全氟及多氟类有机化合物对女性生殖健康影响的研究进展

全氟及多氟类有机化合物(perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances,PFASs)是一类人工合成的化工表面活性剂,被广泛应用于纺织、造纸、包装、农药、地毯、皮革等表面防污处理剂。全氟有机化合物可通过饮食、饮水和呼吸等途径进入人体。现已有大量研究表明,PFASs暴露可能影响人类和动物的生殖健康,本综述聚焦PFASs对女性卵母细胞生长发育、女性生殖内分泌激素的调节、女性不孕症相关疾病以及出生子代生长发育等热点问题进行阐述,并对目前PFASs对女性生殖健康影响方面的研究存在的问题及今后的研究方向进行讨论和展望。     

小干扰RNA抑制内源性原癌基因c-myc表达对鼻咽癌细胞5-8F的影响

目的通过RNA干扰抑制鼻咽癌5-8F细胞内源性原癌基因c-myc的过表达,观察c-myc过表达受到抑制后对5-8F细胞生物学特性的影响。方法构建针对c-myc的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,利用LipofectamineTM2000脂质体转染5-8F细胞,建立稳定转染干扰组细胞5-8F/si-c-myc;同法建立阴性对照组细胞5-8F/si-control,并以5-8F为空白对照组细胞;通过半定量反转录聚合酶链反应和Western blot分别检测c-myc mRNA和蛋白水平表达,鉴别干扰效果;通过四甲基偶氮唑蓝比色法检测干扰前后对5-8F细胞生长的影响;通过流式细胞仪分析干扰前后对5-8F细胞周期的影响;通过透射电镜扫描观察干扰前后对5-8F细胞超微结构的影响。结果与空白对照组和阴性对照组细胞相比,干扰细胞组c-myc mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P<0.05),细胞生长活力显著降低(P<0.05),细胞周期G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05),S期细胞比例显著降低(P<0.05),细胞超微结构发生明显改变。结论干扰内源性c-myc的siRNA能显著抑制5-8F的细胞生长和细胞分裂增殖,c-myc基因有可能成为鼻咽癌基因治疗新靶点。     

检测干扰导致2例CA19-9假性升高的处理及分析

正糖类抗原(CA)19-9是唾液酸化Ⅱ型乳酸岩藻糖,是肿瘤细胞神经节苷脂。胚胎期分布于胎儿的胰腺、肝胆和肠道等组织,在成人的胰腺、胆道、胃肠道、子宫内膜等部位也有少量存在~([1])。胰腺癌、肝胆管癌、胃癌、肝癌、直肠癌及乳腺癌患者血液中均可升高,胰腺炎及良性胃肠道疾病患者中也可见升高~([2])。CA19-9升高对于早期发现肿瘤复发及转移具有重要的临床意义。目前,CA19-9常用的检测方法为化学     

siRNA干扰MafA对小鼠胰岛β细胞的生长以及胰岛素相关基因的表达分析

目的探讨肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A（MafA）对小鼠胰岛β细胞Min6的增殖以及胰岛素相关基因mRNA及蛋白表达的影响。方法实验分为MafA siRNA转染的MafA干扰A组、MafA干扰B组、MafA干扰C组及未转染的对照D组、对照E组、对照F组。MafA干扰A组和对照D组培养的葡萄糖浓度为5.6 mmol/L，MafA干扰B组和对照E组为10 mmol/L，MafA干扰C组和对照F组为25 mmol/L。采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测mRNA及蛋白表达，MTT法检测胰岛细胞增殖，ELISA测定胰岛素浓度。结果在MaFA mRNA及蛋白的表达水平，MafA干扰B组和对照E组、MafA干扰C组、对照F组相比差异均有统计学意义（P < 0.05）。MafA干扰C组Min6细胞增殖水平低于对照F组（P < 0.05）。MafA干扰C组Insulin-1、Insulin-2 mRNA相对表达水平均低于对照F组（P < 0.05）。MafA干扰C组胰岛素浓度低于对照F组（P < 0.05）。结论MafA基因与小鼠胰岛β细胞增殖和胰岛素分泌相关，其作用可能与血糖浓度有关。     

长非编码 ＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 在成人急性 Ｔ 淋巴细胞白血病 中的表达特征及预后相关性

摘要：目的 探讨长非编码 ＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 在成人急性 Ｔ 淋巴细胞白血病中的表达及其临床意义。方法 采用实时定量荧光 ＰＣＲ 检测长非编码 ＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 在 ２５ 例健康人对照组、３４ 例初治 Ｔ ＡＬＬ 组和 １９ 例 Ｔ ＡＬＬ 治疗缓解后复发患者组骨髓内淋 巴细胞中的表达水平；采用流式细胞术（Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ ＰＩ 双染法）检测经过柔红霉素分别处理且 ＬＵＮＡＲ１ 基因呈高、低表达的 ２ 例复发 Ｔ ＡＬＬ 患者的肿瘤细胞凋亡情况；通过 ＮＣＢＩ 数据库获取 Ｔ ＡＬＬ 患者中预后资料与 ＬＵＮＡＲ１ 基因表达数据，ＣＯＸ 回归 分析高表达 ＬＵＮＡＲ１ 基因与临床预后不良的相关性。结果 与健康人对照组相比，ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 在初治 Ｔ ＡＬＬ 组患者骨 髓内淋巴细胞中高表达（５．６１±２．７５ ｖｓ ０．３５±０．２７，ｔ ＝ ６．９３，Ｐ＜０．００１），且复发患者骨髓内淋巴细胞中的 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因的 表达水平显著高于初发患者（２３．９５±９．７９ ｖｓ ５．６１±２．７５，ｔ ＝ ７．５２，Ｐ＜０．００１）；使用柔红霉素处理复发 Ｔ ＡＬＬ 患者肿瘤细胞后，高 表达 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因的 Ｔ ＡＬＬ 细胞凋亡情况显著低于 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因低表达的细胞（４． ０６％ ｖｓ １０． ７０％，Ｐ＜ ０．０５）。Ｃｏｘ 比例风险模型显示，Ｔ ＡＬＬ 患者 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因高表达与临床预后不良相关（ＨＲ＝ １．８６，Ｐ＝ ０．００２）。结论 成人 Ｔ ＡＬＬ 中异常高表达的长非编码 ＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因与 Ｔ ＡＬＬ 的发病及复发密切相关，可预示疾病的预后及转归。 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１有望成为潜在检测的 Ｔ ＡＬＬ 发病及复发的分子靶标。     

１ 株同时携带 ｖａｎＡ、 ｖａｎＭ 的屎肠球菌高通量测序分 析

目的：了解耐万古霉素屎肠球菌EFM277的耐药基因分布特点及机制。方法：用Illumina Hiseq平台对EFM277进行高通量测序,用生物信息学技术对数据进行拼接和分析。结果：屎肠球菌除对利奈唑胺、替加环素和高水平庆大霉素敏感外,其他常用抗生素全部耐药。对测序数据进行分析发现编码氨基糖苷类耐药基因包括aac(6")-Ii、aph(3")-III、aac(6")-aph(2"")；四环素耐药基因tetM；大环内酯类耐药基因包括msrC、ermB；同时检出糖肽类耐药基因VanA型、VanM型,较为罕见。MLST分析发现其可能是一种新的ST型,与ST17型最相近。毒力基因分析中发现其携带acm,esp,hyl三种毒力基因。结论：利用高通量测序技术阐明EFM277耐药机制,为临床用药提供更为有力的依据。     

JAG2基因沉默影响大肠癌细胞株侵袭能力的研究

目的 Notch信号在肠上皮细胞种系分化和引发肠腺瘤和肠癌中起着关键的作用。本文试图探讨Notch信号的配体JAG2在大肠癌中的作用。方法 Real-Time PCR和Western blot分别检测JAG2特异性si RNA对JAG2 m RNA及蛋白表达的抑制率,细胞增殖实验和细胞侵袭实验观察si RNA对细胞增殖及侵袭能力的影响,人类肿瘤转移RT2 Profiler?PCR Array用于筛选JAG2下游靶基因,并应用特异性抑制化合物抑制靶蛋白活性。结果特异性si RNA对JAG2 m RNA及蛋白的表达具有抑制作用(P<0.05),对细胞增殖无明显影响(P>0.05),对细胞侵袭能力明显抑制(P<0.05),而组织蛋白K(CTSK)活性降低可能参与了这一过程。结论 JAG2基因可能对大肠癌细胞的侵袭转移能力起促进作用。