高压氧对异基因骨髓移植后aGVHD影响的实验研究

本研究探讨高压氧（HBO）在抗异基因骨髓移植后aGVHD和提高生存率中的作用及机制。给受致死量照射的C57BL／6受鼠注入供鼠BALB／c骨髓与脾淋巴细胞的混合液，分别给与高压氧、环孢素A、氨甲蝶呤处理。用流式细胞仪检测脾T细胞及其亚群和黏附分子CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD11a^＋、CD4^＋CD18^＋、CD8^＋CD11a^＋、CD8^＋CD18^＋的表达，用ELISA和RT-PCR法检测细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和TNFα的表达。结果表明：HBO组小鼠11天的活存率明显高于异基因移植组及CsA＋MTX组；HBO和CsA＋MTX可明显降低脾组织中CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD11a^＋、CD4^＋CD18^＋、CD8^＋CD11a^＋、CD8^＋CD18^＋的表达（P〈0.05）；HBO组小鼠血清IL-2和TNFα的浓度及脾组织中IL-2和TNFα mRNA的含量都低于异基因骨髓移植组（P〈0.05），但高于CsA＋MTX组；HBO组小鼠脾组织中IL-4和IL-10 mRNA的含量显著高于异基因骨髓移植组和CsA＋MTX组（P〈0、05）。结论：高压氧在对抗aGVHD和提高活存率方面优于环孢素A和氨甲蝶呤，其抗aGVHD的作用机制与调节促炎／抑炎细胞因子的分泌和黏附分子的表达及抑制T淋巴细胞作用有关。     

低频耳针电刺激降低内脏敏感性的机制探讨

目的：观察低频耳电针在降低内脏高敏感模型大鼠内脏敏感性中的作用。方法：SD大鼠随机分为空白组、模型组、耳针1组、耳针2组,每组10只。除空白组外,其余大鼠通过母婴分离加醋酸灌肠建立内脏高敏感大鼠模型。耳针1组与耳针2组接受2 Hz电针刺激30 min/d,10 d。通过腹外斜肌肌电（EMG）测定直肠扩张下大鼠内脏疼痛阈值,远端结肠HE染色观察病理改变,实时荧光定量PCR检测大鼠下丘脑nesfatin?1,促皮质素释放因子（CRF）及其受体1,2（CRF1/2R）及结肠5?羟色胺受体4（serotonin receptor 4,5?HT4R）的mRNA表达情况。结果：模型组腹外斜肌放电曲线下面积（AUC）较空白组显著增加（P＜0.05）;与模型组相比,耳针1组AUC显著减少（P＜0.05）。与空白组比较,模型组下丘脑CRF、nesfatin?1、CRF1R、CRF2R的mRNA表达均显著升高（P＜0.05）,远端结肠5?HT4R的mRNA表达有下降的趋势（P=0.067）。耳针1组下丘脑CRF、nesfatin?1、CRF1R、CRF2R的mRNA较模型组显著下降（均P＜0.05）,且远端结肠5?HT4R的mRNA表达显著提高（P＜0.05）。耳针2组下丘脑CRF、CRF2R的mRNA较模型组显著下降（均P＜0.05）,但较模型组nesfatin?1、CRF1R无显著差异,远端结肠5?HT4R的mRNA表达上调不显著（P＞0.05）。结论：低频耳电针可缓解内脏高敏感大鼠的内脏敏感性,可能与调节下丘脑CRF、CRF1R、CRF2R、nesfatin?1,以及远端结肠5?HT4R的mRNA表达有关。     

关节镜下单排带线锚钉固定治疗Ⅰ、Ⅱ型骨性Bankart损伤

目的 探讨关节镜下单排带线锚钉固定治疗Ⅰ、Ⅱ型肩关节骨性Bankart损伤的临床效果.方法 在关节镜下采用单排带线锚钉对11例肩关节前向不稳伴Ⅰ、Ⅱ型骨性Bankart损伤患者进行复位固定.术后行渐进性康复训练.手术前后采用Rowes评分和UCLA评分系统进行评估,并了解术后肩关节稳定性和活动度.结果 患者均获24个月随访.Rowes评分：术前和术后24个月分别为20分±7.07分和90分±2.74分（P〈0.05）;UCLA评分：术前和术后24个月分别为6.20分±1.30分和29.20分±1.10分（P〈0.05）;患者肩关节运动能力均较术前改善.结论 关节镜下单排带线锚钉固定治疗Ⅰ、Ⅱ型骨性Bankart损伤具有创伤小、固定可靠的优点,能够很好地恢复肩关节稳定性和运动功能.     

LC-MS/MS法测定人尿液中索法酮的浓度及其尿药排泄研究

目的:建立测定人尿液中索法酮浓度的LC-MS/MS方法,用于研究健康受试者口服索法酮后药物在体内的尿药排泄特征?方法:尿液经甲醇处理后,进行LC-MS/MS分析?色谱柱为Poroshell 120 SB-C18柱,柱温为30℃?流动相为甲醇∶2 mmol/L 醋酸铵(85∶15),流速为0.20 ml/min?负离子模式下使用电喷雾离子化和多反应离子监测?2名健康志愿者单次口服索法酮胶囊200 mg后,测定尿药浓度并研究尿药排泄特征?结果:索法酮的最低定量限为1 ng/ml,在1~500 ng/ml范围内线性关系良好,高中低3个浓度的批内?批间差均小于6%,基质效应在93.1%~114.8%范围内,提取回收率为84.7%~93.6%?尿液中索法酮的累积排泄率小于0.01%?结论:所建立的LC-MS/MS分析方法能快速?准确地测定尿液中索法酮的浓度?     

人尿中对乙酰氨基苯甲酸和N,N-二甲氨基-2-丙醇的液质联用法测定及尿药排泄特征研究

目的：建立分别测定人尿中对乙酰氨基苯甲酸和N,N-二甲氨基-2-丙醇的液质联用法,考察二者在中国健康受试者尿液中的排泄特征。方法：以LC-MS法测定尿样中对乙酰氨基苯甲酸,色谱采用Amethyst C18柱（150 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液（25∶75）,流速为0.4 mL.min-1;质谱采用气动辅助电喷雾离子化和正离子选择性离子检测。以LC-MS/MS法测定尿样中N,N-二甲氨基-2-丙醇,色谱采用Hedera CN柱（150 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为乙腈-5 mmol.L-1醋酸铵水溶液（含0.03%甲酸）（55∶45）,流速为0.35 mL.min-1;质谱采用气动辅助电喷雾离子化和正离子多反应检测。10名受试者单次口服异丙肌苷片（1.0 g）,测定对乙酰氨基苯甲酸和N,N-二甲氨基-2-丙醇的尿药排泄参数。结果：对乙酰氨基苯甲酸的尿药浓度在0.202 0～202.0 mg.L-1范围内线性关系良好,平均回收率大于97.7%;N,N-二甲氨基-2-丙醇尿药浓度在0.797 8～398.9 mg.L-1范围内线性关系良好,平均回收率大于99.1%。受试者服药后,对乙酰氨基苯甲酸和N,N-二甲氨基-2-丙醇分别在6和12 h后基本随尿排泄完全,36 h内其平均尿药累积排泄百分率分别为（30.7±5.7）%和（49.0±8.6）%。结论：本法适用于人尿中对乙酰氨基苯甲酸和N,N-二甲氨基-2-丙醇的测定及其尿药排泄特征研究。     

细胞钙转运系统研究进展*

钙离子是重要的细胞信号分子。胞内和胞外、胞浆和细胞器之间的Ca2+转运都依赖于钙转运系统的精确调控。钙转运系统包括钙泵、钙通道、Na^+/Ca^2+交换体及膜结构域,如质膜的PMCA、NCX、VGCC、LGCC和TRP通道;内质网膜的SERCA、IP3Rs和RyRs等;线粒体的MCU和NCLX;内溶酶体的TPCs;联结质膜和内质网膜的CRAC通路;联结内质网膜和线粒体膜的MAM结构域等。本文对定位于质膜、内质网和线粒体的钙转运系统的种类、功能、组织分布、相关疾病以及抑制剂作综述。     

线粒体核糖体蛋白S22对细胞凋亡的影响

目的 探讨RNA干扰线粒体核糖体蛋白S22(MRPS22)表达对线粒体损伤和细胞凋亡的影响.方法 将靶向MRPS22的特异性shRNA片段转入体外培养的L02细胞,48 h后采用Western blotting方法确认shRNA的干扰效果;电镜及JC-1染色法观察线粒体结构损伤和膜电位的变化;Annexin V/PI染色法观察RNA干扰MRPS22基因表达对细胞凋亡的影响.结果 shMRPS22转入细胞后能够有效抑制L02细胞MRPS22基因的表达;电镜观察显示,RNA干扰组L02细胞线粒体肿胀,呈空泡样变,嵴减少或消失;JC-1染色显示,RNA干扰组L02细胞较对照组绿色荧光颗粒明显增加,提示线粒体膜电位下降;Annexin V/PI染色法观察细胞凋亡结果表明,抑制MRPS22基因表达可以诱导正常细胞凋亡.结论 MRPS22是影响线粒体功能的关键蛋白质,该蛋白在细胞凋亡的发生过程中也起到了非常重要的作用,提示MRPS22可作为mtDNA异常相关疾病临床诊断和治疗的新靶点.     

咖啡因治疗早产儿呼吸暂停的研究进展

早产儿呼吸暂停（AOP）是新生儿重症监护中最常见的临床问题之一，持续的呼吸暂停会对脑部及器官发育产生长期危害。咖啡因的安全剂量范围大，不良反应小，半衰期长，是治疗AOP的首选药物。到目前为止，对于咖啡因治疗的最佳剂量和时机还没有达成共识的标准化方案，需在临床观察的基础上进行剂量调整。目前可通过血药浓度监测、建立群体药代动力学模型、评估CYP1A2酶的活性，以及对酶基因多态性进行分析等方法指导咖啡因的剂量调整，预测血药浓度，为临床合理用药提供参考，实现临床个体化用药。     

酪氨酸激酶抑制剂的不良反应

分子靶向药物用于治疗恶性肿瘤效果显著,已成为抗肿瘤治疗的一个重要手段。其中酪氨酸激酶抑制剂已广泛运用于慢性髓系白血病、非小细胞肺癌、胃肠道间质瘤和肾细胞癌等的治疗,发挥着高效、低毒的抗肿瘤作用。但在临床使用过程中常可引起皮疹、水肿、腹泻等不良反应,涉及皮肤、消化、呼吸、血液等多个系统,严重者可危及生命,故在临床使用过程中应充分关注不良反应的发生和处理。本文对国内批准上市的酪氨酸激酶抑制剂致各个系统的不良反应进行综述,为临床治疗提供参考。