脊髓性肌萎缩症的基因诊断及其应用研究

目的 对脊髓性肌萎缩症患者及携带者进行基因诊断和产前基因诊断.方法 对26例脊髓性肌萎缩症患者应用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restiction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测SMN1基因第7外显子是否缺失;对于患者的父母应用多重PCR结合变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)的方法进行携带者诊断;而既往生产过患儿的孕妇于孕中期抽取羊水,进行产前基因诊断.结果 26例脊髓性肌萎缩症患者中查出25例存在SMN1基因第7外显子纯合缺失;患者的父母全部为SMN1基因第7外显子杂合缺失携带者;对20名既往生产过患儿的孕妇进行了产前诊断,8名存在SMN1基因第7外显子纯合缺失.结论 PCR-RFLP、多重PCR结合DHPLC技术可应用于患者及携带者基因诊断;PCR-RFLP可用于脊髓性肌萎缩症的产前基因诊断.     

5''HOXD基因与单纯性马蹄内翻足的相关性分析

目的检测HOXD10、HOXD12、HOXD13基因内4个已知单核苷酸多态（single nueleotide polymorphisins,SNP）rs2593778、rs847154、rs847151、rs13392701在单纯性马蹄内翻足核心家系中的分布情况，分析各个SNP位点及所构成单倍型与单纯性马蹄内翻足的相关性。方法应用限制性片段长度多态性技术结合测序，分析84个单纯性马蹄内翻足核心家系4个SNP位点基因型；应用ETDT软件统计分析各SNP位点基因型与单纯性马蹄内翻足的相关性；应用TRANSMIT软件构建单倍型并统计分析单倍型频率是否存在差异。结果位于HOXD12基因5’侧翼序列的SNP位点rs847154和位于HOXD13第1外显子的SNP位点rs13392701在单纯性马蹄内翻核心家系中存在传递不平衡（P〈0．05）；位于HOXD12基因第1外显子的SNP位点rs847151未检测到多态；位于HOXD10第1外显子的SNP位点rs2593778经ETDT分析无统计学意义。结论HOXD12基因5’侧翼序列的SNP位点rs847154和位于HOXD13第1外显子的SNP位点rs13392701与单纯性先天性马蹄内翻足有明显的相关性，提示HOXD12、HOXD13可能是单纯性马蹄内翻足重要的易感基因。     

聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳在苯丙酮尿症产前基因诊断中的应用

苯丙酮尿症 (PKU)是常染色体隐性遗传病 ,因苯丙氨酸羟化酶 (PAH)基因突变致酶活性降低或丧失而造成高苯丙氨酸血症和智力低下。为进一步提高PKU产前基因诊断率 ,我们用s聚合酶链反应 变性梯度凝胶电泳 (PCR DGGE)对PCR短串联重复序列 (PCR STR)连锁分析 ,对家系的PAH基因的相对突变热点区域外显子 6 (e6 )、e7和e12作突变检测 ,以探讨其在PKU产前基因诊断的应用价值。一、对象和方法1.对象 :4个经典型PKU家系及其成员的外周血标本由中国医科大学第二临床医院提供。2 .DNA提取 :PKU家系父母外周血各 3ml,羊水 (妊娠16～ 2 …     

散发性血友病A家族的BclI位点RFLP连锁分析

本文应用 Southern 印迹杂交和 PCR 扩增技术对6个散发性血友病 A 家系进行了限制性片段长度多态性分析,并结合凝血资料,确定了其中二个家系中的母亲和一个姐姐为女性携带者,这一结果为遗传咨询和产前诊断提供了信息。     

应用聚合酶链式反应进行微量干血痕的性别鉴定

聚合酶链式反应(Polymerase chainreaction,PCR)是近年发展起来的分子生物学技术,广泛应用于生物医学各个领域。我们成功地将PCR技术应用于微量干血痕的性别鉴定。现将结果摘要报道如下。收集3例健康男性、1例健康女性静脉血,经EDTA抗凝。分别取微量抗凝血样点在层析滤纸上,制备血痕,空气干燥     

超早期良肢位对偏瘫病人日常生活能力的影响

[目的 ]探讨早期良肢位对提高偏瘫病人日常生活能力的效果。 [方法 ]选择急性脑卒中偏瘫病人64例 ,随机分成实验组和对照组 ,两组均接受 4周相同的神经内科常规治疗及护理。试验组自发病当天起保持良肢位 ,对照组取自然体位。发病当天和发病 4周分别用Barthel指数计分法对病人日常生活能力进行评估。 [结果 ]发病当天两组病人Barthel指数评分无统计学意义 (P >0 .0 5) ,4周后Barthel评分实验组明显优于对照组。 [结论 ]偏瘫病人早期保持良肢位能明显抑制异常姿势 ,对提高日常生活能力有效     

应用PCR-SSCP分析技术检测苯丙氨酸羟化酶基因突变和多态

应用聚合酶链式反应—单链构象多态分析(PCR-SSCP分析)技术检测苯丙酮尿症患者和正常人苯丙氨酸羟化酶基因外显子7。在9例苯丙酮尿症患者中检出3例为突变纯合子,在正常人和苯丙酮尿症患者中均检出DNA多态。研究结果对苯丙酮尿症的基因诊断和突变基因分析有重要应用价值。     

应用FⅧ基因RFLP对甲型血友病的连锁分析

甲型血友病(hemophiliaA)是先天性凝血障碍中最常见的一种出血性疾病,由凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因缺陷所导致的X—连锁隐性遗传病。临床上对甲型血友病的治疗,携带者检测和产前诊断尚无满意方法。现已知FⅧ基因定位于Xq28,国