用视觉音符激活智慧的乐章--视觉治疗的临床应用研究

引言冰是沉睡的水,只有通过能量才能使之融化并变成动态的智慧之水。在视觉科学领域,缺损的视觉就是那块冰,而"视觉治疗"就是融化冰的巨大能量,只有使用"视觉治疗"才能使冰封的大脑变成灵动的智慧--改善视觉缺损,提出视觉功能。过去十年内视觉缺损被认为是不可逆的,因为成熟期的发育窗口已经关闭。但是,国外视觉科学家最近提出了关于视觉神经科学的新概念,即"视觉治疗",它能够逆转弱视,并提升成人单侧弱视视力。目前国内学界却对"视觉治疗"知之甚少,依然固守着传统的治疗方法。希望通过本文能够将最新的科学理念传播开来,给中国眼科学注入新…     

鼠受精素β亚单位胞外区的真核表达质粒pSG.SS.YL-Fβ.ECD的构建与表达

目的构建表达鼠受精素β（Fβ）胞外区的真核表达重组质粒pSG.SS.YL-Fβ.ECD并对其表达进行检测。方法应用PCR方法获得鼠Fβ的cDNA片断,将其插入pSG.SS.YL中,经酶切鉴定正确后转染HEK293细胞,并利用间接免疫荧光结合激光共聚焦技术对Fβ的表达进行检测。结果构建成功后的pSG.SS.YL-Fβ.ECD在HEK293细胞中能够表达Fβ。结论Fβ在真核细胞中的成功表达为后续研究Fβ的高表达对受精过程的影响奠定了基础。     

过表达Bcl-2肾小管上皮细胞株的建立及Bcl-2逆转录病毒对抗肾小管上皮细胞凋亡的研究

目的 建立稳定过表达Bcl-2蛋白的肾小管上皮细胞,探讨Bcl-2过表达对抗大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用.方法 Bcl-2逆转录病毒感染培养肾小管上皮细胞株HK-2,经G418抗性筛选,PCR鉴定并命名为HK-2Bcl-2;原位杂交检测细胞Bcl-2 mRNA表达水平;甘油诱导大鼠急性肾功能衰竭模型,采用含重组Bcl-2浓缩逆转录病毒液,感染大鼠肾小管上皮细胞,采用免疫组织化学法检测Bcl-2蛋白表达,原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡变化.结果 PCR和原位杂交显示G418抗性细胞克隆过表达Bcl-2;甘油注射后大鼠出现急性肾功能衰竭,Bcl-2逆转录病毒感染肾小管上皮细胞后,Bcl-2蛋白表达上调,并能显著对抗肾小管上皮细胞凋亡.结论 成功建立过表达Bcl-2蛋白的肾小管上皮细胞株HK-2Bcl-2;Bcl-2逆转录病毒显著抑制大鼠肾小管上皮细胞凋亡.     

精子膜蛋白Cyritestin单抗对鼠精卵结合和融合的抑制作用及其意义

目的 通过观察精子膜蛋白Cyritestin单抗对体外鼠精－鼠结合和融合作用的影响,探讨该蛋白在受精过程中的作用。方法 应用鼠Cyritestin单抗,通过体外受精试验观察该单抗预孵育不同浓度精子后,对精－卵结合和融合功能的影响;应用免疫细胞化学方法确定Cyritestin在精子表面的特异性定位。结果 不同精子浓度下,Cyritestin单抗均可显著降低体外精－卵的结合和融合能力;可使精－卵结合指数降低37.18%－79.00%,平均60.33%;使精－卵融合的受精指数降低51.66%－77.01%,平均66.90%;受精率下降32.28%－76.15%,平均57.41%。在精子项体反应前后,Cytitestin在精子表面均特异性定位于精子头部赤道区域和项体内膜区域。结论 Cyritestin在精－卵的结合和融合中均发挥重要生理作用。该蛋白作为精子靶抗原开发避孕疫苗的可能性值得深入研究。     

避孕疫苗研究现状

人口过剩是严重的全球性问题 ,实行计划生育开发有效的避孕疫苗将成为控制人口增长的理想措施。目前已采用多种方法以确定能够用于发展避孕疫苗的特异性抗原 ,如 :精子抗原、ZP抗原、性激素抗原等 ,并已证实这些抗原在哺乳动物包括人类中可产生生殖抑制和免疫性避孕效应 ,目前正在积极支持进一步研究和开发这种有效的免疫性避孕疫苗。本文对免疫性避孕疫苗的开发及相关分子生物学技术的现状做一综述     

FscB蛋白在鼠精子发生过程中的动态表达和迁移研究

目的:探讨一种新的睾丸特异性蛋白FSCB(Fibrous sheath CABYR binding protein)在精子内的精细动态表达和迁移过程,并研究该蛋白在正常和畸形精子中的形态定位特征.方法:应用过碘酸-希夫氏染色获得鼠睾丸曲精小管上皮中精子发生的时相性背景特征,然后应用间接免疫荧光方法对FSCB蛋白在睾丸和精子内的动态表达和迁移过程进行观察.结果:FSCB最初表达于长精细胞的第11步(时相Ⅺ),呈胞浆内弥漫性染色;随之从第11步(时相Ⅺ)至第15步(时相Ⅵ)表达逐渐加强;在精子形成的第15步(时相Ⅳ至时相Ⅵ)FscB开始向精子鞭毛迁移,最终于第16步(时相Ⅷ)FSCB蛋白整体局限定位于睾丸精子鞭毛上,胞浆内荧光染色消失.进一步研究显示该蛋自在正常精子中定位于鞭毛主段、精子头部、鞭毛颈段、中段和末段均无表达.在畸形精子中,该蛋白表达存在3种异常改变:①鞭毛内无阳性表达;②表达节段前移并缩短,提示这类精子缺乏中段;③呈现间断分布的串珠状改变.结论:FSCB是纤维鞘的重要组成蛋白,在精子纤维鞘形成的后期装配于其表面,可能是纤维鞘生物合成的最后装配步骤.该蛋白在畸形精子中存在明显表达异常,其表达异常与精子运动功能之间的关系有待深入研究.     

肾上腺囊肿的误诊分析

目的提高对肾上腺囊肿的诊断水平。方法回顾性分析9例经手术和病理证实被误诊的肾上腺囊肿的临床资料,复习文献并讨论肾上腺囊肿的误诊原因。结果误诊原因主要有四点：①对肾上腺囊肿的认识和重视程度不足;②B超作为初步诊断对术前诊断的影响较大;③B超和CT本身的局限性,对病灶来源判断不清;④部分肾上腺囊肿CT值较高,使得对病灶性质造成误判。结论提高对肾上腺囊肿的认识和重视程度对减少误诊率非常重要,合理地联合应用B超、CT、MRI能显著提高肾上腺囊肿的诊断正确率。     

塞来昔布通过调节PI3K/Akt通路活化影响人膀胱肿瘤细胞株T24的增殖和凋亡

探讨PI3K/Akt通路在选择性环氧化酶2(Cox-2)抑制剂塞来昔布抗膀胱肿瘤机制中的可能作用。方法常规培养的贴壁生长的T24细胞,加入不同浓度PI3K抑制剂LY294002共培养,MTT法测定其对T24细胞增殖活性的影响;贴壁生长及悬浮培养的T24细胞,分别加入塞来昔布、PGE2、LY294002等共培养,流式细胞仪测定T24细胞凋亡率。Western blot检测塞来昔布及PGE2作用后悬浮生长的T24细胞Akt活化情况。结果塞来昔布对贴壁及悬浮培养的T24细胞均可诱导其凋亡;PGE2及LY294002均对贴壁的T24细胞增殖和凋亡无明显影响,但PGE2对悬浮生长的T24细胞可减少其凋亡,而LY294002可显著增加T24细胞的失巢凋亡率。Western blot结果提示塞来昔布显著降低而PGE2增加Akt的活化。结论塞来昔布对PI3K/Akt信号通路的主要作用是阻遏Akt的磷酸化,通过阻止Akt活化抑制T24细胞增殖并诱导其产生凋亡。更多还原     

肾脏穿刺伤救治体会

目的探索肾脏穿刺伤的救治方法及疗效。方法回顾我院2001年3月-2008年5月收治肾脏穿刺伤患者13例,就其损伤原因、损伤程度（根据美国创伤外科协会分级标准）、处理方法及结果进行分析。结果本组13例肾损伤均为利器穿刺伤,其中Ⅰ-Ⅱ级损伤2例均行保守治疗成功;Ⅲ级损伤4例,其中1例保守治疗成功,3例接受肾血管造影并行超选择性动脉栓塞（TAE）止血成功;Ⅳ级损伤6例,其中1例伴血流动力学稳定患者行TAE成功,3例接受肾脏探查修补术,2例行肾切除术;Ⅴ级损伤1例,探查发现伴脾脏损伤,行左肾切除＋脾切除术。13例获随访,平均31.5个月,保守治疗及保存肾脏患者肾功能良好,无并发症发生。结论低中级别（Ⅰ-Ⅱ）肾脏穿刺伤保守治疗成功可能性大,部分高级别（Ⅲ-Ⅳ级）肾穿刺伤患者选择保守或肾功脉栓塞等微创治疗,创伤小,且避免手术探查导致的高伤肾切除率。     

表达小鼠精子受精素β胞外区减毒沙门菌疫苗株的构建

目的 :构建表达鼠精子抗原受精素 β亚单位 (Fβ)胞外区的可口服减毒沙门菌活疫苗株。　方法 :设计一对引物 ,应用PCR方法获得Fβ 胞外区cDNA片断 ,将其插入表达载体pYA3 14 9中 ,构建重组质粒pFEC ,将该重组质粒转入鼠沙门菌疫苗株X4 63 2 ,获得杂合菌株X4 63 2 (pFEC)。该重组菌口服免疫雌鼠 ,通过ELISA方法检测其诱导雌鼠血清IgG抗体和阴道分泌物IgA抗体滴度变化。　结果 :此疫苗株X4 63 2 (pFEC)可稳定表达被Fβ 抗体识别的重组Fβ 胞外区蛋白 ,口服该菌株不但可激发雌鼠产生高水平血清抗重组Fβ 蛋白IgG抗体 ,而且在阴道分泌物中可出现一定程度抗重组Fβ 蛋白IgA抗体 ,无明显毒性作用。　结论 :X4 63 2 (pFEC)疫苗株的构建为研究以Fβ 为靶抗原的精子抗原避孕疫苗打下了基础。