肝细胞癌HLA—DR抗原的研究及意义

目的：探讨人白细胞DR抗原(HLA-DR)在人原发性肝细胞癌(简称肝癌)的表达情况及其意义。方法：分别采用免疫组化ABC法和流式细胞仪检测了HLA-DR在46例人肝癌组织和4种培养的人肝癌细胞系(SMMC-7721、HCC-9204、BEL-7402和HHCC)的表达情况。结果：39.1％(18／46例)的肝癌组织癌细胞可表达HLA-DR,而在癌旁非肿瘤细胞为阴性。4种肝癌细胞系都基本上不表达HLA-DR。结论：肝癌组织可在一定程度上表达HLA-DR,但是培养的肝癌细胞系基本上不表达。HLA—DR与肝癌发生、发展的关系及其在抗肝癌免疫应答中的作用有待进一步研究。     

西北地区鼻咽癌患者血清EB病毒抗体与癌细胞EBV-DNA的相关性

应用核酸原位杂交技术,对西北地区鼻咽癌60例,鼻咽粘膜慢性炎症30例和40例鼻咽外恶性肿瘤组织进行了细胞EBV-DNA检测,发现鼻咽癌细胞EBV-DNA阳性率71.6％,其它肿瘤均阴性;在鼻咽粘膜慢性炎症及癌旁上皮组织中也可发现少数EBV-DNA阳性细胞。在上述60例鼻咽癌中,随机抽取12例患者,对其血清中EB病毒抗体与癌细胞中EBV-DNA相关性进行研究,发现两者具有明显的相关性。上述结果证实,在西北地区鼻咽癌发生中,EB病毒可能具有病因学意义。     

胰岛非β细胞瘤所致水泻-低血钾-胃酸缺乏综合征1例报告(附电镜观察)

水泻-低血钾-无(或低)胃酸综合征(watery Di-arrhea,Hypokalemia and Achlorhydria Syndrome简称WDHA综合征),是一种由胰岛非β细胞内分泌素瘤等引起的霍乱样水泻、低血钾为突出表现的病症,又称胰性霍乱。1974年Verner及 Morrison综合文献共报道64例,此后国外陆续有报道。国内文献仅见陈家伟报道尸检发现1例,徐家裕报道手术证实诊断1例。最近我院遇见1例,术前诊断本症,经手术证实并摘除肿瘤而痊愈。     

抗人肝癌单克隆抗体轻链可变区基因的体外扩增、克隆及序列测定

我们应用一对引物利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从小鼠抗人肝癌单克隆抗体杂交瘤细胞株ＨＡｂ２７ＲＮＡ中扩增出了抗体轻链可变区基因，将此基因重组λＭ１３噬菌体ＤＮＡ中，测定了此可变区基因的全序列，经计算机分析，结果表明基因长度为３２４ｂｐ编码１０８个氨基酸，是具有功能性的抗体轻链可变区基因，在核苷酸序列上与鼠胚系基因ＶｋＯＸ１具有８５％同源性，所得基因为Ｖｋ与Ｊｋ４重排。     

NE(MHS)纳米乳剂疫苗的抗肿瘤免疫学效应研究

目的:制备包裹有MAGE1-Hsp70和SEA的复合抗原的纳米乳剂疫苗NE(MHS)(nanoemulsion-encapsulatedMAGE1-Hsp70/SEA),评价其抗肿瘤免疫学特性.方法:采用磁力超声法制备纳米疫苗NE(MHS),评价其粒径、包裹率及稳定性;NE(MHS)免疫动物,IFN-γ ELISPOT和LDH杀伤实验检测疫苗激活机体特异性细胞免疫反应情况;肿瘤攻击实验检测纳米乳剂疫苗的抗肿瘤效应.结果:(1)成功制备出粒径为(20±5)nm的NE(MHS),其药物包裹率为87%,于4℃放置6个月后或3 000 r/min 10 min离心后无分层;(2)与其他组相比,NE(MHS)组小鼠脾淋巴细胞中分泌IFN-γ的T细胞数量明显增多(P<0.05),CTL对B16-MAGE-1的特异性杀伤作用明显增强;NE(MHS)组B16-MAGE-1肿瘤成瘤时间长、成瘤率低.结论:NE(MHS)纳米乳剂疫苗具有良好的理化性质,能够刺激机体产生强烈的MAGE-1特异性的细胞免疫,能有效预防表达MAGE-1的肿瘤细胞攻击,是一种很有希望的新型抗肿瘤疫苗.     

人CD80—Linker—SEA重组毒素的设计及生物学特性预测

目的：构建人重组ＣＤ８０－Ｌｉｎｋｅｒ－ＳＥＡ毒素的真核表达载体并预测Ｌｉｎｄｅｒ的合理性和可行性。方法：应用核酸和蛋白质序列分析软件ＧｏｌｇＫｅｙ对融合基因及Ｌｉｎｋｅｒ部位翻译后在二级结构水平上的一些生物学特性,诸如柔性、抗原性、亲水性及表位等加以预测。结果：ＣＤ８０－Ｌｉｎｋｅｒ－ＳＥＡ融合基因的氨基酸序列经软件分析,并分别与ＣＤ８０与ＳＥＡ单独的分析结果相比较,发现在二级结构的水平未出现新的抗原性,同时在Ｌｉｎｋｅｒ部位具有很低的抗原性,亲水性没有改变,Ｌｉｎｋｅｒ部位呈中性,ＣＤ８０和ＳＥＡ具有原来各自的表位特征,无新的表位出现。结论：本研究通过计算机软件对ＣＤ８０－Ｌｉｎｋｅｒ－ＳＥＡ融合蛋白的预测,并与ＣＤ８０、ＳＥＡ各加以对比分析和比较,以利于在重组过程中有一个合理的设计,有可能最大程度的保留Ｃ     

HLA—A1相关肝癌抗原肽的初步研究

目的 寻找肝癌细胞表达的肿瘤抗原肽。方法 应用0．2mol/Lph3.0柠檬酸缓酰洗肝癌细胞系HHCC,经SephadexG-25过渡及反向高效液相色谱分离纯化,获得可与HLA－I类分子结合的不同组分短肽。将其与抗原加工缺陷的HLA－A2T2细胞反应,进行肿瘤细胞特异性表位测定,同时进行CTL杀伤鉴定。结果 获得4个可与HLA－A2结合的组分,其中2个可以激发较强的CTL杀作畈应。结论 肝癌细胞系HHCC中存在能够激发CTL特异性反应的肿瘤抗原肽,并证实上述寻找肿瘤抗原肽的技术路线具有可行性。     

免疫重建荷人高转移肝癌SCID鼠模型的建立及其鉴定

目的：建立具有人免疫学特性的高转移肝癌SCID鼠模型。方法：SCID小鼠腹腔注射人外周血淋巴细胞,皮下接种人高转移肝癌细胞MHCC97-H,免疫重建人高转移肝癌SCID小鼠模型,并鉴定建立的结果。结果：①免疫重建荷人高转移肝癌细胞小鼠的成瘤率为100％,较荷瘤组成瘤潜伏期延长,体积缩小（P〈0．05）;转移率为100％,其从皮下转移到肝脏所需时间较荷瘤组延长（P〈0．05）。②第2、4、6周小鼠血中人IgG含量的测定：同期相比,人化荷瘤组小鼠血中人IgG含量高于人化组（P〈0．05）。③第6周SCID小鼠外周血中人CD3^＋T淋巴细胞和人CD20^＋B淋巴细胞含量的测定：人化荷瘤组小鼠血中人CD3^＋T淋巴细胞和人CD20^＋B淋巴细胞含量高于人化组（P〈0．05）。④免疫组化检测人化荷瘤组小鼠脾脏中存在人CD3^＋T淋巴细胞和CD20^＋B淋巴细胞。结论：成功建立免疫重建荷人高转移肝癌SCID鼠模型,为肝癌转移的研究及治疗提供了理想的动物模型。