单克隆抗体导向的超抗原葡萄球菌肠毒素A抗肝癌实验研究

目的:制备超抗原(SAg)葡萄球菌汤毒素A(SEA)与搞人肝细胞癌单克隆抗体(McAb)F(ab’)_2段的结合物,并观察其介导外周皿单个核细胞(PBAMC)的抗人肝癌作用,方法:提取McAb HAbl8,用木瓜蛋日酶制取其F(ab’)_2段,再用N-琥珀酰亚氨基-3-(2二硫吡啶)丙酸酯(SPDP)制备HAb18 F(ab’)_2-SEA结合物;经凝胶色谱柱纯化后用SDS-PAGE鉴定各收集峰,免疫组化ABC法鉴定此结合物的抗体活性,MTT法观察HAb18 F(ab’)_2SEA介导PBMC的抗肝癌作用.结果:成功地制备了HAb18 F(ab’)_2-SEA结合物,并且此结合物具有明显的介导PBMC靶向杀伤肝癌细胞的作用,并与其剂量呈正相关.对照组无此作用结论:MCAb与SAg结合物导向治疗肝癌是一种有发表前景的肝癌免疫治疗模式.     

肝癌细胞及正常肝细胞中间隙连接蛋白Cx32、Cx43的表达--激光扫描共聚焦显微镜研究

目的研究间隙连接蛋白Cx32、Cx43在肝癌细胞系HHCC、SMMC-7721及正常肝细胞系QZG中的表达.方法采用免疫荧光标记技术,对HHCC、SMMC-7721及QZG细胞中Cx32、Cx43蛋白进行激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)分析.结果Cx2、Cx43蛋白定位于肝细胞胞质中,在HHCC、SMMC-7721中阳性细胞率、阳性细胞的荧光强度较QZG中明显减弱.结论Cx32、Cx43蛋白表达降低可能与肝细胞癌的发生有关.     

057 辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用

机体抗肿瘤免疫反应中起重要作用的是细胞免疫,近年来辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用越来越为人们所重视.Th细胞不仅可以分泌细胞因子调控肿瘤免疫,而且具有免疫记忆和直接杀伤肿瘤细胞的作用,随着一系列被Th细胞识别的肿瘤抗原被鉴定出来,人们对于Th细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用有了进一步的认识.本文综述了近年来Th抗肿瘤作用机理及Th细胞表位研究进展.     

ENHANCEMENT OF HLA-DR EXPRESSION IN HUMAN HEPATOCELLULAR CARCINOMA WITH INTERFERON

HLA--DRisoneofthemajortypesofhumanmajorhistocompatiblecomplex(MHC)type11molecule.Asamainkilldofsurfaceantigeninhumancells,itplaysanimportantroleintheimmunoreactionandimmunoregulationofthehumanbody.Manystudiesindicatethatinterferon(IFN)canenhancetheHLA-DRexpressionintumorcellsandregulatetheimmunoreactivesituationofthetumor.[l]CurrentlythereisnosuchreportthatIFNregulatestheHLADRexpressioninhepatocellularcarcinoma(HCC).TheexpressionofHLA-DRinHCCcellsandnormallivercellsbeforeandafter…     

肝癌细胞CD80表达与MHC-I分子的关系

研究共刺激分子ＣＤ８０在肝癌细胞中的表达与ＭＨＣ－１（Ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ）分子相互关系，，以探讨在肿瘤细胞所诱发的免疫排以应中共刺分子对抗的提呈机制的影响。方法：通过逆转录病毒载体介导，将ＣＤ８０基因转入肝癌细胞系ＨＨＣＣ，以流式细胞仪检测其表面ＭＨＣ－Ｉ分子的表达情况。同时检测ＬＡＫ细胞转染前后的细胞的杀伤效果。结果：表达ＣＤ８０的肝癌细胞基表达ＭＨ     

超抗原和免疫受体间相互作用的研究

超抗原(superantigen，SAG)是细菌或病毒产生的外毒素，它通过同时结合主要组织相容复体Ⅱ(major histoconlpatibility complexⅡ，MHCⅡ)和T细胞识别受体(T cell receptor，TCR)而连接抗原递呈细胞(antingen—presenting cell，APC)和T细胞。与普通抗原不同，SAG不需要APC的内处理，而是以完整蛋白的形式被肠、胃的上皮细胞吸收，在MHCⅡ抗原结合槽的外侧直接与之特异性结合，     

增殖细胞核抗原PCNA、bcl-2在肝细胞癌组织中的表达及意义

 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的发生是多种癌基因激活，抑癌基因失活的复杂过程, 应用免疫组织化学方法检测肝细胞癌及正常肝组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和凋亡抑制基因bcl-2的表达及意义。     

鉴定单克隆抗体F(ab'''')2段及其结合物抗体活性方法的建立

鉴定单克隆抗体（monoclonal antibody，mAb）的抗体活性通常采用免疫组化法或免疫印迹法。因为失去了Fc段，mAb的F（ab’）2片段的抗体活性不适合用常规免疫组化法或免疫印迹法进行鉴定。尤其是当鉴定mAbF（ab’）2段与其他蛋白质结合物的抗体活性时更为困难。我们用SPDP化学胶联法制备了抗人原发性肝细胞癌（以下简称肝癌）的mAb HAb18的F（ab’）2段与超抗原葡萄球菌肠毒素A（SEA）的结合物HAb18F（ab’）2-SEA，以用于肝癌导向免疫治疗的研究。为了鉴定HAb18F（ab’）2-SEA的抗肝癌抗体活性，本实验建立了用于鉴定mAbF（ab’）2及其结合物抗体活性的专用间接免疫组化法。     

肝癌靶向性超抗原表达载体的构建与鉴定

目的：设计并构建受AFP基因顺式作用元件调控，并经减毒处理的肝癌特异性超抗原表达载体。方法：用新设计的引物作PCR扩增截短的AFP基因启动子和增强子、linker-CD80tm和SEA（D227A）。将上述片段与逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点连接，构建成为AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原表达载体[pLXSN SEA(D227A)-Linker-CD80tm]，并用软件对其开放读框进行分析。结果：成功克隆了截短的AFP基因启动子、增强子、linker-CD80tm和SEA（D227A）。将上述序列连接到逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点，酶切鉴定和DNA序列分析无误。结论：AFP基因转录启动元件修饰的SEA表达载体，在基因转录水平定量、定向、特异性调控强有力的细胞和体液免疫活化剂（SEA），为下一步将其作为基因疫苗治疗肝癌奠定了基础。     

肝癌单克隆抗体HAb18在人体肝癌导向诊断中的意义和应用

近年,肿瘤单抗的导向研究已取得较大进展,尤其是放射免疫诊断(RIAD)取得了令人鼓舞的成功。本文用放射性碘标记肝癌膜蛋白单抗HAb18IgG及其F(ab’)2片段,对