糖皮质激素受体α同型ELISA定量检测方法的建立

目的建立一种灵敏的定量检测人外周血单个核细胞(PBMC)细胞浆和细胞核内糖皮质激素受体α同型(GRα)的生物素-亲和素-酶联免疫吸附试验(ABS-ELISA)方法。方法分别提取人PBMC细胞浆和细胞核总蛋白,用GRα纯品或总蛋白浓度相等的细胞提取液包被酶标板,加入针对GRα的特异性兔抗人多克隆抗体(一抗)和山羊抗兔IgG(二抗),应用生物素-亲和素系统(ABS)进行放大,采用多因素棋盘滴定方法确定最佳实验条件,用GRα纯品建立ELISA标准曲线,定量检测GRα的含量。结果该研究确定应用0.1 mol/L碳酸盐缓冲液(pH 9.6)包被GRα纯品或细胞提取液,一抗浓度500 ng/100μL,二抗浓度400 ng/100μL,使用ABS放大系统,以TMB作为辣根过氧化物酶(HRP)的底物,于450 nm处检测吸光度值。该ABS-ELISA方法灵敏度为1μg/L,工作浓度范围1~100μg/L,批内变异系数(CV)为5.0%~6.9%,批间CV为7.1%~9.6%,不同操作者批内和批间的CV分别为4.7%和6.2%,均在实验允许范围内,可重复性良好。另外,该法无明显交叉反应,有一定特异性。结论该研究建立了一种特异性高、可重复性好、敏感、快速、简便的定量测定PBMC细胞浆和细胞核内GRα的新方法,对进一步探讨自身免疫病的激素疗效与患者GR的关系等方面具重要价值。     

免疫细胞的冷冻保存

冷冻保存免疫细胞在临床和基础研究中具有重要作用，尤其是免疫细胞用于回顾性研究时更为关键。此文介绍一种有效的免疫细胞冷冻保存方法，这种方法对免疫细胞的各项生物学功能均无明显影响，经过程序冷冻方法长期冻存的免疫细胞仍能保留其基本的细胞功能。     

多发性硬化患者外周血单个核细胞转录因子Sp3基因的缺陷表达

目的：研究我国多发性硬化（MS）病人外周血单个核细胞（PBMC）转录因子Sp3基因表达情况及其与临床相关性。方法：采用反转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术，经2对引物扩增，检测了33例MS、30例非免疫 性其他神经系统疾病对照、30例神经系统其他自身免疫性疾病对照和30名健康对照组者PBMC的Sp3基因表达。结果：Sp3基因表达缺如，MS患者组（45％，15／33）明显高于其他3组（依次为16％，5／30，6％，2／30；10％，3／10，P均（＜0．01），可自Sp3表达阴性MS患者的DNA中扩增出相应Sp3片段。Sp3表达阴性MS患者改良的伤残状态量表（EDSS）评分显著高于表达阳性者。脑脊液的IgG24h合成率和血清可溶性白细胞介素－2受全稍高，4例MS患者治疗前病情重和治疗后病情轻时相比，未见其Sp3基因表达有明显变化。结果：汉 MS病人PBMC中有Sp3表达缺陷，Sp3阴性患者残疾程度和免疫功能紊乱程度明显高于阳性者，作 为转录调节因子Sp3的表达缺乏可能与免疫控制的异常启动有关。     

31例老年重症肌无力患者胸腺病变的CT和病理对照研究

目的探讨纵隔CT对老年重症肌无力（MG）患者胸腺异常的诊断价值。方法对31例行胸腺切除治疗的老年MG患者的胸部CT和胸腺病理进行对照研究。结果31例MG患者CT诊断胸腺异常23例（74%）,其中胸腺增生7例（23%）,胸腺瘤16例（51%）,正常胸腺8例（26%）;病理诊断胸腺异常29例（94%）;其中胸腺增生17例（55%）,胸腺瘤12例（39%）,正常胸腺2例（6%）。CT诊断胸腺增生7例,异常率为41%,CT诊断胸腺瘤12例,异常率为100%,CT检查与病理检查结果比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。CT检查对呈斑点状、索条状胸腺增生易出现漏诊。结论老年MG患者94%有胸腺异常,胸腺瘤占39%,但CT检查对鉴别胸腺增生与正常胸腺及胸腺瘤的价值有限。     

老年女性骨质疏松患者全髋置换术后应用唑来膦酸的疗效

目的研究老年女性骨质疏松症合并髋关节病患者行全髋关节置换术后急性期内应用唑来膦酸的疗效及安全性。方法选择2009年1月至2010年1月因髋部骨折或股骨头无菌性坏死住院接受全髋关节(非骨水泥型假体)置换术的老年女性患者,根据骨密度(BMD)检测结果选取骨质疏松症患者148例,随机分为治疗组和对照组,2组患者手术后均接受钙剂和骨化三醇治疗,治疗组于术后1~2周给予唑来膦酸5 mg静脉滴注,以后每年给药1次,连续3年,对照组在治疗组用药同期给予相同体积0.9%氯化钠注射液。每年复查并记录腰椎及健侧髋部骨密度变化,观察术后3年内假体周围骨折及假体无菌性松动的发生情况。结果治疗组连续治疗3年后骨密度较用药前提高,差异有统计学意义(P0.05);对照组用药前后骨密度差异有统计学意义(P0.05);术后3年内治疗组发生假体周围骨折及假体无菌性松动的例数均低于对照组。2组用药后不良反应发生率差异有统计学意义(P0.05)。结论骨质疏松患者行关节置换术后急性期内使用唑来膦酸安全有效,可提高骨密度,且可能减少假体周围骨折和假体松动的发生。     

艾滋病伴发进行性多灶性白质脑病1例报道并文献复习

目的提高临床对艾滋病伴发的进行性多灶性白质脑病(PML)的认识,以提高其临床诊出率。方法分析1例临床诊断为艾滋病所致的PML患者的临床表现、体格检查及影像学资料。结果患者神经系统表现为认知功能减退、失用、失读等高级皮层功能障碍,右侧偏瘫及双侧深感觉减退。脑脊液检查示蛋白升高,余未见明显异常。头部MRI检查示左侧额叶、顶叶、颞叶及右侧颞枕交界处多发T2高信号影,无占位效应,且病灶无强化。结论艾滋病伴发的PML临床表现多种多样,多表现为高级皮层功能减退,对年轻、亚急性起病的患者应警惕此病的可能,以免误诊漏诊。     

全膝关节置换术治疗膝关节色素沉着绒毛结节性滑膜炎的临床效果观察

目的 分析全膝关节置换术、关节镜下滑膜组织切除术对膝关节色素沉着绒毛结节性滑膜炎（PVNS）的临床治疗效果.方法 对2011年3月至2013年3月收治的PVNS行外科治疗患者30例[行关节镜手术者20例（关节镜组）,行全膝关节置换术者10例（全膝关节置换组）]进行回顾性分析,通过分析术前及术后随访结果,比较2组术后关节功能改善情况.结果 关节镜组绒毛型、结节型和混昆合型分别为6、12和2例;全膝关节置换组分别为3、2和5例.关节镜组术后8个月Lysholm评分和关节屈伸活动度均高于术前,差异有统计学意义[分别为（89±11）分比（60±8）分,t=-7.79,P＜0.01;（108±16）.比（72±12）°,t=-3.54,P＜0.01].全膝关节置换组术后的HSS评分和关节屈伸活动度也明显高与术前[分别为（84±11）分比（64±5）分,t=-5.75,P＜0.01;（132±18）°比（69±12）°,t=-3.54,P＜0.01],且全膝关节置换组的关节屈伸活动度术后明显好于关节镜组患者,差异有统计学意义（P＜0.05）.术后8个月关节镜组和全膝关节置换组国际膝关节评分委员会膝关节评估表评分均高于术前[分别为（81 ±11）分比（62±10）,（93±13）分比（58±9）分,均P＜0.01],且全膝关节置换组术后高于关节镜组,差异有统计学意义（P＜0.01）.术后2组患者均未见复发.结论 全膝关节置换术治疗不同程度PVNS的效果好于关节镜下滑膜组织切除术,可有效改善临床症状.     

头颅磁共振及单光子发射断层扫描在老年期痴呆早期诊断中的价值

目的评价头颅磁共振（MRI）及单光子发射断层扫描（SPECT）对阿尔茨海默病（AD）及血管性痴呆（VD）早期诊断的应用价值,探讨局部脑萎缩程度及局部脑缺血程度与老年期痴呆严重程度的相关性。方法对36例AD患者、32例VD患者及年龄、性别相匹配的30名非痴呆老年人(NC)进行MRI脑局部萎缩定量检测,并同时应用SPECT对脑局部血流灌注情况进行半定量分析。结果头颅MRI显示,AD组较VD组及NC组海马萎缩程度明显,AD患者左侧海马高度为(9.27±3.43)mm,VD组为(11.62±5.72)mm,NC组为(12.13±2.97)mm（均为P＜0.01）。SPECT显示,AD组及VD组均有认知相关部位的血流灌注减低,AD患者左侧颞叶每像素计数与小脑每像素平均计数的比值(RAR)值为0.60±0.07,VD组为0.67±0.11,NC组为0.89±0.09,AD与VD组局部脑缺血情况明显较NC组严重（均为P＜0.01）。早期轻度AD患者简易智能状态量表（MMSE)评分22～26分,MRI左侧海马高度为(12.05±2.14)mm,与NC组差异无显著性(P＞0.05）,而SPECT显示有明显脑局部缺血,左侧海马的RAR值为0.61±0.07,低于NC组(P＜0.01）。MRI测量的脑局部萎缩程度（左侧海马高度）及SPECT检测的脑局部缺血程度（左侧颞叶）均与痴呆的严重程度（MMSE评分)呈正相关（r=0.96及0.98,均为P＜0.01）。结论MRI对AD有辅助诊断作用。对轻度的AD患者,MRI不如SPECT敏感。局部脑萎缩、局部脑缺血程度与痴呆的严重程度及病程相关。AD患者SPECT上均有缺血改变,提示AD的发生可能与局部脑血流灌注减低相关。     

外科基地住院医师规范化培训中存在的问题与思考

住院医师培训是指住院医师在上级医师的指导下进行临床实践,通过规范的要求和严格的考核,从而学习到在某一认可的医学专科中合格医生所需的知识、技能和态度[1]。它是培养临床医学人才、提高医院综合诊疗水平的平台。住院医师规范化培训制度在国外已有百余年的发展史,一些国家的培训制度已科学化、规范化和法制化[2]。2013年在上海召开的建立国家住院医师规范化培训制度工作会议,明确要求2015年全国各省全面启动住院医师规范化培训工作,到2020年,基本建立住院医师规范化培训制度,所有新进医疗岗位的本科及以上学历临床医师全部接受住院医师规范化培训。