应用脾内直接免疫法制备鼠痘病毒单克隆抗体

复制大鼠肝热缺血模型即使其处于肝全血阻断２５ｍｉｎ。复流１０ｍｉｎ后测定其血清中７种生化酶活性，并与无因损伤的对照组大鼠比较，发现肝热缺血损伤后，血清丙氨酸氨酸（ＡＬＴ）、天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）、磷酸肌酸激活酶（ＣＫ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和α－羟丁酸氢酶（α－ＨＢＤ）活性均极显著升高（均Ｐ〈０．０１），碱性磷酸酶（ＡＬＰ）明显上升（Ｐ〈０．０５０，酸性磷酸酶（ＡＣＰ）无明显变化（Ｐ〉０．０５）     

Ro抗原的提取及Ro构象对其抗原反应性的影响

本文报道了了一种从人脾组织提取高活性Ｒｏ自身抗原的快速简易方法，并进一步证明Ｒｏ构象对其抗原反应性影响极大。     

抗血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa Fab抗体的原核表达及其生物活性

目的：研制抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa Fab抗体。方法：通过问接免疫荧光试验和血小板聚集抑制试验，选取鼠源抗血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa单克隆抗体(mAb P140)。从分泌该mAb的杂交瘤细胞株(P140)中，克隆到抗体轻链基因和重链Fd段基因，构建原核表达重组质粒p3MH／P140x-Fd，并在XLI-Blu菌株中进行表达。采用钴亲和层析法对P140 Fab抗体进行纯化，用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等方法，对P140 Fab抗体进行检测，并通过血小板聚集抑制试验，观察P140 Fab抗体的抗栓活性。结果：SDS-PAGE和Western blot表明，纯化的P140Fab抗体的相对分子质量(Mr)约为47000。ELISA的结果显示，P140 Fab抗体可与人血小板特异性结合。在体外ADP诱导的血小板聚集试验中，P140 Fab抗体对血小板聚集的抑制作用成剂量依赖性，IC50的平均值为16．85mg/L。结论：成功地研制出具有抗栓活性的抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa的Fab抗体。     

抗蓖麻毒素A链人源化单域抗体的设计、原核表达及生物活性检测

目的 运用计算机辅助蛋白质分子设计的方法设计针对蓖麻毒素A链(RTA)的拮抗肽,实现在大肠杆菌B121中的可溶性表达,并对其生物学活性进行评价.方法 根据RTA的晶体结构、RTA-rRNA相互作用复合物模型,在CVFF(consistent-valence force field)、Amber力场下,对RTA的空间构象进行理论模拟,初步确定其生物活性功能域;然后针对该功能域设计小分子拮抗肽,并借助人抗体重链町变区骨架,在CDR3区对拮抗肽进行展示,用重叠延伸PCR全基因合成人源化的单域抗体并克隆至载体pET-32a(+);双酶切和DNA测序技术对构建的载体进行鉴定;IPrG诱导人源化的单域抗体表达,用镍离子亲和层析纯化,竞争ELISA和MTT法分别进行结合和中和活性检测.结果 从头搭建并设计合成了人源化的单域抗体,实现了其原核表达,并进行了牛物活性检测;建立了基于人源化的单域抗体的RTA和蓖麻毒素检测方法.结论 研究结果为新型蓖麻毒素小分子拮抗剂的研制奠定了理论和实验基础.     

肝移植术后细菌感染特点及药敏结果分析

目的 探讨肝移植术后细胞感染特点及其耐药性,为临床提供预防和用药依据.方法 对肝移植术后送检标本的培养结果及药敏试验进行综合分析.结果 2003年12月～2004年12月肝移植患者的各种送检标本共检出细菌44株,有90.9%为单一细菌感染,9.1%为混合菌感染;革兰阴性杆菌检出28株,占63.7%;革兰阳性球菌检出12株,占27.3%.药敏结果表明革兰阴性杆菌对左旋氧氟沙星、亚胺培南-西拉司丁钠、头孢吡肟、环丙沙星和阿米卡星敏感性尚好,耐药率低于40%,可作为临床首选;而对头孢三代、氨曲南和阿莫西林-克拉维酸耐药性较高,耐药率高于60%.革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁无耐药株,未检出耐万古霉素肠球菌,对青霉素耐药性高达90%.结论 加强对肝移植患者的细菌监测,以防止经验用药,降低细菌耐药性的产生,指导临床有效抗感染治疗.     

精液标本置入精子质量分析仪时间长短对精液常规各参数的影响

目的 了解使用精子质量分析仪(美国SQAⅡB)进行精液分析时,标本插入仪器时间长短对精液常规各参数的影响.方法 标本置于室温(23℃～26℃)液化后,使用精子质量分析仪对标本进行2次测试.第1次为标本插入仪器后立刻进行测试,第2次为标本插入仪器3～5 min进行分析.结果 2次测试中,第2次较第1次各参数结果有明显升高,且差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 标本放入仪器3～5 min进行测试结果较即刻结果更有效.     

沿海某地海鱼弧菌伤口感染能力研究

目的 研究从某沿海海水中分离出的海鱼弧菌的致病性。方法 ①毒力实验组：35只二级昆自小鼠随机分为4组，实验组腹腔注射海鱼弧菌，阳性对照组腹腔注射标准金黄色葡葡球菌、标准大肠杆菌，阴性对照组腹腔注射无菌生理盐水。②伤口感染实验组：35只无特定病原体小鼠，腿部致伤后随机分为4组，实验组(浸泡含有细菌的人工海水)和阳性对照组(含有标准金黄色葡萄球菌、标准大肠杆菌)，阴性对照组(浸泡无菌人工海水)。观察小鼠一般状况、血常规、血培养、脏器细菌培养、伤口分泌物培养、脏器和伤肢病理光镜检查，并将鼠体内分离的菌株和实验前菌株进行核酸指纹图比较分析，确认细菌来源。结果 ①毒力实验：海鱼弧菌组(海鱼组)腹腔注射细菌悬液后一般情况差，持续24h，病理学检查见多脏器水肿、变性。②伤口感染实验：实验组和阳性对照组伤口感染阳性率为100％，病理学检查海鱼组及阳性对照组伤肢皮下及横纹肌可见大量嗜中性粒细胞浸润，有蜂窝织炎形成。结论 自某沿海海域分离出的海鱼弧菌在10^6CFU／ml时，具有感染能力，可致实验鼠的伤口感染。     

氧自由基在猫创伤性脑水肿中的作用研究

利用猫作为创伤性脑水肿动物模型,观察不同时期动物血清、脑脊液及脑组织中的脂质过氧化物含量变化。结果显示:外伤后脑脊液中脂质过氧化物含量变化最明显,1h达高峰(P<0.01),24h仍高于正常,认为测定脑脊液中脂质过氧化物含量能较准确反应脑内氧自由基的活动情况。     

从血液中分离出一株耳葡萄球菌

耳葡萄球菌系葡萄球菌属.1996年8月28日我们从一急性单核细胞白血病患者血中分离出该菌.因较少见,特予报道.临床资料一、病例摘要:患者男27岁,在当地医院诊断为急性单核细胞白血病.1996年3月15日来我院治疗,查白细胞54.6×10~9/L,两个月后白细胞为1.6×10~9/L.在检查期间,患     

156例大肠杆菌药敏结果分析

大肠艾希菌又称为大肠杆菌,属于肠杆菌科、艾希菌属.该菌系肠遭正常菌群,为条件致病菌,近年来已成为医院内获得性感染的主要原因之一.本文分析我院近四年156例大肠杆菌药敏结果.