RNAi技术及其在胶质瘤中的研究进展

<正>RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种在动植物中广泛存在的,由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的序列特异性基因沉默现象。由于RNA干扰可以抑制特定基因的表达,至今短短十几年的时间,RNAi技术已迅速发展成为一种成熟的基因沉默工具,对生命科学研究产生了深远的影响。已广泛用于研究基因表达及调控,信号传导通路,药物的作用机制,肿瘤的临床治疗等诸多领域,现将RNAi技术及其在胶质瘤研究中的应用进展综述如下。     

携带ROCK2基因siRNA有效片段的慢病毒载体的筛选

目的:筛选能够显著抑制自发性高血压大鼠(SHR)阴茎海绵体平滑肌细胞内ROCK2基因表达的携带ROCK2基因siRNA的慢病毒载体。方法:设计并合成4个靶向ROCK2的siRNA片段,构建并包装成慢病毒载体。随机将5只SHR阴茎海绵体平滑肌细胞分为6组,每组每个样本3×104个细胞,每组5个样本,分别为:A组(未转染对照组)、B组(携带慢病毒转染组)、C~F组(分别携带靶向ROCK2基因siRNA 1~4号靶点的慢病毒转染组),以感染复(MOI)=80转染SHR阴茎海绵体平滑肌细胞,转染后48 h荧光显微镜下观察细胞GFP表达情况,并用RT-PCR检测各组被转染细胞ROCK2 mRNA的表达。结果:荧光显微镜下观察各组细胞转染效率均50%。与A组相比,B组ROCK2 mRNA的表达无明显改变(P﹥0.05);C、D、F组SHR阴茎海绵体平滑肌细胞ROCK2基因mRNA的表达较A组极显著下降(P0.01),抑制效率分别达到(43.91±8.19)%、(47.15±6.64)%、(25.7±6.03)%;E组SHR阴茎海绵体平滑肌细胞ROCK2基因mRNA的表达较A组显著下降(P0.05),抑制效率为(16.81±5.94)%。结论:本研究构建的4种携带ROCK2基因的siRNA慢病毒载体均能够显著抑制SHR阴茎海绵体平滑肌细胞内ROCK2基因的表达,其中有1种慢病毒载体抑制作用最强。     

液基细胞学配合阴道镜筛查宫颈上皮内病变结果分析

宫颈癌是发展中国家妇女死于癌症的重要原因，基细胞学（LCT）一次性完成自动制片、染片过程，能成功处理可干扰诊断的血液和炎症细胞，较传统涂片准确率高。     

5种总胆红素测定试剂盒的比较分析

总胆红素是结合（直接）胆红素与非结合（间接）胆红素的总和。总胆红素增加，通常是由于胆道阻塞、肝炎、肝硬化、溶血性综合征和某些遗传酶的缺乏。血清总胆红素测定是肝、胆功能检查中的重要项目。改良J—G法测定胆红素被《全国临床检验操作规程》收录，在临床实验室广泛应用，但该法易受众多因素干扰，试剂无法长期稳定，在实践过程中易受困扰。随着全自动生化分析仪的普及及应用，新的胆红素测定方法不断推出。本实验通过比较重氮法（北京柏定、宁波赛克、山东康华）、钒酸氧化法（上海科华）、改良化学氧化法（宁波美康）的性能指标，选择一种适于本实验室使用的方法。     

补中益气丸辅助5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣临床研究

目的:观察补中益气丸辅助5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗尖锐湿疣(CA)的临床疗效。方法:选取CA患者82例,按随机数字表法分为研究组和对照组各41例。2组均暂停性生活,并采取常规西医治疗,对照组采取ALA-PDT,研究组在对照组基础上给予补中益气丸口服。比较2组临床疗效,检测治疗前后血清Th1/Th2型细胞因子[干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10 (IL-10)、白细胞介素-2 (IL-2)]、淋巴细胞趋化因子(LTN)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)含量及生活质量(CECA10)评分,并于治疗后3个月、6个月、9个月随访疾病复发率。结果:研究组总有效率为92.68%,高于对照组75.61%,差异有统计学意义(P0.05)。治疗前,2组血清IFN-γ、IL-10、IL-2水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组IFN-γ、IL-2、IL-10水平较治疗前改善(P0.05);且研究组IFN-γ、IL-2水平高于对照组,IL-10水平低于对照组(P0.05)。治疗前,2组血清LTN、TGF-β1水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组血清LTN、TGF-β1水平较治疗前增高,且研究组高于对照组(P0.05)。治疗前,2组CECA10量表评分比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组CECA10量表评分较治疗前升高,且研究组高于对照组(P0.05)。治疗后9个月,研究组复发率(11.11%)低于对照组(36.67%)(P0.05)。结论:补中益气丸辅助ALA-PDT治疗CA患者疗效确切,可提高血清LTN、TGF-β1水平,增强机体免疫功能,改善生活质量,降低疾病复发率。     

干扰型分析在诊断神经肌肉疾病中的应用

应用ＳｔａｌｌｂｅｒｇＥ的干扰型分析技术，对１０例正常人和２０例神经肌肉疾病患者进行传统肌电图和干扰型分析检测。结果表明该分析技术较之常规的运动单位定量分析具有快捷，准确率高的优点。     

连台手术腹腔镜气腹管应用体会

腹腔镜是一种以气体为透视介质的内镜,故在手术时必须保持一定的空腔.建立气腹是达到这一目的获得充分显露和手术操作空间的方法之一.腹腔镜具有创伤小、出血少、对腹内脏器干扰小、术后疼痛轻、恢复快、瘢痕小等优点.深受病人和医护人员的欢迎.     

观察生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析以及改进措施

目的分析探讨生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析。方法选取2015年1~3月该院收集的混合血清标本20份作为检测标本。该次研究所有的检测仪器为贝克曼DXC800全自动生化分析仪。该次研究所涉及的常规生化试剂有总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和尿酸(UA),TBA测定方法为酶循环法。观察特殊清洗前后生化试剂组合TBA测量结果。结果生化试剂处理前,TC/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,TG/TBA为(218.03±6.45)μmol/L,HDL-C/TBA为(8.13±0.05)μmol/L,LDL-C/TBA为(184.01±5.16)μmol/L,UA/TBA为(474.11±10.24)μmol/L。经统计学检验,TG、LDL-C以及UA对TBA有影响(P0.05)。生化试剂处理后,TC/TBA为(8.13±0.05)μmol/L,TG/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,HDL-C/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,LDL-C/TBA为(8.12±0.04)μmol/L,UA/TBA为(8.12±0.04)μmol/L。经统计学检验,特殊清洗处理后生化试剂对TBA无影响(P0.05)。结论生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸有干扰。因此,要提高改进措施如加强清洗及科学性的有序检测从而避免污染,保证检测结果准确性。     

Negri小体内的狂犬病毒抗原

以含Ｎｅｇｒｉ小体（ＮＢ）的７例海鸟及４例小脑切片，分别作Ｍａｃｃｈｉａｖｅｌｌｏ（马氏）和磷钨酸伊红（ＥＰＴ）染ＮＢ，以单克隆－狂犬病毒核衣壳蛋白抗体为一抗作ＳＰ染色，并作免疫加乌氏和／或ＥＰＴ的双重染色。见ＮＢ内部含狂犬病毒核衣壳蛋白抗原（ＲＶＡｇ）较少，免疫反应较弱，只外围仍见免疫反应较强之外环。少数ＮＢ内有内小体，也由免疫反应强阳性之小环及阴性之内容物构成。在小脑可见免疫反应极弱甚至阴性之ＮＢ。这些现象提示ＮＢ的形成可能是狂犬病毒体（ＲＶ）的退变现象。