己糖激酶在原代培养腹膜间皮细胞的表达

目的 :探讨大鼠腹膜间皮细胞 (peritonealmesothelialcell,PMC)的原代培养方法及其己糖激酶 (hexoki nase ,HK)的表达。方法 :胰蛋白酶 EDTA消化法进行PMC的分离、培养 ,6 磷酸葡萄糖脱氢酶 (G6PDH)偶联比色法检测其HK总活性。结果 :PMC的原代及传代细胞 5～ 8d即可达到融合 ,其HK的基础活性为 (4.80± 0 .39)U/g蛋白。结论 :改良的胰蛋白酶消化法是进行PMC原代培养的一种可靠的实验方法。PMC有较强的HK活性 ,参与了腹膜透析时对葡萄糖吸收和利用方面的调节 ,可能对透析超滤有较大的影响     

西咪替丁引起的急性肾功能衰竭

西咪替丁引起的急性肾功能衰竭中国医科大学附属第一医院马健飞周希静，沈阳１１０００１西咪替丁（Ｃｉｍｅｔｉｄｉｎｅ），是一种组胺Ｈ２受体拮抗剂，可与组胺竞争Ｈ２受体从而消除组胺所致胃酸分泌作用。自１９７６年以来，西咪替丁广泛应用于临床，治疗消化性溃疡，...     

氧化应激及丝裂原活化蛋白激酶在醛固酮加盐诱导肾脏损害中的作用

目的 探讨氧化应激与丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs)在醛固酮加盐诱导肾脏损伤中的作用。 方法 SD大鼠随机分为以下5组: ⑴ 0.5%乙醇作为对照组； ⑵ 1%氯化钠+0.5%乙醇（氯化钠组）； ⑶ 1%氯化钠+醛固酮+0.5%乙醇（醛固酮组）；⑷ 1%氯化钠+醛固酮+0.5%乙醇+依普利酮（依普利酮组），⑸ 1%氯化钠+醛固酮+0.5%乙醇+超氧化物歧化酶模拟物tempol（tempol组）。实时定量PCR检测肾皮质NADPH氧化酶亚基p22phox、Nox-4 和 gp91phox mRNA水平。Western印迹检测肾皮质磷酸化ERK1/2、JNK及ERK5蛋白表达。 结果 与氯化钠组大鼠相比，醛固酮组大鼠的血压[（165±5）比（118±3） mm Hg]及尿蛋白量（24 h） [(101.0±24.0) 比 (9.1±3.0) mg]显著增高(P均 < 0.05)；肾皮质脂类过氧化反应产物（TBARS）水平明显升高[(0.23±0.02) 比 (0.09±0.01) nmol/mg 蛋白，P < 0.05]；肾皮质NADPH氧化酶亚基p22phox、Nox-4和 gp91phox mRNA表达显著升高[分别为氯化钠组的(2.3±0.2)、(4.3±0.8)和(3.0±0.3)倍，P < 0.05]；肾皮质ERK1/2、JNK与ERK5活性显著增高[分别为氯化钠组的(3.3±0.3)、(2.3±0.3)和(3.0±0.2)倍，P < 0.05]。依普利酮或tempol明显降低醛固组大鼠的血压、尿蛋白量（24 h） [依普利酮组和tempol组分别为(10.0±2.0)、(9.3±2.0) mg]以及肾皮质TBARS水平[依普利酮组和tempol组分别为(0.08±0.01)和(0.11±0.03) nmol/mg 蛋白] (P < 0.05)；并使肾皮质组织ERK1/2、JNK及ERK5活性降至接近对照组水平。 结论 氧化应激与MAPKs通路激活在醛固酮加盐诱导的肾脏损伤中发挥重要作用。     

细胞毒因子在肾小球疾病中的作用

本实验应用结晶紫染色法，检测了５０例肾小球疾病病人血和尿的细胞毒因子水平及治疗前后该因子的动态变化。结果显示，在活动性肾小球疾病及难治性肾病综合征、尿素症晚期经血液透析治疗的病人，血、尿中该因子水平不同程度增高；而治疗后随疾病的缓解和治愈，细胞毒因子水平逐渐下降至恢复正常。该结果提示：细胞毒因子在肾小球疾病的发病中具有明显的致病作用，与肾损伤密切相关；可根据该因子的动态变化，判断疾病的发作与缓解，     

多配体蛋白聚糖4是糖尿病肾病的候选基因

目的 在2型糖尿病肾病(DN)白蛋白尿易感基因定位的基础上,进一步筛选白蛋白尿易感基因位点(UA-1)区域附近的候选基因.方法 提取20周龄雄性KK/Ta(n=3)和BALB/c (n=2)小鼠肾脏总RNA,应用Affymetrix Murine Genome U74Av2基因芯片检测肾脏基因表达谱.选择UA-1区域的差异表达基因多配体蛋白聚糖4(syndecan-4),竞争性RT-PCR验证基因芯片的结果.提取KK/Ta、BALB/c小鼠的基因组DNA,进行syndecan-4基因编码区和启动子区域的序列分析.结果 在2型糖尿病KK/Ta小鼠UA-1区域附近存在着约10个差异表达基因.其中syndecan-4在20周龄KK/Ta小鼠肾脏中的表达上调,为BALB/c小鼠的26.1倍.在syndecan-4基因编码区存在2个基因多态性,分别为A93C和T216C多态性,2者均为同义突变.在syndecan-4基因启动子区域存在3个基因多态性,分别为-T263C、-T396C 与-G669A多态性.TATA框位于转录起始位点上游321 bp处,-T263C处恰好为转录因子Clox 的结合位点.结论 syndecan-4基因位于2型糖尿病UA-1附近区域,在20周龄KK/Ta小鼠肾脏中的表达明显上调,是DN的候选基因.syndecan-4启动子处的基因多态性可能为其差异表达的原因.     

糖尿病肾病早期尿Ⅳ型胶原检测的意义

我们采用ELISA法检测糖尿病肾病(DN)患者尿(Col Ⅳ)水平,并与24 h尿白蛋白排泄率(UAE)比较,以探讨尿ColⅣ检测在DN早期肾损害中的临床诊断价值。     

碱性成纤维细胞生长因子在慢性间质性肾炎中的表达及意义

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在慢性间质性肾炎(CIN)患者肾组织中的表达及意义。方法2001-022002-12对中国医科大学附属第一医院的30例慢性间质性肾炎患者及5例正常人采用免疫组织化学SP法检测肾组织中bFGF的表达,并采用图像分析技术测定bFGF阳性表达部分的平均灰度值、平均光密度值及其与整个视野面积的比值,所得数据进行统计学比较。结果慢性间质性肾炎患者肾间质中bFGF表达明显增强,其平均灰度值、平均光密度值及阳性表达面积较正常对照组差异有显著性。结论bFGF能够促进慢性间质性肾炎患者肾间质成纤维细胞及单核细胞增生,从而导致肾间质纤维化。     

前列腺素E1加用皮质激素治疗慢性间质性肾炎的疗效观察

为观察前列腺素E1(PGE1)、强地松，对慢性间质性肾炎(CIN)的治疗作用，我们选择50例(CIN)患者，分别给予强的松、PGE1、强的松 PGE1，凯时，凯时 强的松治疗，检测用药前后的血肌酐、血色素水平，结果多数治疗组血肌酐明显下降，血色素明显上升，提示外源性PGE1和皮质激素可以延缓CIN进入终末期肾袁，保护残余肾功能。     

脂多糖作用下腹膜间皮细胞骨桥蛋白表达及乌司他丁的影响

目的：观察脂多糖对大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）中骨桥蛋白（OPN）表达的影响;观察乌司他丁（ulinastatin）作用下RPMC的OPN细胞分布及mRNA表达的影响。方法：胰蛋白酶法行RPMC的原代培养和传代,经鉴定第3代细胞融合至80%时分组。正常对照组：不同浓度LPS（50,100μg/ml）组;50μg/mlLPS作用不同时间（8,12,24,34,48h）组;乌司他丁组：（160,320,640U/ml）与LPS50mg/L作用24h,RealTime-RT-PCR技术检测骨桥蛋白（OPN）、TGF-β1mRNA的表达。结果：LPS可刺激RPMC的骨桥蛋白表达显著增加,呈剂量、时间依赖性（P〈0.05）;乌司他丁可降低LPS引起的RPMC中的骨桥蛋白表达,呈剂量依赖性（P〈0.05）。结论：脂多糖通过上调骨桥蛋白的表达,引起腹膜损伤导致腹膜纤维化,乌司他丁可以一定程度抑制骨桥蛋白引起的腹膜纤维化过程。     

姜黄素对急性腹膜炎大鼠腹膜Toll样受体2和6表达的影响

Toll样受体(TLR)家族是重要的膜受体家族,由TLR介导的天然免疫反应是机体对感染因素入侵的第1道防线[1].TLR2和T186受体在表皮葡萄球菌诱发的急性腹膜炎中的相关性研究目前还未见报道.姜黄素的药理作用十分广泛,包括抗炎、抗肿瘤、免疫调节等.我们研究TLR2和TLR6在由表皮葡萄球菌诱发的急性腹膜炎中的表达情况以及姜黄素是否会在此过程影响TLR2和TLR6受体的表达.