中药对衰老相关性疾病DNA甲基化的作用

DNA甲基化是表观遗传修饰的一种重要形式,在细胞分化、胚胎发育和环境适应上发挥重要作用,并且与许多疾病的发生密切相关。近30年来,关于DNA甲基化与衰老相关性疾病关系的大量研究揭示了基因组整体甲基化水平及特定基因甲基化异常是衰老相关性疾病发生发展的一个重要因素。中药在治疗衰老相关性疾病上有着较为丰富的理论和经验。与化学药物相比,中药具有多途径、多方式、多靶点的作用优势。随着中医药现代研究的不断深入,关于中药对表观遗传修饰,特别是对DNA甲基化的作用正日益受到重视,研究表明某些中药复方及单体对衰老相关疾病的异常甲基化具有一定调整作用。本文综述了中药对衰老相关性疾病(肿瘤、糖尿病、动脉粥样硬化和神经退行性疾病)DNA甲基化作用的研究进展。DNA甲基化的研究有助于衰老相关疾病发病机制、疾病风险评估及发现早期诊断的新的分子标志物,同时还能为疾病治疗提供新的治疗途径。中药资源丰富,是研究开发DNA甲基化调节药物的重要资源库。     

滚针结合左旋维C对小鼠老化皮肤超微结构的影响

目的:观察分析滚针疗法结合左旋维生素C对于小鼠老化皮肤超微结构影响,探讨滚针疗法结合外用药治疗皮肤老化的可能作用机制。方法:3月龄昆明种雌性小鼠50只,采用随机数字法将小鼠分为正常对照组、模型组、滚针治疗组、滚针加维C治疗组、维C治疗组,各10只。除正常对照组外,其余各组颈背部连续皮下注射D-半乳糖,短波紫外线灯、金属钨灯照射背部皮肤,建立亚急性皮肤老化模型。观察分析老化皮肤超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)以及皮肤总羟脯氨酸含量等与衰老相关的生化指标及组织病理学变化。结果:治疗前,与正常对照组比较,其他各组的SOD含量和总羟脯氨酸水平显著降低,MDA显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与同组治疗前比较,滚针治疗组、维C治疗组、滚针加维C组的SOD和总羟脯氨酸水平显著升高,MDA显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。治疗后,滚针治疗组、维C治疗组、滚针加维C组的SOD含量和总羟脯氨酸水平显著高于模型组,MDA含量显著低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05);滚针加维C组的SOD含量和总羟脯氨酸水平显著高于滚针治疗组和维C治疗组,MDA含量显著低于滚针治疗组和维C治疗组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:滚针疗法结合外用抗氧化药物能够改善小鼠老化皮肤超微结构,升高SOD和总羟脯氨酸水平,降低MDA水平,为滚针疗法联合外用药物防治皮肤老化提供了理论基础。     

补肾方对自然衰老大鼠血清皮质酮含量及海马齿状回超微结构的影响

目的:观察自然衰老大鼠血清皮质酮(CORT)含量和海马组织超微结构的变化及补肾方左归丸和右归丸的作用,探索补肾方延缓衰老的作用机制。方法:SPF级雄性自然衰老SD大鼠45只,随机分为老年组、左归丸组和右归丸组,每组15只;另设青年组15只,共4组。青年组大鼠常规喂养至5月龄,老年组大鼠常规喂养至24月龄,普通饮食、饮水;从20月龄开始,左归丸组和右归丸组大鼠均按6.75 g/(kg·d)生药量食用饲料,连续给药4个月,每周停药2天。采用ELISA法检测各组大鼠血清CORT含量;透射电镜观察海马齿状回神经细胞超微结构。结果:与青年组比较,老年组大鼠血清CORT的含量显著升高,大鼠海马齿状回神经细胞线粒体参数体密度(Vv)、比表面(δ)、比膜面(δm)和神经细胞突触小泡Vv及突触内线粒体Vv显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与老年组比较,左归丸组大鼠血清CORT含量显著降低,左归丸组和右归丸组大鼠海马齿状回神经细胞线粒体Vv、δ、δm和海马神经细胞突触小泡Vv及突触内线粒体Vv显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:自然衰老大鼠血清CORT含量增高,海马神经细胞出现能量代谢的结构改变,补肾方左归丸和右归丸均可通过降低自然衰老大鼠血清CORT含量、改善其海马神经细胞能量代谢的结构变化而延缓衰老。     

小鼠孕晚期暴露脂多糖对老年期海马GSNOR含量及与认知功能损害相关性研究

目的 探讨海马S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)水平与孕晚期炎症暴露引起的老年母鼠空间学习记忆能力改变的相关性.方法 怀孕15 d的CD-1母鼠随机分为细菌脂多糖暴露组(LPS)和对照组(CON),连续4d经腹腔注射细菌脂多糖(LPS,50 μg/kg;LPS组)或等容积生理盐水(CON组).饲养母鼠至6月龄和18月龄时,Morris水迷宫(MWM)检测空间学习记忆能力、Western blot检测海马GSNOR水平.结果 18-CON组比6-CON组,在水迷宫中平均游泳路程延长(P＜0.01),靶象限游泳路程百分比和海马GSNOR水平均下降(P＜0.01),18-LPS组与18-CON组比较也具有相同结果.Pearson相关分析显示,GSNOR水平与平均游泳路程呈负相关,与靶象限游泳路程百分比呈正相关.结论 孕晚期炎症暴露加重小鼠海马GSNOR水平的年龄相关性改变,这可能与老年期空间学习记忆损害有关.     

人转化生长因子β3的构建

目的:获取人转化生长因子β₃的编码基因,开发抗衰老的皮肤药物。 方法：采用重叠PCR的方法,设计4对引物,进行4次PCR合成人转化生长因子β₃的编码基 因。 结果：4次PCR后,经2％的琼脂糖凝胶电泳可见一357 bp的条带,将电泳产物回收,连接入pMD-18T载体,经测序分析证实,所获得DNA片段为人转化生长因子β₃的编码基因。 结论：利用重叠PCR方法能够成功构建人转化生长因子β₃的编码基因。     

近5年针灸延缓衰老的机制研究述评

随着现代经济的发展以及生活水平的提高,延缓衰老、延长寿命逐渐成为人们关注的焦点。针灸疗法以其特有的优势被广泛运用到衰老相关疾病的预防和治疗中,其机制探索也得到进一步深入。本文从针灸参与清除自由基损伤,延缓脑老化、免疫老化以及调控衰老相关基因、蛋白入手,对近5年针灸延缓衰老的机制研究作一述评,以促进针灸临床的发展以及新科研思路的开拓。     

欢乐宁方对围绝经期大鼠下丘脑KNDy的影响

目的观察欢乐宁方对围绝经期大鼠下丘脑(Kiss-1、NKB及DYN,KNDy)编码基因及其相关受体的影响。方法取60只13月龄雌性SD大鼠,随机分为模型组、欢乐宁方低、中、高剂量组(低、中、高剂量组)、补佳乐组、六味地黄丸组(地黄丸组),每组各10只,另取10只3月龄雌性SD大鼠作为正常组,观察各组大鼠水迷宫活动、皮肤含水量、血清E2、FSH水平和下丘脑组织Kiss-1及其相关受体GPR54、NKB、DYN mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组逃避潜伏期、FSH及Kiss-1、GPR54、NKB、DYN mRNA升高,皮肤含水量、E2降低(P0.01,P0.05)。与模型组比较,各给药组逃避潜伏期、FSH及Kiss-1、GPR54、NKB、DYN mRNA降低(P0.01,P0.05),皮肤含水量、E2升高(P0.01,P0.05)。与补佳乐组比较,低、中剂量组及地黄丸组皮肤含水量降低(P0.01,P0.05)。结论欢乐宁方可抑制KNDy神经元表达,上调E2水平,下调FSH水平。     

自然衰老大鼠血管老化中细胞骨架的改变及人参三七川芎提取物的干预作用

目的观察人参三七川芎提取物对自然衰老大鼠胸主动脉及骨架蛋白的影响。方法 50只SD雄性大鼠(8~9月龄)按体重随机分为模型组、中药低、中、高剂量组及白藜芦醇组,每组各10只,模型组大鼠正常饲养至21月龄;各给药组大鼠分别从18月龄开始药物干预,中药低、中、高剂量组给药剂量分别为576、1 152、2 305 mg/kg,白藜芦醇组给药剂量为50 mg/kg,模型组按体重给予等体积的纯净水,每日1次,连续灌胃3个月;同时以10只SD雄性大鼠(3月龄)作为青年对照组(青年组)。应用HE染色观察胸主动脉血管形态的改变,β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)特异染色法计算蓝染组织比率,免疫荧光染色观察骨架蛋白F-actin形态的改变,Western blot法检测骨架蛋白F-actin和SM22α表达情况。结果与青年组比较,模型组血管内膜损伤且不光滑,中膜明显增生且排列紊乱,弹力板扭曲、断裂、结构不完整,外膜增生明显,SA-β-gal染色组织蓝染比率明显增加(P0.01),F-actin荧光强度及蛋白表达明显增多(P0.01),而SM22α蛋白表达明显减少(P0.01)。药物干预后,各给药组血管壁内皮轻度受损,弹力膜结构较完整,中膜及外膜厚度明显降低(P0.01);SA-β-gal染色中药中剂量及白藜芦醇组蓝染比率减少(P0.05),而中药低、高剂量蓝染比率改变无统计学意义(P0.05);各给药组F-actin荧光强度明显降低(P0.01);蛋白表达方面,中药中、高剂量组及白藜芦醇组F-actin蛋白表达减少(P0.01),而中药低剂量组改变则无统计学意义(P0.05),各给药组SM22α蛋白表达增加(P0.01)。结论细胞骨架微丝蛋白F-actin形态及蛋白表达在衰老过程中改变明显,其相关蛋白SM22α蛋白表达亦改变明显,可能共同参与了血管老化的进程;人参三七川芎提取物可以一定程度上延缓血管老化,且对于血管F-actin和SM22α蛋白有明显干预作用,可能间接通过此作用延缓了血管老化的进程。