孕酮对沙土鼠脑缺血再灌海马小白蛋白免疫反应的影响

目的:观察孕酮对沙土鼠脑缺血再灌海马小白蛋白免疫反应的影响。方法:以双侧颈总动脉夹闭法制作脑缺血再灌注模型,免疫细胞化学方法显示海马小白蛋白免疫反应的变化。结果:脑缺血再灌后1～7 d,海马小白蛋白阳性神经元增多;第7天背侧海马CA1区锥体细胞层呈现小白蛋白阳性致密条带。脑缺血再灌孕酮处理后小白蛋白阳性神经元进一步增加,可见许多串珠状小白蛋白阳性突起,未见海马CA1区锥体细胞层小白蛋白阳性致密条带结构。结论:孕酮可能通过对小白蛋白的表达调控发挥对脑缺血再灌损伤的部分神经保护作用。     

As2O3碘油栓塞对兔VX2肝移植瘤生长及血管新生的作用

目的通过二维超声及免疫组化方法观察肝动脉As2O3碘油栓塞对兔肝移植瘤生长、微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 40只家兔肝内肿瘤种植后2周,随机分为5组,经肝动脉插管分别给予不同处理,实验设生理盐水灌注组(A组)、As2O3灌注组(B组)、单纯碘化油栓塞组(C组)、阿霉素+碘化油栓塞(D组)及As2O3+碘化油栓塞组(E组),As2O3的用量为2 mg/kg.治疗后1周,采用二维超声检测肿瘤大小,计算肿瘤的生长率,病理观察肿瘤的坏死率,免疫组化方法测定瘤区的MVD及VEGF表达强度.结果治疗后1周,各组肿瘤体积分别为(1.441±0.26) cm3、(1.372±0.28) cm3、(0.578±0.16) cm3、(0.523±0.12) cm3和(0.508±0.10) cm3,各栓塞治疗组,肿瘤生长受到明显抑制;单纯碘化油栓塞及阿霉素+碘化油栓塞后,残余肿瘤区的MVD略有升高,两者分别为23.4±4.7和22.3±5.3,与阴性对照A组MVD为21.8±6.3相比,统计学无显著性意义; 两组的VEGF表达强度分别为0.163±0.019 和0.160±0.016,高于阴性对照A组(Ρ＜0.05),A组的VEGF表达强度为0.140±0.02;As2O3+碘油栓塞组残余瘤区的MVD减低,VEGF表达减弱,两者分别为15.1±3.2和0.102±0.02.MVD与VEGF表达强度之间存在正相关.As2O3+碘油栓塞组肿瘤坏死率大于单纯碘油栓塞及阿霉素+碘油栓塞组(Ρ＜0.05),分别为85.5%±4.0%、73.5%±7.8%和75.9%±11.4%.结论 As2O3+碘油栓塞可抑制肿瘤生长,增加肿瘤的坏死率,抑制肿瘤血管新生,降低栓塞后残瘤的VEGF表达.     

大鼠肺内降钙素基因相关肽和5-羟色胺免疫反应细胞的加龄变化

目的 :探讨大鼠肺内降钙素基因相关肽 (calcitoningene relatedpeptiole ,CGRP)和 5 羟色胺 (5 hydroxytryptamine ,5 HT)免疫反应细胞的个体发生及分布 ,揭示肺神经内分泌细胞的功能及其内分泌机制的形态学基础 .方法 :应用免疫组织化学方法、激光扫描共聚焦技术及计算机图像分析 .结果 :CGRP和 5 HT阳性细胞最早见于胚 16d肺组织中 ,随胎龄增大其数量增多且分布广泛 ,胚 2 0d达高峰 ,生后阳性细胞数量减少 [神经内分泌 (NE) / 1× 10 3上皮细胞 (BE) :3 82± 13vs 94± 17;3 87± 4 7vs88± 18;P <0 .0 1,以出生后 1mo为例 ].共聚焦显微镜结果也证实随胎龄增加 ,CGRP和 5 HT阳性细胞数量增加且细胞荧光强度增强 ,而生后强度减弱 (P <0 .0 1) .相邻切片法观察可见多数表达CGRP的阳性细胞也含有 5 HT免疫反应物 .结论 :肺内CGRP和 5 HT阳性细胞的随龄变化显示其在肺的发育、分化、成熟的变化过程中具有重要作用 ,出生前后其数量变化明显的现象 ,可能与此阶段肺功能的急剧改变有关 .CGRP和 5 HT的共存表明两者在功能上具有相关性 .     

脑缺血时神经细胞死亡机制的研究进展

脑缺血是危害人类健康的常见病、多发病 ,可发病于各年龄段 ,因而一直受到广大基础和临床工作者的重视。近年关于脑缺血的发病机理、病理变化及其防治的实验研究越来越多[1,2 ] ,研究发现不同脑区的神经元对缺血有不同的敏感性 ,脑组织在缺氧 4～ 5ｍｉｎ后即发生不可逆损伤。关于脑缺血神经元不同损伤敏感性或耐受性的机制尚不完全清楚 ,可能与神经元本身的特性、兴奋性氨基酸毒性及钙超载有关[3] 。研究脑缺血神经元受损、死亡机制对防治此类疾病有重要意义 ,本文仅就几个方面进行回顾和总结。1　兴奋性氨基酸的神经毒作用兴奋性氨基酸及…     

骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化及其在细胞移植中的应用☆

学术背景：骨髓间充质干细胞主要存在于骨髓基质中,具有横向分化潜能,在适当的条件下可以向3个胚层的细胞进行分化。 目的：文章就骨髓间充质干细胞生物学特性、神经元诱导分化及其机制、细胞移植方面的最新进展进行综述。 检索策略：应用计算机检索PubMed1999/2007年相关文章,检索词为“bone marrow mesenchymal stem cells”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库1999/2007年相关文章,检索词为“骨髓间充质干细胞”,并限定文章语言种类为中文。对资料进行初审,并查看每篇文章后的引文。纳入标准：文章所述内容与骨髓间充质干细胞的发展现状及神经元诱导分化及机制和移植研究相关。排除标准：重复研究或较陈旧的文献。 文献评价：共收集到230篇相关文献,72篇文献符合纳入标准,排除的158篇文献为内容陈旧或重复文献。选取29篇文献进行分析,分别涉及骨髓间充质干细胞的分离培养和鉴定8篇、神经元细胞方向分化及其机制17篇、细胞移植治疗各种神经损伤的实验研究4篇。 资料综合：由于尚未找到骨髓间充质干细胞特异性标记物,其在体内的细胞生物学和分子生物学作用机制仍不清楚,如何限定体内外诱导条件使其向所需细胞或组织定向分化以及移植时机、是否具有致瘤性等问题尚需深入研究。但近来在骨髓间充质干细胞向神经细胞方向分化的诱导方法和机制,以及骨髓间充质干细胞移植治疗神经损伤方面取得很多成果。 结论：骨髓间充质干细胞具有易获得、易培养、低免疫原性等特性,已成为具有细胞治疗和基因治疗临床疾病潜在实用价值的有效载体。     

As2O3碘油栓塞对兔VX2肝癌凋亡、增殖及肝功能的影响

目的观察肝动脉As2O3碘油栓塞对兔肝移植瘤凋亡、增生细胞核抗原(PCNA)表达及肝功能的影响。方法40只家兔肝内肿瘤种植后2周,随机分为5组,经肝动脉插管分别给予不同处理,实验设生理盐水灌注组(A组)、As2O3灌注组(B组)、单纯碘油栓塞组(C组)、阿霉素碘油栓塞组(D组)及As2O3 碘油栓塞组(E组),As2O3的用量为2 mg/kg。治疗前3 d,治疗后4、7 d,耳缘静脉取血,测定部分肝功能指标。采用原位末端标记法检测肿瘤细胞的凋亡指数,免疫组化方法测定肿瘤细胞增生细胞核抗原的表达。结果治疗后4 d,栓塞治疗组AST、ALT上升,治疗后7 d,肝功能渐趋正常,阿霉素(ADM)碘油栓塞治疗组AST、ALT水平高于其它组。各组的凋亡指数和增殖指数分别为1.53±0.42、1.82±0.41、2.66±0.54、2.91±0.32、3.44±0.65和60.8±15.5、55.9±14.8、42.4±11.2、40.6±8.8、28.5±5.7,两者存在负相关。结论As2O3比ADM对正常肝组织的毒性低。As2O3碘油栓塞治疗后残余肿瘤的凋亡增加,肿瘤细胞的增殖能力下降。     

大鼠松果体分泌物释放到蛛网膜下隙脑脊液途径的电镜研究

为探讨松果体分泌物在细胞外转运到蛛网膜下隙脑脊液途径的结构基础,本研究运用透射电镜技术对成年大鼠松果体浅部进行了观察。结果显示:(1)大鼠松果体毛细血管为有孔型(孔径50nm),借基膜与宽阔的血管周隙分隔;(2)松果体细胞借基膜与结缔组织间隙分隔,松果体细胞之间形成与松果体囊结缔组织间隙及血管周隙相通的细胞间小管;(3)松果体囊表面为扁平上皮,上皮下为疏松结缔组织间隙,其内可见松果体细胞的胞体和突起。囊上皮细胞间存在瓣膜样连接(叶瓣间宽处可达1μm)和囊上皮孔(2.5μm)。以上结果提示,松果体细胞表面可分为结缔组织间隙面、连接面和细胞间小管面三个功能面,松果体分泌物可能通过血管周隙-细胞间小管-松果体囊结缔组织间隙-囊上皮瓣膜样连接或囊上皮孔,释放入蛛网膜下隙脑脊液中转运。     

苦参碱对KB及其多药耐药细胞KBv200增殖与凋亡影响的对比研究

目的:研究中药苦参提取物苦参碱对体外培养的口腔上皮癌KB细胞和具有多药耐药特征的KBv200细胞增殖和凋亡的影响.方法:以MTT法对比观察苦参碱对细胞存活率的影响;以吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)双荧光染色检测细胞凋亡率;流式细胞术分析苦参碱对细胞周期的影响;扫描电镜观察苦参碱作用后的细胞形态学变化.结果:苦参碱浓度在0.50、1.00、1.50、2.00mg/ml时,均有抑制KB及KBv200增殖的作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为1.35mg/ml和1.43mg/ml;双荧光染色及流式细胞术提示苦参碱可诱导KB及KBv200细胞凋亡,使细胞生长停滞在S期;扫描电镜观察发现不同浓度的苦参碱作用24h后,细胞出现体积缩小、细胞质空泡化、细胞核碎裂等凋亡现象.苦参碱对两种细胞增殖和凋亡的影响均未见明显差异(P＞0.05).结论:苦参碱对KB及多药耐药的KBv200细胞均具有抑制增殖和诱导凋亡的作用.提示苦参碱可克服肿瘤的多药耐药现象,故有可能成为一种理想的中药抗肿瘤制剂.     

快速老化小鼠海马突触体内NMDA受体的表达变化

目的:观察NMDA受体在SAMP8小鼠海马突触体内的表达变化。方法:首先应用生物化学的方法分离海马突触蛋白,并对其进行鉴定。其次,Western Blot检测NMDA受体的主要亚基NR1、NR2A和NR2B在SAMP8小鼠海马突触体内的表达变化。结果:PSD-95和synaptophysin特异性抗体检测显示突触蛋白的分离是成功的。SAMP8小鼠海马内NR1、NR2A和NR2B在突触的表达均显著低于SAMR1小鼠。进一步分析NR1、NR2A和NR2B蛋白在突触的表达量占总表达量的比值,SAMP8小鼠同样显著低于SAMR1小鼠,而SAMR1和CD-1小鼠间没有显著性差异。结论:SAMP8小鼠海马突触体内NR1、NR2A和NR2B的蛋白表达水平均显著性降低,推测NMDA受体在突触表达水平的降低可能是导致受体功能失调,激发突触功能损伤信号途径的原因之一,进而导致SAMP8小鼠学习记忆功能的下降。     

背侧抑制性轴突导向蛋白抑制鸡胚脊髓神经嵴细胞的迁移

目的:初步探讨背侧抑制性轴突导向蛋白(draxin)在鸡胚脊髓神经嵴细胞迁移过程中的作用。方法:应用神经嵴细胞特异性标记物HNK-1免疫组化染色检测不同发育阶段正常鸡全胚脊髓神经嵴细胞迁移特性;鸡draxin表达载体质粒转染COS7细胞株,收集上清作为条件培养液。分别用含draxin的条件培养液处理体外培养的鸡全胚和鸡胚脊髓神经管,观察在体和离体条件下draxin对脊髓神经嵴细胞迁移特性的影响。结果:HH12-13到HH18-19阶段正常鸡胚脊髓发育过程中,神经嵴形成明显的从头侧到尾侧的渐进性、节段性迁移特性;draxin对体外培养的全胚和神经管内神经嵴细胞的迁移均具有明显抑制性调控作用。结论:Draxin抑制早期鸡胚脊髓神经嵴细胞的迁移。