脂质体介导IFN-γ基因治疗荷大肠癌小鼠的实验研究

目的探讨利用γ 干扰素 (interferon γ ,IFN γ)基因对大肠癌的治疗作用及其作用机制。方法构建携带IFN γ基因的真核表达质粒pcDNA3 IFN γ ,以脂质体作载体 ,对荷大肠癌小鼠行瘤体内注射IFN γ基因 ,检测经基因治疗后小鼠体内IFN γ基因的表达、脾脏的细胞毒性T淋巴细胞 (cyto toxicTlymphoctye,CTL)活性、肿瘤的大小、肿瘤局部的淋巴细胞浸润情况及荷瘤小鼠的生存期。结果经IFN γ基因治疗后 ,治疗组小鼠血清中IFN γ表达量和脾脏的CTL活性明显增强 (P <0 0 1) ,肿瘤局部淋巴细胞浸润明显 ,肿瘤生长受到抑制 ,荷瘤小鼠的存活期明显延长。结论利用IFN γ基因治疗大肠癌具有明显的疗效。     

腺病毒对内皮及成纤维细胞和血管环转染及基因表达的研究

目的：比较腺病毒对不同血管内皮及成纤维细胞的转染和对人冠状动脉搭桥动脉静脉血管的转导，为携带目的基因的腺病毒治疗血管狭窄提供更好的转染途径。方法：腺病毒Ad5CMVLacZ体外转染血管内皮细胞（HUVEC）和成纤维细胞（PA317）并间接转导入胸廓内动脉和大隐静脉血管环，运用β-半乳糖苷酶活性X－gal组织化学染色，观察转染情况，并进行动态分析。结果：腺病毒载体能使外源性基因有效地转入HUVEC、PA317及两种血管环并获得蛋白表达；两种血管环在转染10d后仍有β-半乳糖苷酶蛋白的表达，且大隐静脉有新内膜形成和中膜的增厚。结论：从细胞水平上证明腺病毒载体能将治疗性目的基因导入各种血管细胞及动静脉血管并获得表达，提示血管内膜和外膜都是腺病毒有效转染的途径；临床上无论动脉或静脉的血管狭窄都可能通过用腺病毒作为载体进行基因治疗和预防。     

人γ-干扰素基因在大肠癌细胞中的表达研究

目的 探讨γ-干扰素用于基因治疗的有效途径。方法 将人γ-干扰素（huIFN-）全长cDBA经序列测定后克隆到真核表达质粒pcDNA-3-IFN-γ，利用阳离子脂质体Lipofectamine介导转传染人大肠癌细胞，用PCR、RT-PCR对该基因的整合和表达进行鉴定，并对细胞培养上清中γ-干扰素的活性进行检测。结果 该基因已经有效地进入人细胞内并实现了表达。结论 利用脂质体可以有效地将huIFN-γ基因悼入肿瘤细胞内，并获得稳定表达。     

福氏完全佐剂包裹 IL-2及(或)5-FU 对小鼠 S180肿瘤抑瘤作用的初步研究

福氏完全佐剂(FCA)通常用来包裹抗原免疫动物制备抗体,而 FCA 本身还有刺激动物细胞免疫和体液免疫的功能。Ito 等人率先用福氏佐剂包裹化疗药物,配合肝动脉栓塞,肌注 IL-2,来治疗原发性肝癌,并取得较好效果。而用 FCA包裹 IL-2,或同时包裹化疗药物及 IL-2进行抗肿瘤实验者,目前尚未见报道。我们进行了有关的实验研究,现将结果报道如下。     

低剂量照射对LAK细胞体外杀伤肿瘤靶细胞的影响

作者采用＾Ｈ－ＴｄＲ释放实验，观察了低剂量γ射线照射的ＬＡＫ细胞体外杀伤肿瘤靶细胞的影响。来自健康献血员的外周血淋巴细胞，用重组白介素２培养９６小时获取ＬＡＫ效应细胞，在细胞培养的不同时期给予培养中的细胞一次不同剂量的γ射线照射。     

干扰素的功能表达机制

干扰素具有广泛的生物功能,它能抗病毒、抗癌、抗细菌生长,影响细胞功能与分裂、影响抗体生成。它能改变细胞膜的结构与功能,如改变膜的形态,改变浆膜的密度、增加膜的负电荷、影响胸腺嘧啶核苷     

羊生长激素染色体基因的分离及结构分析

鼠、人、牛、猪的生长激素(GH)染色体基因国外已先后有报道。羊的生长激素染色体基因,文献尚未见报道。我们在国内条件下,分离到羊生长激素(GH)编码的染色体基因,经DNA全顺序测定,结构完整,可用于肉、毛、乳高产新品种动物的基因工程培育研究。     

α肿瘤坏死因子（TNFα）基因的分离鉴定及在人肝癌细胞中的表达

应用不连续密度梯度法分离获得人肝癌浸润性单个核细胞（ＴＩＭ），ＲＮＡ斑点杂交提示ＴＩＭ中有明显的ＴＮＦαｍＲＮＡ转录。经ＲＴ－ＰＣＲ扩增反应分离得到一特异的７００ｂｐ左右的ＤＮＡ片段，ＤＮＡ序列分析证实这一ＤＮＡ片段中包含编码人ＴＮＦα成熟肽所需的的全部ｃＤＮＡ序列。将这一人ＴＮＦαｃＤＮＡ克隆到真核细胞表达质粒ｐＳＶＫ３，获得真核细胞表达重组ｐＳＶＫ３－ｔｎｆ，用磷酸钙沉淀法将ｐＳＶＫ３－ｔｎｆ导入人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１中的细胞培养上清中可检测到ＴＮＦα的一过性表达。结果提示ＴＩＭ可成为获取ＴＮＦα基因的来源，获得的ｐＳＶＫ３－ｔｎｆ重组质粒为肝癌的基因治疗奠定了基础。     

rIL-2在小鼠体内抗结核菌能力的研究

用人型结核菌H_(37)RV株和耐药结核菌分别感染小鼠。5和15天后,每只小鼠以重组白细胞介素-2作肌肉注射,分5000u和10000u/只两组,连续注射10天,观察小鼠的抗菌能力。结果表明,经实验治疗后,小鼠脾脏内总菌数和活菌数明显减少。感染后于上述用药时间,剂量组之间无显著差别。