微柱凝胶技术在输血相关试验中的评价及应用研究

目的 探讨微柱凝胶技术在血型鉴定、交叉配血、抗体效价测定等相关输血试验中的应用,并对其进行方法学评价.方法 对微柱凝胶技术测定的55例Rh D阴性患者中的15例抗-Rh D呈阳性血样及21例正、反定型不符血样、29例交叉配血不合血样综合分析,并与试管抗人球蛋白结果对比.同时,对微柱凝胶技术检测的853例O型孕妇IgG型抗-A或抗-B效价结果进行分析.结果 抗-Rh D的检出率显示,微柱凝胶技术为27.27%(15/55),试管法为21.82%(12/55),效价在1:4以上阳性标本的检出两种方法一致.21例正、反定型不符的标本中,抗原或抗体减弱的11例用微柱凝胶技术检测,显示出反应的不一致性;而用试管法则呈现弱阳性反应.交叉配血中,微柱凝胶技术检出的29例阳性用试管法证实,2例为假阳性.O型孕妇血型效价测定以1:128为界,配偶为A型时,检出率为33.18%(144/434);配偶为B型时,检出率为33.17%(139/419),两者无显著差异.结论 微柱凝胶技术有操作简便、快速、结果客观的优点,但应重视其假阳性和假阴性.出现异常结果时,应将传统的试管法结合显微镜镜检.     

微柱凝胶技术在输血相关试验中的评价及应用研究

目的探讨微柱凝胶技术在血型鉴定、交叉配血、抗体效价测定等相关输血试验中的应用,并对其进行方法学评价。方法对微柱凝胶技术测定的55例RhD阴性患者中的15例抗-RhD呈阳性血样及21例正、反定型不符血样、29例交叉配血不合血样综合分析,并与试管抗人球蛋白结果对比。同时,对微柱凝胶技术检测的853例0型孕妇IgG型抗-A或抗-B效价结果进行分析。结果抗-RhD的检出率显示,微柱凝胶技术为27．27％（15／55）,试管法为21．82％（12／55）,效价在1：4以上阳性标本的检出两种方法一致。21例正、反定型不符的标本中,抗原或抗体减弱的11例用微柱凝胶技术检测,显示出反应的不一致性;而用试管法则呈现弱阳性反应。交叉配血中,微柱凝胶技术检出的29例阳性用试管法证实,2例为假阳性。O型孕妇血型效价测定以1：128为界,配偶为A型时,检出率为33．18％（144／434）;配偶为B型时,检出率为33．17％（139／419）,两者无显著差异。结论微柱凝胶技术有操作简便、快速、结果客观的优点,但应重视其假阳性和假阴性。出现异常结果时,应将传统的试管法结合显微镜镜检。     

人RHD基因外显子多态性研究

目的 研究人RHD基因外显子多态性,探讨中国人RhD阴性个体遗传学机制。方法 用PCR-SSP法检测40例RhD(+)、120例RhD(-) 和2例弱D型样本的10个外显子。结果 40例RhD阳性和2例弱D型样本均检出RHD 基因的10个外显子,120例RhD阴性样本中28例样本的10个外显子全存在(占23.33%),19例样本10个外显子部分存在(占15.83%),大部分为中间缺失型,73例样本10个外显子全缺失(占60.83/%)。从120例RhD阴性样本中检出的19例Del型样本均能检出RHD 基因的10个外显子。结论 RhD表型阴性个体的RHD基因外显子结构具有多态性,主要表现为RHD基因全缺失、RHD基因部分缺失、RHD基因不缺失3种。     

微柱凝胶技术在RhD抗体测定中的应用

目的:探讨RhD抗体检测的意义及微柱凝胶检测技术的优越性.方法:用微柱凝胶抗人球法和试管抗人球法对47例RhD阴性围产期孕、产妇平行检测,观察检出率,并比较2种方法的灵敏度.结果:对选定的阳性对照物检测,试管法抗人球的检出1+的释稀度为1∶16,而微柱凝胶法为1∶64.47例RhD阴性围产期孕、产妇静脉血,传统的试管法检出RhD抗体阳性10例(21.28%),微柱凝胶法检出阳性12例(25.53%).结论:微柱凝胶法操作简单,灵敏度高,在Rh-D抗体检测中优于传统的试管法抗人球技术.     

儿童患者配血不合原因分析及对策

目的儿童配血中出现配血不合的几率较高,对儿童输血前微柱凝胶配血技术出现不合的病例进行分析,探讨配血不合及假凝集的原因,并根据不同情况,制定个性化输血方案。方法采用微柱凝胶技术对3 923名次患儿进行交叉配血、对阳性标本进行抗体筛查,阳性时作进一步调查。结果配血不合率5.94%(234/3 923),其中假阳性率0.71%(28/3 923),真阳性率5.25%(206/3 923)。206例真阳性中,主侧不合率5.83%(12/206),次侧不合率90.78%(187/206),主侧和次侧均不合率3.40%(7/206)。结论采用微柱凝胶技术对儿童配血,配血不合的发生率较高,这与儿童同种免疫性溶血、自身免疫性溶血等疾病发生率较高有关。鉴别假凝集、制定相应的儿童个性化输血方案显得非常重要。     

Rh血型系统分型与相容性输血研究

目的 对来自多地区(南宁、广州及深圳)的4 704名住院患者进行Rh分型,了解C、c、E、e抗原及表型的分布规律,为制订Rh血型相容性输血方案提供依据.方法 采用3家不同公司生产的微柱凝胶卡检测住院患者Rh血型抗原.如果试验试剂与对照试剂结果不一致,则用第三方试剂确认,必要时用传统的试管法确认.采用卡方检验与Fishe...     

产气芽孢杆菌α-N-乙酰氨基半乳糖苷酶对A型表位的活性

背景 α-N-乙酰氨基半乳糖苷酶是一类外切性糖苷酶,     

非裔个体Rh基因定型:假阴性和假阳性结果的预防

背景 RhD和RhCcEe座位的分辨、基因变异和沉默基因的存在致使完全可靠的基于PCR的RhD和RhC等位基因定型技术的发展较为困难。RhD假基因(RhDψ),可在第4外显子插入1个37bp的片段致使用已经报道的RhD基因定型技术对非洲血统RhD阴性个体进行定型时,普遍存在假阳性结果。由于RhD和RhC第2外显子的同源性,RhC基因定型也存在问题,     

广州地区Kidd血型系统基因频率调查

1951年Allen在1例新生儿溶血病中发现抗-Jka,1953年发现其对偶抗体抗-Jkb,随后发现这是一个独立的血型系统,命名为Kidd系统.我国已有Kidd系统血清学分型的研究文献,至今尚未见采用PCR-DNA技术分型的报告.笔者从基因水平分析广州地区中国汉族Kidd血型的多态性及特殊性.     

两种RhD抗体Th-14和Th-22识别ep15的结合特性和分子特性

对两个产生抗-RhD人单克隆抗体Th14和Th22的人-鼠异源杂交细胞系进行克隆和测序分析以认识其表位的特异性和与抗原的结合力。两种抗体均能识别RhD的表位15(ep15)。Th14是IgG1/λ型,Th22是IgG3/λ型。流式细胞仪技术(FCM)分析表明,Th22的抗原结合特性强于Th14。由细胞系和合成的第一链cDNA分离出全部RNA。重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因用PCR扩增并克隆于载体pCR2.1序列中。用Fab表达载体pComb3H得到两种抗体的重组翻译本。用木瓜酶(p-T14和p-Th22 Fab)消化抗体分子得到酶切产物Fabs。用FCM测定Fab抗体对RhD阳性红细胞的结合能力。测序分析