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本文结合西京医院学科建设发展实践,全面介绍该院学科建设模式,及其完整的学科建设支撑体系和完善的评估体系,为研究型医院医院学科建设模式的创新和评价提供借鉴. 相似文献
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单以乙肝病毒S区基因疫苗 (pCR3 1 S)或联合IL 2真核表达载体 (pDOR IL 2 )注射BALB/c小鼠 (H 2 d)股四头肌 ,ELISA法检测小鼠血清抗HBs,4h51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL活性。免疫 8周后 ,单注射pCR3 1 S及共注射IL 2真核表达载体的小鼠血清 45 0nmA值分别为 1 2 4± 0 1及 1 98± 0 17。CTL细胞杀伤活性分别为 (5 0 5± 6 4) %、 (6 1 9± 7 1) % ,两组均有明显差异 (P <0 0 1)。脾细胞悬液经抗CD4+ 单克隆抗体处理后CTL细胞杀伤活性分别为 (4 8 3± 5 9) %、 (5 6 2±6 1) % ,抗CD8+ 单克隆抗体处理后分别为 (10 6± 1 4) %、 (13 6± 1 3) %。结果表明 ,IL 2的真核表达载体能够提高小鼠对DNA疫苗的免疫应答 ,CTL细胞杀伤活性主要由CD8+ 执行。基因疫苗可能用于预防及治疗HBV感染。 相似文献
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目的 观察外源性p16基因质粒导入食管癌患者食管鳞癌细胞系Ec109后的表达及其对Ec109细胞增殖生长状况的影响。方法 根据转染质粒的不同或是否行p16 cDNA质粒转染分为三组,每组分别为5个样本。PcDNA3-P16转染组(P16转染组):采用脂质体(Lipofectamine)为载体,将PcDNA3-P16表达质粒寻入Ec109细胞;空载体转染组:用PcDNA-3-neo空载体以上述相同方法转染,作空白对照;未转染组:未用PcDNA3-P16质粒转染,作阴性对照。应用Northern斑点杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测转化细胞的P16蛋白变化;流式细胞仪分析细胞周期变化,DNA片段化电泳检测细胞凋亡。结果 P16转染组外源性p16基因在Ec109细胞中表达后,细胞生长速度减慢,克隆形成能力下降,瞬时表达时有细胞凋亡发生,稳定表达后细胞存在G1期阻滞;空载体转染组和未转染组均未观察到以上结果。结论 脂质体介导的外源性p16基因转染对Ec109细胞有生长抑制作用,p16基因瞬时表达可诱导细胞凋亡。 相似文献
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MAP30苦瓜抗HIV蛋白对细胞内HBeAg表达抑制作用的定量分析 总被引:6,自引:0,他引:6
目的:研究MT为3000的苦瓜抗HIV蛋白(MAP30)对2.2.15细胞内HBV基因表达的抑制作用。方法:将HBV DNA转染的人肝癌细胞株2.2.15,在MAP30存在的情况下培养后,进行间接免疫荧光染色,用共聚焦技术定量分析细胞内HBeAg的表达。结果:与对照组相比较,MAP30培养的细胞内HBeAg荧光量明显减少。结论:MAP30对2.2.15细胞内HBeAg的表达有明显的抑制作用。 相似文献
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目的 构建丙型肝炎病毒(HCV)cDNA与荧光素酶(Luc)融合基因可调控逆转录病毒载体,以建立容易检测的HCV体外细胞模型。方法 利用基因重组技术,将HCV5’非编码区(5’NCR)和/或核心(C)区基因克隆于pGEM-Luc-DNA载体,使其与Luc基因相融合,然后再将融合基因插入可调控逆转录病毒载体(PBPSTR1)。结果pCEM-HCVl和pBPSTRl-HCV经酶切鉴定,HCV5’NCR和/或C区cDNA已与Luc基因融合,并被克隆于pBPSTRl。结论 通过体外分子克隆技术可使HCV基因cDNA带上Luc报告基因,并可克隆于逆转录病毒载体,为建立易检测的HCV细胞模型和进一步抗病毒基因治疗以及药物的筛选奠定了基础。 相似文献
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MAP30 抗乙型肝炎病毒的体外实验 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 :探讨MAP30 (momordicaanti HIV proteinof30ku)体外抗乙型肝炎病毒 (HBV)的作用 .方法 :以HBVDNA转染的人肝癌细胞株 (HepG2 .2 .15 )为靶细胞 ,与MAP30共同温育 10d ,观察对细胞的毒性 ;用ELISA、荧光定量PCR和Southern印迹法分别检测培养上清中HBsAg ,HBVDNA和细胞内HBVDNA .结果 :MAP30能显著减少HepG2 .2 .15细胞培养上清液中HBsAg ,HBVDNA的分泌 ,在第 8日时 ,对HBsAg抑制率为 5 0 .4 9% ,HBVDNA定量 <1× 10 7拷贝·mL-1;Southern印迹法显示MAP30能抑制HBV复制中间体及共价环状闭合DNA .MAP30未发现对细胞有毒性作用 .结论 :MAP30具有较强的体外抗HBV作用 ,作为新的抗病毒植物蛋白 ,具有其临床应用价值 相似文献
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目的 探讨抗血管内皮生长冈子165(VEGF165)核酶对人肺腺癌细胞生物学特性的影响。方法设计合成针对VEGF165 212位点的锤头状核酶(vascular endothelial growth factor ribozyme,VRZ)及其突变体(mutant VRz,mVRz),体外检测核酶的剪切活性。采用亚克隆技术,构建腺病毒介导的抗VEGF165核酶真核表达载体pAdVRz,用重组腺病毒感染人肺腺癌细胞A549,分别采用Northern blot印迹杂交、流式细胞仪、透射电镜和激光共聚焦等技术,观察感染前后A549细胞的生物学性状的改变。结果成功地合成了具有明显剪切活性的抗VEGF165核酶VRz及其重组腺病毒表达载体rpAdVRz,并在A549细胞中获得表达。重组腺病毒感染细胞的VEGF165表达减少了87%,而生物学性状不受外源基因表达的影响。结论抗VEGF165核酶能够显著抑制人肺腺癌细胞内VEGF165的表达,为进一步进行肺癌的抗血管治疗提供了实验基础。 相似文献
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目的:构建能表达HCV不同结构基因(C、C E1、C E1 E2)的腺病毒表达载体的穿梭质粒,为进一步包装能高效表达HCV不同结构蛋白的腺病毒载体做准备。方法:用分别含有Bg1 Ⅱ及HindⅢ酶切位点的HCV不同片段结构基因上、下游引物,以含有HCVH株基因序列的质粒pBRTM/HCV-3011为模板,通过PCR扩增获得HCV3种不同结构基因片段,基因片段回收后,分别以BglⅡ及Hing Ⅲ双酶切,定向插入到腺病毒穿梭质粒Pad.CMV-Link.1中CMV启动子下游Bgl Ⅱ与HindⅢ位点之间。获得3种重组腺病毒穿腺病毒穿梭质粒pad.HCV-C、Pad.HCV-CE1和Pad.HCV-S(C E1 E2)。通过Bgl Ⅱ/Hind Ⅲ双酶切,聚合酶链反应(PCR)及插入片段序列测定对质粒进行了三重鉴定,以抗HCV C单克隆抗体为一抗,利用间接免疫荧光法及Western Blot检测了3种穿梭质粒在HepG2细胞中的瞬时表达。结果:酶切、PCR及测序鉴定证实,3种穿梭质粒的插入片段分别为HCV C、C E1和C E1 E2区基因片段,免疫荧光及Western Blot法检测表明其可以在HepG2细胞中瞬时表达。结论:构建的3种腺病毒穿梭质粒分别可以表达HCV不同段的结构基因,为包装表达HCV不同结构基因的腺病毒载体奠定了基础。 相似文献