTV1基因及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、C-myc mRNA水平的变化,采用Western blotting检测基因JTV1及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、C-myc蛋白水平的变化。结果集落形成实验结果显示上调JTV1基因表达后K562细胞的增殖能力明显降低。流式细胞术与Annexin-PI双染色检测结果显示,与空载体转染组及未转染组相比,阳性转染组K562细胞的G期细胞比例明显升高(P<0.05);阳性转染组中Bax基因的mRNA水平和蛋白水平较空载体转染组及未转染组均明显上升,而Bcl-2基因和C-myc基因的mRNA水平和蛋白水平则明显下调(P<0.05)。结论 JTV1基因过表达可能通过抑制基因Bcl-2和C-myc的表达增强基因Bax的表达,从而抑制K562细胞系的增殖并促进其凋亡。     

大黄素三甲氧基衍生物合成及体外抗肿瘤活性试验

目的:以天然存在的大黄素为原料合成了甲基化衍生物三甲氧基大黄素,并进行体外抗肿瘤活性的研究。方法:利用硫酸二甲酯/丙酮甲基化组合合成目标化合物1,3,8-三甲氧基-6-甲基蒽醌;通过常规方法,对其理化性质进行鉴定。采用HPLC及ESI-MS对其结构进行表征;通过MTT比色法与流式细胞术检测其对K562细胞增殖及细胞周期分布的影响。结果:三甲氧基大黄素为淡黄色粉末,mp:226～227℃,溶于氯仿等有机溶剂。其结构经HPLC及ESI-MS检测得到确证;浓度依赖性地抑制K562细胞的增殖,并使G0/G1期的细胞比例增加。结论:以大黄素为原料,成功合成了其新的衍生物。三甲氧基大黄素具有抑制K562细胞增殖及阻滞细胞周期由G0/G1期向S期移行的抗肿瘤活性。     

未知基因KS1的发现

生物多样性是由遗传物质决定的，这些遗传物质的总和称为基因组。人类基因组和后基因组计划是跨世纪生命科学发展的标志。此计划现已完成庞大基因组序列测定的大部分工作，但对于每个基因在基因组序列结构中的定位及表达调控与表达产物的生物学功能的研究才刚刚起步。目前分离克隆基因的方法较多。我们在对苦参碱诱导白血病Ｋ５６２细胞分化系统研究基础上，应用ＤＤ－ＰＣＲ技术分离并克隆了苦参碱作用Ｋ５６２细胞早期的４３个差异显示ｃＤＮＡ片段。经序列测定并利用网络技术和基因组数据库等相关生物信息分析，得到一个与已知基因无明显…     

适用于显微镜下细胞连续观察的温度控制系统

目的研制一种适合显微镜下使用的温度控制系统,以保证显微镜下对细胞进行长时间连续观测时的温度要求。方法系统用透光性良好的氧化铟锡导电膜（ITO）作为加热元件,利用ITO导电薄膜自身温阻效应测量系统温度,辅以C8051F340单片机为控制系统核心,以改进的PID控温算法及脉宽调制技术（PWM）为依托,构成温度控制系统的核心。结果与结论设计的温度控制系统无需额外温度传感器,结构简单I,TO膜表面温度分布均匀（1℃内）,控温精度达±0.2℃;系统能够维持显微镜下BHK-21细胞保持良好的生存状态,可在显微镜下进行连续48 h观察,为细胞生物学动态行为特征研究提供一种技术手段。     

对不同层次学生进行临床生物化学教学的探索

随着医学检验学科的发展，学生专业层次增多，在教学过程中根据各层次学生培养目标的不同，开展不同侧重点和不同内容的教学，为人才的可持续发展奠定良好的基础。     

重视临床生化分析技术 合理安排组织教学内容

笔者针对临床生化分析技术在教学与实践中的重要性，以蛋白质为中心对该课程的内容进行组织与安排。通过列举蛋白质的分离纯化教学内容的安排，阐述教学内容安排要突出中心，层次分明，内容连贯统一。这有利于调动教与学两方面的积极性，有利于加深学生对教学内容的把握，最终有利于提高教学质量和人才培养的质量。     

苦参碱对K562细胞骨架的作用观察

目的：从细胞骨架方面进一步探索苦参碱对人白血病K562细胞株的作用机制。方法：采用微管吮吸技术和基因芯片技术分析苦参碱处理前后K562细胞粘弹系数和细胞骨架蛋白基因表达的改变。结果：0.1mg/ml苦参碱作用K562细胞24h后粘弹系数下降，细胞骨架类基因prefoldin 与ezrin 的mRNA表达增强。结论：苦参碱能够导致K562细胞的细胞骨架发生变化。     

对不同层次学生进行临床生物化学教学的思考

随着医学检验学科的发展，学生专业层次增多，在教学过程中根据各层次学生培养目标的不同，开展不同侧重点和不同内容的教学，为人才的可持续发展奠定良好的基础。     

吴茱萸碱通过TRIB2/AKT信号通路诱导人白血病细胞K562凋亡

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对人白血病细胞K562增殖与凋亡的影响,并初步探究其潜在的分子机制。方法以CCK-8法测定不同浓度的EVO处理K652细胞不同时间后的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR检测TRIB2 mRNA表达,Western blot检测TRIB2/AKT信号通路;以EVO作用于AKT激活剂SC79预处理后的K562细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测TRIB2/AKT信号通路。以EVO作用于Wnt激活剂SKL2001预处理后的K562细胞,Western blot检测TRIB2/AKT信号通路。结果EVO对K562细胞的增殖抑制作用呈时间及浓度依赖性;流式结果显示EVO体外可促细胞凋亡且呈浓度依赖性;EVO处理后,TRIB2mRNA的表达降低,TRIB2/AKT信号通路被抑制;SC79削弱了由EVO诱导的K562细胞凋亡,且SC79和SKL2001均能逆转EVO对AKT信号通路的抑制作用。结论EVO可诱导人白血病细胞K562凋亡,从而抑制其增殖,其机制可能是通过抑制TRIB2的表达,进而抑制AKT的磷酸化,最终抑制下游基因NF-κB p65的磷酸化,从而诱导细胞凋亡并抑制其生长。     

单纯疱疹病毒的感染对孕妇及胎儿的影响

目的 了解单纯疱疹病毒(HSV)感染后对孕妇及其胎儿的影响。方法 用酶联免疫吸附法(ELISA)和聚合酶链反应(PCR)检测有不良妊娠史的孕妇及其胎儿的HSV感染情况，同期选取无不良妊娠史孕妇作为对照组。结果 有不良妊娠史孕妇IgM阳性率为23．33％，IgG阳性率为68．33％，IgM和IgG双阳性率为13．33％，而无不良妊娠史孕妇的感染率分别为10．0％、41．67％和1、67％，远远低于有不良妊娠史的孕妇。进一步进行HSV-ⅡDNA检测，结果 IgM或／和IgG阳性的孕妇其胎儿DNA阳性率也高于IgM和IgG阴性孕妇，而且其妊娠结局多为流产、早产、死胎及新生儿畸形。结论 HSV感染的孕妇可以通过胎盘或者由血液将HSv传播给胎儿，导致流产、早产等不良妊娠。