人参皂苷对波动性高糖大鼠心肌损伤标志物的影响

目的:观察人参皂苷对波动性高糖大鼠氧化应激水平及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肾脏及主动脉组织表达的影响。方法:将48只雄性SD大鼠随机分成正常对照组8只(N组)和糖尿病模型组40只。用高脂饲料喂养模型组大鼠4周,予小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,将其随机分为稳定高糖组(S组)8只和波动性高糖模型组32只,错时注射葡萄糖、胰岛素制备血糖波动模型。2周后,将波动性高糖模型组随机分为人参皂苷低(FL组)、中(FM组)、高剂量组(FH组)及波动性高糖组(FO组),各8只,人参皂苷低、中、高各剂量组予相应剂量[14 mg(kg·d)、28 mg/(kg·d)、56 mg/(kg·d)]的人参皂苷灌胃8周,波动性高糖组(FO组)给予等量的生理盐水灌胃。测定大鼠血清活性氧(ROS)浓度,取肾脏及主动脉组织,观察其病理变化,并测定MCP-1和TNF-α在大鼠肾脏及主动脉组织的表达情况。结果:与正常对照组(N组)比较,稳定高糖组(S组)及波动性高糖组(FO组)各时间点血糖水平明显增高;血清ROS浓度均明显增加;血管和肾脏组织MCP-1和TNF-α的表达均增多(P<0.05)。与稳定高糖组(S组)比较,波动性高糖组(FO组)各时间点的血糖水平变化较大(P<0.05),其在1天内有2个明显的血糖波动高峰和低谷;血清ROS浓度明显增加;血管和肾脏组织MCP-1和TNF-α表达增多(P<0.05)。与波动性高糖组(FO组)比较,人参皂苷低(FL组)、中(FM组)、高剂量组(FH组)血清ROS浓度均明显下降,血管和肾脏组织组MCP-1和TNF-α表达均明显下降(P<0.05)。人参皂苷低剂量组(FL组)、中剂量组(FM组)、高剂量组(FH组)组间比较,人参皂苷浓度越高,血清ROS浓度、MCP-1和TNF-α的表达越低(P<0.05)。结论:人参皂苷可以下调氧化应激,抑制MCP-1和TNF-α的过表达对血管组织的损伤,对波动性高糖所致血管病变有一定的保护作用。     

双氢青蒿素通过调节凋亡相关蛋白的表达及活性氧的产生而抑制胰腺癌JF-305细胞的增殖

探讨双氢青蒿素诱导人胰腺癌JF-305细胞凋亡作用及活性氧在双氢青蒿素诱导JF-305细胞凋亡中的作用。采用MTT法考察不同浓度双氢青蒿素对人胰腺癌JF-305细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期,Hochest 333258荧光染色法观察细胞凋亡形态,Annexin V荧光染色法检测JF-305细胞凋亡的变化,DCFH-DA检测凋亡过程中活性氧(ROS)的变化。Western blot检测细胞内Bax,Bcl-2,Cleaved caspase-3,Cleaved caspase-9和Cyto C蛋白表达的变化。与对照相比,双氢青蒿素作用JF-305细胞48 h,细胞增殖受到明显抑制(P0.05);细胞被阻滞于G2/M期;细胞出现核浓缩聚集、碎裂的凋亡形态,细胞凋亡比例升高(P0.05);DCFH-DA检测双氢青蒿素给药组细胞ROS明显升高(P0.05);Western blot结果显示,双氢青蒿素作用后细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,Cleaved caspase-3,Cleaved caspase-9和Cyto C蛋白表达升高。双氢青蒿素能诱导JF-305细胞凋亡,其凋亡过程可能与ROS的生成增加相关。     

镇肝熄风汤含药血清激活Nrf2/ARE信号通路对6-OHDA 诱导PC12 细胞氧化应激的保护作用

目的：研究镇肝熄风汤含药血清对6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）致PC12细胞氧化应激的保护作用及其相关机制。方法：应用镇肝熄风汤低剂量（8 g?kg-1）、中剂量（16 g?kg-1）和高剂量组（32 g?kg-1）大鼠的含药血清或空白血清预处理PC12细胞1 h后,加100 μM 6-OHDA共孵育24 h后收集细胞。二氯荧光素双醋酸盐（DCFH-DA）荧光探针染色法结合荧光酶标仪检测活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）水平,采用实时定量PCR检测核转录因子E2相关因子2（Nuclear Factor-erythroid 2 Related Factor 2,Nfe2l2））基因Nfe2l2、血红素加氧酶-1（Heme Oxygenase-1,HO-1）、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基（Glutamate-CysteineLigase Catalyticsubunit,GCLc）和调节亚基（GCLm）mRNA表达。采用荧光素酶报告基因系统检测抗氧化反应元件（Antioxidant Response Element,ARE）活性。结果：镇肝熄风汤含药血清抑制了6-OHDA诱导的氧化应激,上调了6-OHDA处理细胞中Nfe2l2、HO-1和GCLc mRNA表达,但是对GCLm mRNA表达没有显著影响。结论：镇肝熄风汤含药血清对6-OHDA诱导PC12细胞氧化应激具有保护作用,其机制可能与上调Nfe2l2 mRNA表达,使ARE激活进一步诱导其下游II相解毒酶基因和抗氧化酶基因HO-1和GCLc mRNA表达有关。     

健脾消癥方诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用研究

目的:探讨健脾消癥方对肝癌细胞HepG2凋亡的影响及机制。方法:MTT法观察健脾消癥方对肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721增殖的影响,Hochest 33342染色、透射电镜观察健脾消癥方对HepG2细胞超微结构的改变作用,DCFH-DA探针法观察健脾消癥方对HepG2活性氧水平的影响,Western blot检测健脾消癥方对HepG2的凋亡相关半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9表达的影响。结果:健脾消癥方作用HepG2 48h后,细胞形态及超微结构出现典型的凋亡特点,细胞内活性氧浓度升高,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达上调。结论:健脾消癥方对HepG2有较好的诱导凋亡的作用,其作用机制可能与其增加细胞活性氧(ROS)水平及下调Caspase-3、Caspase-9蛋白有关。     

亚砷酸钠对NE-4C细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的 探究亚砷酸钠(NaAsO₂)对小鼠神经干细胞(NE-4C细胞)增殖、迁移、凋亡及其机制的影响。方法 以0(对照)、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2μmol/L NaAsO₂干预NE-4C细胞24h,分别采用CCK-8法、Transwell实验、Hoechst 33342荧光染色法、DCFH-DA荧光探针法检测NaAsO₂对NE-4C细胞增殖、迁移、凋亡及活性氧的影响,Western blot法检测细胞内质网应激相关蛋白的表达。结果 NE-4C细胞增殖和迁移能力随NaAsO₂浓度的升高呈现降低趋势,凋亡细胞和细胞内活性氧水平则呈现逐步升高趋势,提示氧化应激在NE-4C细胞凋亡中发挥作用;GRP78、caspase-12、CHOP等内质网应激相关蛋白的表达水平随NaAsO₂浓度的增加而增加。结论 NaAsO₂可抑制NE-4C细胞增殖及迁移,可能通过提高细胞内活性氧水平,引起细胞内质网应激,从而诱导细胞凋亡。     

褪黑素调控Nrf2/ARE信号通路延缓髓核间充质干细胞退变的实验研究

  目的  探讨褪黑素对氧化应激条件下的大鼠髓核间充质干细胞(NPMSCs)的影响及调节机制。  方法  使用差速贴壁法获取大鼠NPMSCs。显微镜下观察细胞状态,鉴定第三代细胞三系分化潜能和细胞表面免疫标志物;采用CCK-8法检测不同浓度过氧化氢和褪黑素诱导对大鼠NPMSCs活力的影响确定最佳浓度和实验分组;免疫荧光和流式细胞学技术检测NPMSCs活性氧水平;免疫印迹分析外基质标志蛋白(Ⅱ型胶原、糖胺聚糖)和通路核心蛋白(Nrf2、HO-1)表达情况。  结果  褪黑素在氧化应激下保护了NPMSCs的活性,且1 μmol/L浓度保护效应最为明显(0.717±0.018,t=7.102, P＜0.01)。褪黑素可抑制NPMSCs在H₂O₂诱导后的活性氧水平(阳性率70.0% vs. 32.7%)。此外,褪黑素还能显著提高Nrf2/ARE信号通路中关键蛋白核因子E2相关因子(1.925±0.024,t=13.150,P＜0.01)和血红素氧合酶-1(1.605±0.019,t=12.940, P＜0.01)的活性,改善NPMSCs的功能。褪黑素治疗后,细胞基质蛋白Ⅱ型胶原(0.850±0.010,t=25.200,P＜0.01)和糖胺聚糖(0.335±0.013,t=10.640,P＜0.01)表达增加。  结论  褪黑素通过调控Nrf2/ARE信号通路可以影响NPMSCs退变的生物学特性。      

氧化应激介导雄激素受体信号重激活在前列腺癌演进中的分子机制研究进展

晚期前列腺癌患者经过去势治疗后,体内产生大量的活性氧加重氧化应激。本文阐述了氧化应激调节雄激素受体（AR）及其信号通路的不同分子机制,例如氧化应激介导转录因子诱导AR过表达,导致瘤内局部雄激素水平升高,增加AR对低水平雄激素的敏感性以及诱导旁路途经导致AR激活,进而探究前列腺癌向去势抵抗性前列腺癌演进的分子机制,为势抵抗性前列腺癌的预防、诊断、治疗提供新的思路。     

活性氧调节因子1和c-反应蛋白评估重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的临床价值

目的 分析活性氧调节因子1(Romo1)和C-反应蛋白(CRP)对重度阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAHS)的评估价值.方法 收集2017年1月至2020年6月在驻马店市中心医院呼吸内科确诊的OSAHS患者160例,根据呼吸暂停低通气指数(AHI)将患者分为轻度(47例)、中度(62例)和重度(51例)组,选择同时期入选的健康志愿者30例为对照组.收集研究对象清晨空腹血5 mL,检测其外周血中Romo1和CRP水平.采用YH-2000 A多导睡眠监测仪监测研究对象AHI值、平均经皮血氧饱和度(SpO2)、最低SpO2和血氧饱和度低于90％的时间比率(TS90％).Pearson相关性分析重度OSAHS组Romo1和CRP与AHI、氧饱和度指标的相关性,受试者工作曲线(ROC)检测Romo1、CRP对重度OSAHS的预测价值.结果 对照组、轻度OSAHS、中度OSAHS和重度OSAHS组间Romo1水平分别为(152.3±8.6)mg/L、(165.1±12.3)mg/L、(210.5±10.5)mg/L和(247.6±14.2)mg/L,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);4组CRP水平分别为(2.1±0.5)mg/L、(4.2±1.0)mg/L、(4.6±1.7)mg/L和(5.3±1.2)mg/L,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),且重度OSAHS组Romo1和CRP水平最高.Pearson相关性分析结果显示,Romo1和CRP与AHI和TS90％呈正相关,与平均SpO2和最低SpO2呈负相关.Romo1和CRP预测重度OSAHS的曲线下面积(AUC)分别为0.875、0.764,Romo1预测重度OSAHS的临床价值高于CRP(Z=5.320,P<0.001).结论 Romo1和CRP在重度OSAHS中水平较高与AHI和氧饱和度指标相关,Romo1对重度OSAHS的预测价值高于CRP.     

羧甲司坦L-精氨酸盐的合成及其对支气管上皮细胞的保护作用

羧甲司坦（CMC）是治疗慢性阻塞性肺病的常用药,长期服用对胃肠道产生严重刺激。L-精氨酸是一氧化氮（NO）合酶（NOS）的底物,在体内可转化为对心血管及胃肠道等有益的NO。L-精氨酸属碱性氨基酸,能与某些含羧酸基团的化合物成盐以改善原药的水溶性,并可能由于促进NO的释放带来活性的提高或毒副作用的缓解。因此,本文设计、合成了CMC的L-精氨酸盐（CMCA）,并测试其理化性质以及在香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞损伤模型中清除活性氧（ROS）、抗细胞凋亡和NO释放的能力。结果表明,CMCA能有效捕获ROS,释放NO,并抑制细胞凋亡,效果优于CMC或L-精氨酸,提示该化合物值得深入研究和开发。     

缺氧对人肺动脉平滑肌细胞内活性氧及细胞色素C的影响及意义

目的观察缺氧对人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)内活性氧(ROS)及细胞色素C表达的影响,探索缺氧性肺动脉高压的形成机制。方法购买hPASMCs,分别在常氧条件和缺氧条件下进行培养,连续细胞培养72h,并观察细胞增殖情况;使用CCK-8法分别于细胞培养后的1、24、48及72 h连续观察细胞增殖情况,使用分子探针对上述时间节点hPASMCs内的ROS水平进行检测,使用Westernblot检测hPASMCs内细胞色素C的表达水平。结果常氧组与缺氧组在1、24、48及72 h的培养过程中,其细胞增值水平的OD值分别为缺氧组(0.306±0.004、0.733±0.009、0.973±0.018和1.258±0.030)、常氧组(0.307±0.004、0.459±0.022、0.751±0.021和1.151±0.037),2组细胞的增殖水平差异有统计学意义(P<0.05),缺氧组的hPASMCs增殖水平明显高于常氧组;2组hPASMCs在1、24、48及72 h的培养过程中,其细胞内ROS荧光OD值差异分别为缺氧组(2.32±0.192、3.46±0.270、4.12±0.25...