长非编码RNA的功能研究

长非编码RNA(long noncoding RNAs,lncRNAs)是指长度大于200个核苷酸的RNA分子。近年来的研究表明,lncRNAs具有多种重要的生物学功能。随着现代生物技术的发展,lncRNAs转录本的预测及发现已经比较容易,然而不同于蛋白质编码基因序列所具有的指示功能,lncRNAs序列信息目前不提供功能信息的预测。因此,如何解码lncRNAs的功能已逐渐成为基因组研究中的热点问题。我们将对探测lncRNAs功能的研究方法进行综述。     

miR-9和miR-9*在SAMP8小鼠衰老中的功能及机制

目的 探讨miR-9和miR-9*在SAMP8小鼠衰老中的功能及机制。方法 选取4-、8-、12-月龄快速老化倾向小鼠(SAMP8)作为研究对象,并以同月龄快速老化抵制小鼠(SAMR1)为对照,每组3只,取脑,切片进行原位杂交检测miR-9和miR-9*的表达;分别以miR-9和miR-9*的模拟物和抑制物转染N2a细胞,采用流式细胞术检测过表达和敲低miRNA对细胞周期的影响;生物信息学预测miR-9和miR-9*靶基因并进行双荧光素酶报告基因实验验证。结果 miR-9和miR-9*在SAMP8小鼠海马区的表达低于SAMR1小鼠。敲低miR-9和miR-9*都可以增加N2a细胞G1期细胞在群体中的比例,减少S期细胞在群体中的比例,过表达则相反。生物信息学预测并通过文献筛选miR-9的靶基因有PSEN1、SCN2B、MAP3K3和BACE1,miR-9*的靶基因有CDKn1c。荧光素酶报告基因实验证实miR-9的靶基因是MAP3K3,miR-9*的靶基因是CDKn1c。结论 miR-9和miR-9*可能是分别通过其靶基因MAP3K3和CDKn1c在SAMP8小鼠衰老进程中发挥重要作用。     

香烟提取物通过减少HDAC2表达诱导小鼠C2C12成肌细胞衰老

目的:探讨香烟提取物(CSE)能否引起小鼠C2C12成肌细胞衰老,并研究成肌细胞衰老与组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的关系。方法:培养C2C12细胞株,分化为成熟成肌细胞,观察CSE干预对成肌细胞衰老和HDAC2表达的影响,采用real-time PCR和Western blot方法分别检测HDAC2 mRNA和蛋白的表达;β-半乳糖苷酶染色检测衰老细胞的百分率。结果:MTT法测定最佳CSE浓度与干预时间分别为60 m L/L和24 h。CSE干预后β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,同时伴有HDAC2 mRNA和蛋白表达的减少。四溴苯三唑(TBB)在促进HDAC2 mRNA和蛋白表达的同时,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少;用HDAC2的特异性阻滞剂丙戊酸抑制HDAC2 mRNA和蛋白的表达时,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加。结论:香烟提取物可通过减少小鼠C2C12成肌细胞HDAC2的表达促进细胞老化。     

miR-486-5p通过抑制端粒酶活性促进人骨髓间充质干细胞衰老

目的:研究年龄相关microRNA-486-5p(miR-486-5p)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)衰老的调控作用。方法:通过microRNA芯片和real-time PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-486-5p表达的影响;通过转染miR-486-5p模拟物或抑制物,过表达miR-486-5p或抑制其表达;用β-半乳糖苷酶染色检测miR-486-5p对h MSCs衰老的影响;通过siRNA研究沉默信息调节因子1(SIRT1)对h MSCs端粒酶逆转录酶(TERT)、端粒酶活性及衰老的影响。结果:随供体年龄增加,h MSCs中miR-486-5p的表达增加。过表达miR-486-5p可促进h MSCs衰老。相反,抑制miR-486-5p的表达可减少h MSCs的衰老。SIRT1及TERT随供体年龄增加而表达下降,直接抑制SIRT1的表达可减少TERT表达,抑制端粒酶活性,促进细胞衰老。同时抑制miR-486-5p和SIRT1的表达,使miR-486-5p失去对h MSCs端粒酶活性及衰老的调控作用。结论:miR-486-5p通过抑制SIRT1,减少h MSCs端粒酶活性,促进h MSCs衰老。     

血管衰老在阿尔茨海默病中的作用

衰老(Aging)是伴随增龄而缓慢出现、以生物个体生理功能的衰退为特征的生物学过程[1]。血管作为多种器官组成的重要成分,血管衰老(Vascular Aging)联系着人体各器官系统的衰老与疾病,是老年人多种慢病的主要发病机制之一;同时,老年人慢病又加速了血管衰老的进程[2]。     

银杏酮酯对自然衰老大鼠学习记忆及海马、前额叶皮层c-fos、Caspase-3和Caspase-8表达的影响

目的:探讨银杏酮酯(Ginkgo biloba extract,GBE50)对自然衰老大鼠学习记忆及海马、前额叶皮层c-fos、Caspase-3和Caspase-8表达的影响。方法:21月龄大鼠随机分为模型组、银杏酮酯组和阳性药银杏叶提取物组,1月龄大鼠作为正常组。其中正常组和模型组用1%羧甲基纤维素钠灌胃,银杏酮酯组和银杏叶提取物组分别予100 mg/kg的药物灌胃60天。新物体识别实验检测学习记忆,免疫组织化学方法检测海马CA1区和前额叶皮层c-fos和Caspase-8的蛋白水平,免疫印迹方法检测海马和前额叶皮层Caspase-3蛋白表达。结果:新物体识别实验结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物可使大鼠的分辨指数和优先指数明显升高。免疫组织化学结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物可使海马CA1区和前额叶皮层cfos表达增加,Caspase-8表达降低。免疫印迹结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物组可使海马和前额叶皮层Caspase-3蛋白表达下降。结论:100mg/kg的银杏酮酯可以改善自然衰老大鼠学习记忆缺陷,这种改善可能与上调自然衰老大鼠海马和前额叶皮层c-fos表达,降低Caspase-3和Caspase-8蛋白水平有关。     

补肾益气方药对衰老大鼠骨骼肌能量代谢的影响

目的观察补肾益气方药对衰老大鼠骨骼肌腺苷酸含量及ATP合酶β蛋白表达的影响。方法将32只雄性SD大鼠随机分为4组:正常组,模型组,中药组,美雄酮组。除正常组外,其余各组每天颈背部皮下注射10%的D-半乳糖(100 mg·kg-1)溶液,制作"拟衰老"大鼠模型。模型大鼠经补肾益气方药或美雄酮干预10周后,采用高效液相色谱(HPLC)-紫外法检测各组大鼠腓肠肌组织ATP、ADP及AMP含量,并计算能荷(EC)值;采用Western blotting方法检测骨骼肌ATP合酶β蛋白表达变化。结果与正常组比较,模型组的骨骼肌ATP含量及EC值均显著下降,AMP含量显著升高,ATP合酶β蛋白表达显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,中药组ADP含量显著下降,EC值显著升高,美雄酮组较模型组ATP含量及EC值显著增高,中药组及美雄酮组的ATP合酶β蛋白表达量显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与美雄酮组比较,中药组ADP含量下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论补肾益气方药可通过提高大鼠骨骼肌ATP含量及EC值,提高骨骼肌ATP合酶β蛋白的表达量,改善骨骼肌能量代谢,延缓机体及骨骼肌衰老进程。     

皮肤衰老机制及抗衰老研究进展

皮肤是衰老过程中最易显露的器官，皮肤衰老主要表现为自然衰老和光老化两种形式。近来随着各种边缘学科的飞速发展，人类对于衰老的认识已从整体水平推进到细胞分子水平，关于衰老机制的研究已取得了很大进展，但是针对皮肤衰老机制的报道却很少。因此，本文从内源性生理衰老和外源性环境衰老两个角度出发，就当前有关皮肤衰老的主要机制和相应对策进行阐述，希望为抗衰老化妆品的开发提供参考。     

自然衰老过程中小鼠学习记忆行为变化的动态观察

本实验比较了自然衰老过程中小鼠学习记忆行为的变化。选用１、３、６、１２和１８月龄小鼠，用开场行为检测小鼠的探究反应和自发活动，用Ｙ－迷宫检测分辨分辨学习记忆能力，用一次性被动回避反应观测记忆保持能力。