燃煤型氟中毒大鼠诱导型一氧化氮合酶蛋白表达、血清睾酮与生精细胞凋亡的相关性研究

目的:研究燃煤型氟中毒大鼠睾丸组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达、血清睾酮(T)与生精细胞凋亡的相互关系,探索燃煤型氟中毒对睾丸生殖功能损伤的机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为4组:对照组、低氟组、中氟组、高氟组。各染毒组喂饲含不同比例的燃煤型氟中毒病区煤烘玉米的饲料,建立雄性大鼠燃煤型氟中毒模型。分别于染毒4和6个月后以股动脉放血法处死大鼠,各时间点每组处死大鼠5只。采用RIA法测定大鼠血清T水平;检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、iNOS活性;原位缺口末端标记(TUNEL)法检测大鼠睾丸生精细胞凋亡情况并计算凋亡指数(AI);免疫组织化学染色SP法观察iNOS蛋白表达的变化。结果:成功建立雄性大鼠氟中毒模型。大鼠血清T水平在4和6个月时低氟组[(28.37±0.19)nmol/L、(14.68±0.36)nmol/L]、中氟组[(25.85±0.23)nmol/L、(9.08±0.31)nmol/L]、高氟组[(23.63±0.29)nmol/L、(4.89±0.54)nmol/L]较对照组[(29.77±0.43)nmol/L、(29.97±0.36)nmol/L]均降低(P0.05或P0.01),且各染氟组间差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。睾丸生精细胞AI在4和6个月时低氟组(8.83±1.64、10.40±2.70)、中氟组(17.24±3.96、22.20±3.96)、高氟组(44.21±7.85、49.60±4.77)较对照组(0.46±0.11、0.54±0.11)升高(P均0.01),且各染氟组间差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。睾丸组织iNOS蛋白表达的OD值在4和6个月时低氟组(0.073 3±0.008 5、0.108 4±0.012 6)、中氟组(0.142 5±0.027 2、0.207 7±0.020 4)、高氟组(0.527 5±0.079 1、0.717 3±0.065 6)较对照组(0.001 3±0.000 2、0.001 6±0.000 1)增加(P0.05或0.01),且各染氟组间差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。iNOS蛋白表达量与生精细胞AI呈正相关(r=0.962,P0.01);血清T水平与生精细胞AI呈负相关(r=-0.744,P0.01)。结论:血清T水平改变和睾丸组织iNOS蛋白表达调控改变可能参与燃煤型氟中毒对睾丸生殖功能损害的过程。     

单孔胸腔镜治疗自发性气胸

目的：探讨单孔胸腔镜治疗自发性气胸的可行性。方法回顾分析2010年7月～2013年7月114例单孔胸腔镜手术治疗自发性气胸的临床资料,均采用自制可弯曲双关节腔镜专用器械行单孔胸腔镜手术。结果手术均顺利完成,无中转开胸,未增加穿刺孔,无术后大出血等并发症。手术时间（42．4±11．4） min,术后胸管留置时间（1．8±0．4） d,术后住院时间（5．4±3．4）d。术后随访1～36个月,平均20个月,其中76例＞12个月,无切口感染、出血、积液、气胸复发等并发症。结论单孔胸腔镜手术治疗自发性气胸是安全、微创、可行的。     

恶性肿瘤患者血浆肿瘤标志物含量与血液流变学指标的相关性研究

目的探讨常见恶性肿瘤患者血浆多种肿瘤标志物含量和血液流变学指标变化的相互关系。方法对90例临床常见恶性肿瘤患者进行血液流变学指标和甲胎蛋白、癌胚抗原、癌抗原19-9、癌抗原125、癌抗原724五种肿瘤标志物含量的测定;同时设定52例健康体检者作为正常对照组。结果恶性肿瘤患者的全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数和红细胞刚性指数均高于对照组(P<0.05);恶性肿瘤患者血浆肿瘤标志物的阳性项数不同,血液流变学指标之间存在显著性差异(P<0.05)。结论恶性肿瘤患者存在明显的血液流变学异常,并且与血浆肿瘤标志物含量相关。联合检测血液流变学指标及肿瘤标志物含量对恶性肿瘤患者判断病情及临床治疗有一定的实际意义。     

镍钛合金天鹅记忆接骨器对成人上肢骨骨折愈合应力遮挡效应的评价

背景:国内外诸多学者致力于研究如何通过内固定材料及设计的改变尽量减少应力遮挡效应,取得了一定的进展.目的:进一步验证镍钛合金天鹅型记忆接骨器固定下的快速高质量的骨愈合,从临床研究角度评价天鹅记忆接骨器的应力遮挡效应.设计、时间及地点:对比观察实验.于2001-03/2003-08在解放军第二军医大学长海医院骨科进行.对象:随机从临床病例中选取采用镍钛形状记忆天鹅接骨器内固定和不锈钢板内固定后骨折完全愈合的上肢骨干骨折患者.天鹅记忆接骨器组20例,男14例,女6例:年龄14～34岁;手术至取出内固定时间(11.2±3.7)个月.不锈钢接骨板组20例,男16例,女4例;年龄16～36岁;手术至取出内固定时间(12.6±4.1)个月.方法:征得患者同意后,在忠者行内固定取出时,天鹅记忆接骨器组在鹅体部下和加压枝下取极少量皮质骨;不锈钢板组在钢板下、钢板对侧取极少量皮质骨.进行皮质骨的组织学观察、X射线观察和CT扫描定量.主要观察指标:①光镜下进行骨细胞形念、哈弗氏管等组织学观察.②X射线摄片观察骨折愈合情况.③CT测量骨皮质CT值.结果:①组织学观察:天鹅记忆接骨器组鹅体部下和加压枝下骨皮质中,板层骨结构规整,无明显骨质疏松和吸收:不锈钢接骨板组钢板下骨质疏松、骨质吸收明显,可见含有大小不一吸收腔,哈佛氏管扩大,骨细胞萎缩、骨陷窝增大,而钢板对侧骨质吸收现象轻于板下.②X射线摄片观察:天鹅记忆接骨器组无外骨痂,骨皮质厚度、密度与正常骨质相似;不锈钢接骨板组板下皮质骨吸收变薄,钢板对侧骨皮质厚度与密度多大于板下.③CT扫描定量:组内不同部位比较,天鹅记忆接骨器组中,鹅体部下和加压枝下CT值差异无显著性意义(P>0.05):不锈钢接骨极组中,钢板下CT值低于钢板对侧.CT值(P<0.01):组间比较,不锈钢接骨板组中两部位CT值均低于天鹅记忆接骨器组中两部位CT值(P<0.05,P<0.01).结论:与不锈钢接骨板相比,天鹅记忆接骨器对固定骨段具有较低的应力遮挡效应.     

两种不同探头在DDG-3300K肝功能储备分析仪上的应用效果

[目的]观察利用DDG-3300K肝功能储备分析仪评价肝脏储备功能过程中使用两种不同探头的效果。[方法]利用DDG-3300K肝功能储备分析仪对300例病人进行吲哚菁绿检测分析(排泄试验)评价肝脏储备功能,随机分为手指探头组150例和鼻夹探头组150例,检测前均进行健康教育,检测过程中关注病人的感受,检测后严密观察两组病人有无不良反应,评价两组病人一次检测成功率。[结果]手指探头组一次检测成功率高于鼻夹探头组(P0.05)。[结论]评价肝脏储备功能过程中使用手指探头检测方式方法优于鼻夹探头。     

自体周围神经植入治疗脊髓陈旧性不完全性断裂伤

背景：临床上常可发现，脊髓损伤患者在排除了脊髓压迫与不稳定等因素外，许多影像学改变极为相似的患者其感觉运动功能的恢复程度差别却很大。研究表明为硬脊膜内的粘连、纤维索条的牵拉、脊髓本身的创伤后瘢痕化、软化、囊肿所致。目的：观察脊髓减压松解、神经组织植入治疗对陈旧性脊髓不完全性断裂伤的临床效果。设计：患者自身前后对照观察。对象：选择1994—06／2002—08解放军第二军医大学长海医院骨科外伤性陈旧性不完全瘫痪患者16例。损伤平面T7-9 5例，T10-12 7例，L1，2 4例。16例患者均曾于伤时行脊柱减压内固定，4例后路手术患者于本次手术前已取出内固定。6例患者曾针对外伤性不完全瘫痪进行过高压氧等治疗。有尿便功能障碍11例；神经根性疼痛4例。按Frankel分级：B级12例，C级4例。单位：解放军第二军医大学长海医院骨科。方法：采用显微外科技术切开患者硬脊膜，将蛛网膜、软脊膜、齿状韧带、神经根起始段与脊髓的粘连及周围的纤维条索彻底解除。将被瘢痕缩紧段的脊髓行3～6个切口纵行切开、深0．1～0．2mm、长度超过损伤节段；若发现脊髓内囊肿，则切开后吸出其中液体。然后．将自身腓肠神经用显微外科方法去除外膜、束膜．并剪开、使神经组织的质地、外观类似马尾组织．将其排列呈多条状、纵行植入已切开的脊髓处或原囊肿腔内，用9-0的无损伤线与软脊膜适当固定。最后用外科防粘连膜和骶棘肌瓣覆盖。主要观察指标：患者术后感觉和运动及尿便功能恢复情况。结果：16例患者平均随访2．5年，均进入结果分析。所有患者感觉和运动均增加1级以上．11例术前有尿便功能障碍者症状明显改善，其中6例按Frankel肌力分级，双下肢主要肌群肌力术后较术前增加2级以上，达4级，恢复行走能力，10例增加1级。结论：解除硬脊膜内粘连，瘢痕段脊髓切开．自体周围神经组织植入桥接．可以明显改善外伤性陈旧性不完全瘫痪患者的尿便功能并恢复其部分感觉运动功能。     

APC-CIK生物免疫细胞联合化疗和中医药治疗恶性肿瘤的临床疗效观察

目的:观察APC-CIK生物免疫细胞联合化疗和中医药治疗恶性肿瘤的临床疗效。方法:随机选择2015年4月-2016年4月期间钦州市中医医院肿瘤一科、二科收治的ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者30例,将患者随机均分为对照组和观察组。对照组采用化疗及中医药治疗,观察组在对照组治疗的基础上联合APC-CIK免疫细胞治疗。评估患者机体免疫功能的变化、临床疗效、不良反应及Karnofsky评分及疗效。结果:治疗后,两组患者CD3+、CD4+、CD8+百分比及CD4+/CD8+比值升高;但观察组患者的CD3+、CD4+、CD8+百分比及CD4+/CD8+比值增高的效果明显优于对照组;观察组患者的临床疗效优于对照组、观察组患者的不良反应低,优于对照组。治疗后,观察组患者的饮食、情绪、睡眠及体力等方面评分明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组的改善率(80.0%)明显优于对照组的60.0%,差异具有统计学意义(x^2=5.934,P=0.011)。结论:采用APC-CIK联合化疗和中医药治疗恶性肿瘤,能够提高患者的免疫功能,减毒增效,提升患者的生活品质。     

基于肺与大肠相表里论治肋骨骨折伴创伤性湿肺临床研究

目的:观察基于肺与大肠相表里论治肋骨骨折伴创伤性湿肺的临床疗效。方法:选择本院收治的肋骨骨折伴有创伤性湿肺的保守治疗患者,共100例,随机分为2组各50例。2组均采用相同的常规治疗,治疗组在常规治疗方案的基础上应用基于肺与大肠相表里理论为指导的中医药方剂治疗,予复元活血汤合小承气汤。观察2组患者各项指标的变化情况及临床疗效。结果:临床总有效率治疗组96.0%,对照组88.0%,2组临床总有效率比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,2组各项指标,包括疼痛评分、肺部挫伤Ⅰ级百分比、大便次数、呼吸频率、氧分压、白细胞计数等比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:基于肺与大肠相表里论治肋骨骨折伴创伤性湿肺的临床疗效良好。     

稳定表达EGFP-LC3蛋白SH-SY5Y细胞系的构建

目的:建立稳定表达微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)与绿色荧光蛋白(EGFP)形成的融合蛋白(EGFP-LC3)的人神经母细胞瘤株SH-SY5 Y细胞系,验证EGFP-LC3点状聚集物能够实时直观地反映自噬小体和自噬流.方法:以人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)的cDNA为模板,克隆LC3,并连接EGFP绿色荧光蛋白.将EGFP-LC3连接入慢病毒载体GV348中,构建慢病毒表达载体EGFP-LC3-GV348.慢病毒转染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5 Y细胞),使用3μg/mL嘌呤霉素筛选并处理细胞1月,筛选得到EGFP-LC3稳转系.诱导自噬后,用共聚焦显微镜观察LC3荧光斑点并定量分析.Western blot检测目的蛋白表达情况.结果:经酶切证实,EGFP-LC3-GV348慢病毒表达载体构建正确.在激光共聚焦显微镜下,可以观察到细胞内的绿色荧光EGFP代表的自噬小体,活体染料LysoTracker Red DND-99将溶酶体染成红色荧光,红色荧光与绿色荧光重叠代表自噬溶酶体.无血清诱导自噬后,自噬小体(绿色荧光斑点)明显增加,差异有统计学意义(P<0.001).Western Blot免疫印迹可见EGFP-LC3融合蛋白表达条带.结论:成功构建了稳定表达EGFP-LC3的SH-SY5 Y细胞系,EGFP-LC3荧光斑点可以直观实时反映自噬囊泡,为进一步探讨神经退行性疾病的自噬机制提供了实验基础.     

FGF2的生物信息学分析及其在低氧神经保护中的作用研究*

目的: 观察FGF2在低氧及低氧预适应条件下小鼠海马神经元细胞中的表达变化,探究FGF2是否参与低氧耐受神经保护作用。方法: 使用生物信息学方法进行搜索和鉴定FGF2基因家族成员。在细胞层面建立低氧和低氧预适应模型,通过Western-blot、qRT-PCR检测细胞中FGF2表达情况。结果: FGFs家族分为7个亚家族,其中FGF2含有一个由17个氨基酸组成的FGF受体结合域,能够与特定的FGF受体结合进行信号的转导。在细胞层面,相比于空白对照组(C),低氧组(H)和低氧预适应组(HPC)FGF2在mRNA水平和蛋白水平的表达均有所下降(P＜0.05),而与H组相比,HPC组FGF2 mRNA水平和蛋白水平的表达有所升高(P＜0.05)。结论: FGF参与低氧预适应的神经保护作用。