正常人成纤维细胞老化过程中活性氧水平的变化

目的 研究正常人成纤维细胞在老化过程中细胞活性氧水平的变化。方法 取常规体外培养的原代人成纤维细胞,按不同传代数（PD22－24和PD50－52）分为两组,代表老化过程中两个阶段（早期和中－晚期）,用流式细胞仪检测罗丹明123显示细胞活性氧水平,同时用β-半乳糖苷酶组化染色,形态观察衰老细胞,用群体倍增时间和流式细胞周期分析显示细胞增殖情况。结果 中－晚期细胞中衰老细胞增多,活性氧水平增高,未出现增殖阻滞。结论 正常人成纤维细胞在老化过程中细胞活性氧水平呈升高趋势。     

进行期银屑病患者活性氧代谢变化探讨

目的：探讨进行期银屑病患者活性氧代谢变化。方法：采用细胞化学发光分析技术测定患者及健康对照组外周血淋巴细胞化学发光强度（ Ｌｙｃｌ）及多形核白细胞化学发光强度（ Ｐ Ｍ Ｎｃｌ）,同时测定血浆超氧化物歧化酶（ Ｓ Ｏ Ｄ）、全血谷胱甘肽过氧化物酶（ Ｇ Ｓ Ｈ Ｐｘ）以及血浆丙二醛（ Ｍ Ｄ Ａ）含量。结果：银屑病患者 Ｌｙｃｌ及 Ｐ Ｍ Ｎｃｌ较对照组显著增强（ Ｐ＜ ０．０５）,血浆 Ｓ Ｏ Ｄ活力明显增强（ Ｐ＜ ０．０５）, Ｍ Ｄ Ａ 浓度较对照组明显增高（ Ｐ＜ ００５）。全血 Ｇ Ｓ Ｈ Ｐｘ 活力较对照组显著下降（ Ｐ＜ ０．０５）。结论：进行期银屑病患者细胞功能改变,机体活性氧代谢增强,抗氧化功能下降,组织细胞损伤加快。活性氧损伤可能是该病患者皮损炎症的重要原因。     

抗氧化剂调节内毒素介导的新生儿粒细胞生成和凋亡

新生儿细胞免疫系统不成熟 ,患内毒素血症后易发展成为粒细胞减少症 ,其机制可能与活性氧 (ROS)和肿瘤坏死因子等多种炎性介质参与 ,引起粒细胞生成减少和 或粒细胞破坏增多有关。ROS不但可介导炎性损伤 ,而且作为一种具有高度活性和非特异的分子 ,可以调控细胞增殖和凋亡过程。新生儿产生ROS等炎性介质的水平与成人亦有不同。抗氧化剂如N 乙酰半胱氨酸可清除ROS ,阻断细胞内核因子 κB的活性 ,减少细胞因子的产生 ,有利于减少脂多糖引起的氧化抑制和相关脂质过氧化产物的形成 ,调节细胞的增殖和凋亡。     

活性氧与心肌细胞凋亡

活性氧 (reactiveoxygenspecies ,ROS)是生理性氧的代谢物 ,是广泛存在于体内的生理活性物质。它主要在线粒体呼吸链部位由单电子传递给氧而产生[1] 。它在许多生理生化过程中发挥着重要作用 ,同时 ,它还作为信号分子在器官、组织的发生、生长过程中起作用。然而它的大量产生、积聚会干扰细胞代谢 ,并能启动和诱导细胞程序性死亡的发生。心肌细胞的程序性死亡在心脏疾病的细胞丢失过程中发挥着重要作用 ,而多数心肌细胞凋亡通路都与活性氧密切联系在一起。活性氧诱导p5 3基因在心肌细胞的表达增加 ,P5 3蛋白又影响bcl 2蛋白家族凋亡调控系…     

活性氧与肺炎性损伤

炎症反应是机体组织对损伤因子所发生的防御反应。一些急、慢性肺部疾病均与炎症反应有关。较多的研究多集中在中性粒细胞(PMN)及其蛋白酶与炎性损伤的关系上，而有关活性氧(reacfive oxygen species，ROS)与肺炎性损伤的关系报道相对较少。中性粒细胞呼吸爆发产生活性氧自由基是肺急、慢性炎症损伤病理生理过程中的重要环节，有可能通过使用抗氧化剂控制炎症反应。     

芦荟对大鼠肝微粒体脂质过氧化损伤体外模型的影响

目的: 探讨芦荟的抗氧化作用及其剂量效应关系。方法: 通过大鼠微粒体的提取,制备了VC/Fe2+和过氧基异丙苯(CHP)脂质过氧化损伤模型,检测不同剂量芦荟轧汁干预对丙二醛(MDA)含量变化的影响,观察芦荟清除活性氧的抗氧化作用。结果: 在CHP微粒体脂质过氧化激发模型中,各芦荟干预组的MDA含量均较对照组显著降低(P﹤0.01),在VC/Fe2+模型中,低剂量芦荟轧汁干预组与高剂量干预组MDA含量较阳性对照组显著下降(P﹤0.05),并且高剂量组降低更加明显(P﹤0.01)。但中剂量芦荟轧汁组MDA含量反而较阳性对照组有一定的升高。结论: 芦荟轧汁在抗氧化方面存在着双向效应,在一定剂量范围内有着较好的抗氧化作用,可能是芦荟的医疗保健功效的机制之一;但特定的剂量又可激发活性氧的生成。     

用荧光探针JC-1检测氧化应激对精子线粒体膜电位的影响

目的：利用荧光探针JC-1观察氧化应激对精子线粒体膜电位的变化。方法：用FeSO4/H2O2体系诱导精子氧化损伤模型，利用新型荧光探针JC 1标记精子线粒体,在FACS Calibur流式细胞仪上检测JC 1荧光强度的变化。结果：正常精子线粒体维持较高的膜电位,JC 1在线粒体内形成聚合物, 红色荧光占主导地位。FeSO4/H2O2体系导致线粒体膜电位下降, JC 1聚合物分解成单体,红色荧光强度减弱。结论：氧化应激导致精子线粒体膜电位下降; JC 1结合流式细胞仪是一种理想的检测线粒体膜电位的手段。     

细菌脂多糖对小鼠生长发育和骨骼发育的影响

目的:研究细菌脂多糖(LPS)对小鼠宫内胎儿死亡(IUFD)、生长发育迟缓(IUGR)和骨骼发育迟缓的影响。方法:LPS低中高组小鼠于妊娠d15-17分别腹腔注射不同剂量LPS(25μg/kg、50μg/kg、75μg/kg),LPS+2-苯叔丁基硝酮(PBN,活性氧ROS拮抗剂)组在LPS(75μg/kg)处理前30min和后3h经腹腔各给予100mg/kg的PBN,对照组给予等容量生理盐水。孕鼠于妊娠d18处死。另给药1d时取LPS高剂量组LPS+PBN组和对照组于LPS处理后6h处死孕鼠。结果:①小鼠妊娠d15-17给予LPS后,中高剂量组平均每窝死胎数明显高于对照组,活胎体重、身长和尾长下降,并呈明显的剂量-效应关系;LPS高剂量导致IUGR和骨骼发育迟缓;PBN处理明显抑制LPS对胎儿的作用。②LPS使母肝、胎肝和胎盘组织脂质过氧化,GSH含量显著降低。PBN显著抑制LPS的这些作用。结论:母鼠妊娠晚期接触LPS引起IUFD、IUGR和骨骼发育迟缓,ROS至少部分参与了LPS的引起IUFD、IUGR和骨骼发育迟缓。     

ROS指标在保健食品抗氧化功能检测中的应用及灵敏性比较

目的：将ROS指标应用于保健食品抗氧化功能检测中，并进行敏感性比较。方法：SPF级昆明种雄性小鼠，12月龄，按体重随机分为老龄组对照组、大豆异黄酮低、中、高剂量组（分别为0．08g／kgBW、0．17g／kgBW、0．50g／kgBW），每组10只动物。连续灌胃给予受试物42d后，断头处死动物，取肝脏。以胶原酶和胰蛋白酶联合酶解肝组织，制备肝组织单细胞悬液；以流式细胞术测定肝细胞ROS水平；同时制备肝组织匀浆，以分光光度法测定肝细胞MBA含量及SOD、GSH—Px活性。结果：流式仪直方图分析显示，随着受试物给予剂量的增加，各剂量组肝细胞ROS水平均明显降低（P〈0．05）；低、高剂量组肝细胞内MDA含量明显减少（P〈0．05），中、高剂量组GSH—Px活性明显增加（P〈0．05），高剂量组,SOD活性亦明显增加（P〈0．05）；其余剂量组各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：大豆异黄酮通过降低肝细胞自由基水平而起到抗氧化作用，以FCM检测肝细胞ROS水平可更好地对保健食品的抗氧化功能进行筛选与评价。     

氯化钴诱导PC12细胞凋亡的分子机制

目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT对CoCl2诱导PC12细胞DNA片段化的影响;利用RTPCR法检测凋亡相关基因bclxl和bax在PC12细胞调亡过程中的表达及NAC、DTT对基因表达的影响;化学发光法检测NAC、DTT对Caspase3表达的作用。结果在CoCl2诱导PC12细胞凋亡中,ROS生成量明显上升,为正常时的2.92倍;NAC、DTT可提高细胞存活率,由53.1%上升为94.8%和92.3%(P<0.01),并有效抑制ROS的生成,为正常时的24.2%和82.1%(P<0.01);同时抑制DNA片段化的发生。bclxl在细胞凋亡过程中表达明显下降,bax表达无明显变化;NAC和DTT可使bclxl的表达明显上升。Caspase3在细胞凋亡中被激活,NAC、DTT可抑制Caspase3的表达(P<0.01)。结论ROS介导了CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,这一过程与抑制bclxl表达,激活Caspase3有关。