幽门螺旋杆菌携带者其子女感染率100例分析

幽门螺旋杆菌携带者其子女感染率１００例分析浙江省绍兴市人民医院（３１２０００）董学君自１９８２年发现幽门螺旋杆菌（ＨＰ）以来，ＨＰ已成为研究的热门课题。本文对ＨＰ携带者和非携带者及其子女进行ＨＰ的ＰＣＲ检查，旨在了解儿童感染的状况及可能途径，建立ＰＣ...     

人类疱疹病毒6、7、8型感染与特发性血小板减少性紫癜相关性研究

特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic putpura，ITP)是一种常见的出血性疾病。有研究资料显示，EB病毒、人类巨细胞病毒(CMV)、人细小病毒B19、水痘—带状疱疹病毒、人类疱疹病毒(HHV)6型、麻疹病毒、风疹病毒等病毒感染与ITP的发生有较密切的相关性；但HHV6～8型是新近发现的病毒，尤其HHV7、8型与ITP发病相关性的研究报道不多。     

发根聚合酶链反应诊断急性间歇性卟啉症

发根聚合酶链反应诊断急性间歇性卟啉症董学君急性间歇性卟啉症（ａｃｕｔｅｉｎｔｅｒｍｉｔ－ｔｅｎｔｐｏｒｐｈｙｒｉａ，ＡＩＰ）是常染色体显性遗传病。患者肝和红细胞中胆色素原脱氨酶（ＰＢＧ－ＤＡ）缺乏，尿中大量胆色素原（ＰＢＧ）和δ氨基γ酮戊酸（ＡＬＡ）...     

荧光定量聚合酶链反应检测人类疱疹病毒7型方法的建立及应用

1990年，首次从健康人外周血单个核细胞中分离到人类疱疹病毒7型(human herpes virus type 7，HHV-7)。HHV-7为双链DNA病毒(145kh)，主要感染CD4^ 淋巴细胞、唾液腺。HHV-7感染可引发婴儿急疹、热性癫痫发作、慢性疲劳性综合征和单核细胞增殖异常等。HHV-7与HHV-6同属人类β-疱疹病毒，两者在细胞病变特点和分离培养条件方面相似，HHV基因诊断是目前较理想的诊断和鉴别诊断方法。传统定性聚合酶链反应(PCR)技术曾被广泛应用于临床诊断，但存在不能定量、特异性不够等缺陷。     

实时荧光聚合酶链反应检测乙肝病毒YMDD变异标本影响因素的研究

目的探讨标本贮存温度、血红蛋白、高胆红素因素对熔解曲线法检测HBV-YMDD变异结果的影响。方法服用拉米夫定出现YMDD变异株的慢性乙型肝炎患者的血清,在不同的贮存温度、血红蛋白、胆红素浓度下,用杂交探针溶解曲线法检测,观察其荧光扩增曲线的Ct值及熔解曲线的Tm值。结果在4℃和25℃贮存的血清标本,其Ct值与对照组比较有显著性差异(P<0.001);在-20℃贮存温度下,其Ct值与对照组比较无显著性差异(P>0.05);Hb浓度为60μg/L及600μg/L的血清标本,其Ct值与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.001);胆红素浓度为25.6μg/L及45.2μg/L的血清标本,其Ct值与对照组比较均有显著性差异(P<0.001)。熔解曲线的Tm值与对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论标本贮存温度、血红蛋白、高胆红素因素对实时荧光聚合酶链反应检测乙肝病毒YMDD变异结果有影响,尤其是低拷贝HBV-DNA的血清标本,上述因素可能会导致结果的假阴性;对基因分型特异性无明显影响。     

特发性血小板减少性紫癜与人类疱疹病毒6型感染关系初探

目的:了解特发性血小板减少性紫癜与人类疱疹病毒6型(HHV-6)感染间的关系。方法:聚合酶链反应(PCR)检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)骨髓、外周血中的HHV-6-DNA,健康体检者和缺铁性贫血者为对照组。结果:20例ITP患者、10例缺铁性贫血患者和30例健康体检者外周血的HHV-6-DNA检出率分别为25％(5/20)、10％(1/10)和3.33％(1/30),ITP患者组与健康体检组间,差异有显著性(P<0.05)。ITP患者组与缺铁性贫血组间差异无显著性。15例ITP患者骨髓和10例缺铁性贫血患者骨髓,HHV-6-DNA检出率分别为46.67％(7/15)和0,二者间差异有显著性(P<0.05)。10例ITP治疗前、治疗第5天、第10天时外周血HHV-6-DNA检测,分别有3、3、2例阳性。结论:ITP与HHV-6的感染呈正相关;骨髓中HHV-6-DNA检出率高于外周血中。     

乳腺癌患者外周血CK19基因表达的检测及临床价值分析

目的探索外周血CK19基因表达的检测及在乳腺癌诊断中的应用价值。方法应用逆转录结合荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乳腺癌MDA-MB453细胞株血液标本模型和280例临床标本的CK19表达,同时检测三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)表达作为PCR方法的监控指标。结果逆转录结合FQ-PCR检测MDA-MB453细胞株血液标本模型的灵敏度为107个血细胞中含1个乳腺癌细胞的水平。280例外周血临床标本的CK19表达,乳腺癌组(38/120)与非乳腺癌组(20/80)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌组(38/120)与正常对照组(2/80)比较,差异有统计学意义(P<0.01);乳腺癌淋巴结转移组(21/53)与未见淋巴结转移组(17/67)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌术后2年以上者,复发组(3/9)与未复发组(6/31)比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。GAPDH表达均阳性。结论CK19是上皮细胞性癌细胞的较特异指标,诊断乳腺癌的特异性不强,但可用作病理学检查的补充,或结合其他特异性指标共同诊断乳腺癌微转移和复发,具有一定的价值。     

体外siRNA抑制乳腺癌细胞株端粒逆转录酶基因的表达

目的:筛选能高效抑制乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-453端粒逆转录酶(hTERT)基因表达的RNA干扰靶点,为乳腺癌的基因治疗提供依据.方法:构建针对hTERT基因的三种siRNA(siRNA-hTERT1,siRNA-hTERT2和siRNA-hTERT3),分别转导入乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-453.同时以无同源性的siRNA-hTERT4作阴性对照,含GFP基因的载体作阳性对照.应用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和Western Blot技术检测siRNA处理前后hTERT基因表达变化;MTT法检测细胞生长率;流式细胞术分析基因沉默对细胞凋亡的影响.结果:与阴性对照组相比,siRNA-hTERT1,siRNA-hTERT2和siRNA-hTERT3三个实验组siRNA转染细胞后,hTERT的mRNA表达量下调至21%～40%,蛋白表达下降至50%,而三个实验组间差异无统计学意义(P>0.05).转染48 h后,MCF-7细胞抑制率分别为(57±4.3)%,(61±4.3)%,(65±6.0)%;MDA-MB-453细胞抑制率分别为(45±5.1)%,(45±4.1)%,(50±4.0)%.流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率有所增加,MCF-7细胞为(18.90±0.11)%,(27.30-I-0.18)%,(27.00 4-0.16)%;MDA-MB-453细胞为(12.25 4-0.17)%,(17.80±0.19)%,(20.60 4-0.21)%.结论:经siRNA-hTERTl,siRNA-hTERT2,siRNA-hTERT3处理均可明显抑制MCF-7和MDA.MB-453乳腺癌细胞的增殖及hTERT基因的表达,能够明显促进细胞的凋亡.     

特发性血小板减少性紫癜与人类疱疹病毒6型感染关系初探

目的：了解特发性血小板减少性紫癜与人类疱疹病毒6型（HHV－6）感染间的关系。方法：聚合酶链反应（PCR）检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）骨髓，外周血中的HHV－6－DNA健康体检者和缺铁性贫血者为对照组。结果：20例ITP患者，10例缺铁性贫血患者和30例健康体检者外周血的HHV－6－DNA检出率分别为25％（5／20），10％（1／10）和3．33％（1／30），ITP患者组与健康体检组间，差异有显著性（P＜0．05）。ITP患者组与缺铁性贫血组间差异无显著性。15例ITP患者骨髓和10例缺铁性贫血患者骨髓，HHV－6－DNA检出率分别为46．67％（7／15）和0，二者间差异有显著性（P＜0．05）。10例ITP治疗前，治疗后第5天，第10天时外周血HHV－6－DNA检测，分别有3，3，2例阳性。结论：ITP与HHV－6的感染呈正相关，骨髓中HHV－6－DNA检出率高于外周血中     

5种乳腺癌相关指标血清检测的临床价值分析

目的了解hMAM、NF-κB、CA153、OPN和MMP-13 5种血清指标诊断乳腺癌的临床价值。方法 ELISA法检测hMAM、NF-κB、OPN和MMP-13,雅培i2000全自动发光仪检测CA153,比较乳腺癌组(59例)和正常对照组(35例)外周血中5种指标的表达特点,验证其临床价值。结果与正常对照组比较,hMAM、NF-κB、CA153和OPN在乳腺癌中高表达,且差异有统计学意义;对乳腺癌的诊断价值,从高到低分别为:hMAM、NF-κB、CA153和OPN。不同病理分期中,CA153和OPN在乳腺癌晚期显著升高。结论 hMAM、NF-κB、CA153和OPN对乳腺癌诊断具有一定的价值,其中hMAM更好;当CA153和OPN明显升高,可能提示乳腺已进入中晚期。